UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE DEPARTAMENTO DE EDUCAÇÃO FÍSICA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO STRICTO-SENSU EM EDUCAÇÃO FÍSICA ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA (ETCC) SOBRE O CÓRTEX MOTOR NA MODULAÇÃO AUTONÔMICA EM PESSOAS COM LESÃO MEDULAR COM DIFERENTES GRAUS E NÍVEIS DE LESÃO. Fabiana Tenório Gomes da Silva NATAL - RN 2014 ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA (ETCC) SOBRE O CÓRTEX MOTOR NA MODULAÇÃO AUTONÔMICA EM PESSOAS COM LESÃO MEDULAR COM DIFERENTES GRAUS E NÍVEIS DE LESÃO. FABIANA TENÓRIO GOMES DA SILVA Dissertação apresentada ao Programa de Pós- Graduação em Educação Física da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, como requisito para obtenção do grau de Mestre em Educação Física. ORIENTADOR: Prof. Dr. Paulo Moreira Silva Dantas CO-ORIENTADOR: Prof. Dr. Eryvaldo Sócrates Tabosa do Egito iii iv UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE DEPARTAMENTO DE EDUCAÇÃO FÍSICA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO STRICTO-SENSU EM EDUCAÇÃO FÍSICA Coordenador do Programa de Pós Graduação em Educação Física: Prof. Dr. Arnaldo Luis Motatti v FABIANA TENÓRIO GOMES DA SILVA ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA (ETCC) SOBRE O CÓRTEX MOTOR NA MODULAÇÃO AUTONÔMICA EM PESSOAS COM LESÃO MEDULAR COM DIFERENTES GRAUS E NÍVEIS DE LESÃO. COMISSÃO EXAMINADORA: ___________________________________________________ Prof. Dr. Paulo Moreira Silva Dantas Universidade Federal do Rio Grande do Norte ___________________________________________________ Prof. Dr. Breno Guilherme de Araújo Tinôco Cabral Universidade Federal do Rio Grande do Norte ___________________________________________________ Prof. Dr. Alair Pedro Ribeiro de Souza e Silva Universidade Federal do Rio de Janeiro vi AGRADECIMENTOS Existem tantas pessoas para agradecer durante toda minha trajetória até o presente momento que não sei como começar. Desde então, começo minha colcha de retalhos através do meu princípio, meio e fim que é JESUS CRISTO, onde todas as coisas iniciam e convergem. O meu grande EU SOU colocou em minha vida pessoas que tenho admiração, apreço e amor que são meus pais Sebastião Jerônimo e Mirian Tenório que se esvaziaram, por longos anos, de seus objetivos e desejos em função de unificá-los aos meus e aos de minha irmã Evelyne Tenório. Mãe, Pai e Irmã vejo em vocês a minha base, a minha forma de ser e conduzir os planos de Deus traçados para mim. Gostaria de agradecer a meu orientador Prof. Dr. Paulo Moreira Silva Dantas e a meu co-orientador Eryvaldo Sócrates Tabosa do Egito por participarem de minha vida acadêmica de forma ímpar, mostrando sempre que o homem por mais inteligente que possa ser, se não for humilde, o seu melhor se perde na arrogância, pois a humildade é a partemais bela da sabedoria. Continuando minha colcha de retalhos, agradeço a todos meus voluntários que participaram da pesquisa, pois reconheço que não foi fácil para nenhum, mas que a dificuldade não foi parâmetro para desistirem da pesquisa. Agradeço em particular ao voluntário Gleidson Rodrigo do Amaral Ribeiro que ajudou de forma ímpar tabulando os dados, fazendo gráficos e tabelas até altas horas da madrugada. Agradeço aos meus amigos da base de pesquisa AFISA que sempre me deram força para concluir minha pesquisa em particular Jeferson Tafarel Pereira do Rêgo, Leônidas de Oliveira Neto e Rafaela Catherine da Silva que ajudaram de forma miniciosa na construção e excução do projeto de pesquisa e Scheila Mariza Pinheiro por ajudar enumeras vezes nas construções de minhas apresentações. Da mesma forma aos meus alunos de iniciação científica Anna Gracielle Ananias, Ignáci Tobias Diez, Antônio Carlos Queiroz Aquino e Jordan Carlos Silva de Medeiros. Por fim, gostaria de agradecer aos meus familiares e amigos pela compreensão nos momentos em que a dedicação aos estudos foi exclusiva, a todos que contribuíram direta ou indiretamente para que esse trabalho fosse realizado meu eterno AGRADECIMENTO. vii SUMÁRIO 1. INTRODUÇÃO ................................................................................................. 14 2. OBJETIVOS .................................................................................................... 18 2.1 GERAL .......................................................................................................... 18 2.2 ESPECÍFICOS .............................................................................................. 18 3. REVISÃO DE LITERATURA .......................................................................... 19 3.1 LESÃO MEDULAR ........................................................................................ 19 3.2 NEUROANATOMIA ..................................................................................... 20 3.3 LESÃO MEDULAR: ALTERAÇÕES PERIFÉRICAS E CENTRAIS.............. 20 3.4 SISTEMA NERVOSO AUTONÔMICO E ALTERAÇÕES APÓS LESÃO MEDULAR ......................................................................................................... 22 3.4.1 CHOQUE NEUROGÊNICO ...................................................................... 23 3.4.2 HIPOTENSÃO ORTOSTÁTICA .............................................................. 23 3.4.3 DISREFLEXIA AUTONÔMICA ................................................................ 24 3.5 O CÉREBRO E O CONTROLE DO SISTEMA NERVOSO AUTONÔMICO . 24 3.6 ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA (ETCC) ................................................................................................................. 25 3.7 ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA SOBRE O CÓRTEX MOTOR E ALTERAÇÕES NO SISTEMA NERVOSO AUTONÔMICO ................................................................................................... 27 3.8 VARIABILIDADE DA FREQUÊNCIA CARDÍACA ......................................... 28 4. MATERIAIS E MÉTODOS ............................................................................ 29 4.1 MODELO DO ESTUDO ................................................................................. 29 4.2 SUJEITOS ..................................................................................................... 29 4.3 PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS ......................................................... 30 4.4 PROCEDIMENTOS DA ETCC ...................................................................... 31 4.5 AQUISIÇÃO DA RAZÃO LF/HF, LF E HF ........................................................................................................................ 32 5. ANÁLISE ESTATÍSTICA ................................................................................ 32 6. RESULTADOS ................................................................................................ 33 7. DISCUSSÃO ................................................................................................... 8. CONCLUSÃO .................................................................................................. 9. AGRADECIMENTOS ....................................................................................... 38 40 40 viii 10. COMENTÁRIOS E SUGESTÕES ................................................................. REFERENCIAS ............................................................................................. 40 41 ANEXO ................................................................................................................ 46 ix LISTA DE ABREVIATURAS LM Lesão medular ETCC Estimulação transcraniana por corrente contínua AEM Atividade elétrica muscular FC Frequência cardíaca ASIA American Spinal Injury Association SNA Sistema Nervoso Autonômico M1 Córtex motor primário SNS Sistema Nervoso Simpático SNP Sistema Nervoso Parassimpático FC Frequência Cardíaca PET Tomografia por Emissão de Pósitrons PME Potêncial Motor Evocado x LISTA DE TABELAS Tabela 1. Características dos sujeitos .......................................................... 33 Tabela 2. Descrição dos resultados de acordo com o grau e nível de lesão .. 34 xi LISTA DE FIGURAS Figura 1. Classificação das lesões medulares de acordo com o nível anatômico da lesão. .................................................................. 20 Figura 2. Sistema nervoso periférico autônomo ...................................... 21 Figura 3 Duração dos efeitos da ETCC anódica e catódica ................... 26 Figura 4. Equipamento portátil de ETCC utilizado no estudo e seus componentes ............................................................................ 31 Figura 5. Ilustração da configuração dos eletrodos, ânodo e cátodo, para aplicação da ETCC........................................................... 32 Figura 6. Efeitos da ETCC sham e anódica sobre LF/HF nos períodos antes (PRÉ-E), durante (DURANTE-E) e depois da estimulação (PÓS-E)........................................................... 35 Figura 7. Efeitos da ETCC sham e anódica sobre LF nos períodos antes (PRÉ-E), durante (DURANTE-E) e depois da estimulação (PÓS-E)............................................................ 36 Figura 8. Efeitos da ETCC sham e anódica sobre HF nos períodos antes (PRÉ-E), durante (DURANTE-E) e depois da estimulação (PÓS-E)............................................................ 36 xii RESUMO ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA (ETCC) SOBRE O CÓRTEX MOTOR NA MODULAÇÃO AUTONÔMICA EM PESSOAS COM LESÃO MEDULAR COM DIFERENTES GRAUS E NÍVEIS DE LESÃO. Autor: FABIANA TENÓRIO GOMES DA SILVA Orientador: Prof. Dr. PAULO MOREIRA SILVA DANTAS Introdução: Estimulação transcraniana por corrente continua (ETCC) tem sido usada em estudos voltados para o tratamento da dor periférica crônica em pessoas com lesão medular (LM), mas seus efeitos sobre o sistema nervoso autonômico (SNA) nestes indivíduos são inexistentes e, portanto a necessidade de estudos é de fundamental importância, pois estes indivíduos apresentam desbalanço autonômico, e sua intensidade é dependente do grau e nível da lesão. Objetivo: Investigar se a ETCC sobre o córtex motor primário irá modular o controle do SNA em pessoas com LM e se estas alterações são dependentes do grau e nível de lesão. Métodos: Estudo randomizado, placebo controlado, aplicou ETCC anódica ou sham sobre o córtex motor primário (M1), bilateralmente, com o eletrodo de referência sendo colocado na protuberância occipital. Dezenove sujeitos (lesão incompleta baixa (n=7), completa baixa (n=9) e completa alta (n=3)) visitaram o laboratório três vezes e receberam ETCC ativa ou sham por 13min. A variabilidade da frequência cardíaca (VFC) foi medida antes, durante e pós-estimulação. A VFC foi calculada usando a analise espectral batimento a batimento dos intervalos derivados das ondas r-r. Resultados: A ETCC modulou o sistema nervoso autonômico de forma divergente nos grupos analisados. Nos indivíduos com LM completa alta a ETCC não alterou a VFC. Para os indivíduos com LM incompleta baixa a ETCC alterou a VFC no sentido de aumentar o simpático e reduzir o parassimpático e para os indivíduos com LM completa baixa a ETCC reduziu o simpático e aumentou o parassimpático. Conclusão: O presente estudo observou que a ETCC anódica aplicada sobre o córtex motor primário de forma bilateral, conseguiu modular o balanço do SNA em pessoas com lesão medular e este efeito é dependente do grau e nível de lesão. Palavras-chave: Estimulação Transcraniana; Sistema nervoso autonômico; Variabilidade da frequência cardíaca; Lesão medular. xiii ABSTRACT EFFECT OF ANODAL TRANSCRANIAL DIRECT CURRENT STIMULATION ON MOVEMENT CONTROL IN PARA-POWERLIFTERS Author: JEFERSON TAFAREL PEREIRA DO RÊGO Supervisor: Prof. Dr. HENIO FERREIRA DE MIRANDA Introduction: Transcranial Direct Current Stimulation (tDCS) has been used in studies for the treatment of chronic pain, but their effects on the autonomic nervous system (ANS) are non-existent. Therefore, the need for studies is of fundamental importance, as these individuals have autonomic imbalance and the intensity of this is dependent on the degree and level of injury. Objective: We investigated the effect of tDCS on the ANS in people with spinal cord injury (SCI) with different degrees and levels of injury. Methods: Randomized, placebo-controlled, double-blind, applied anodal tDCS or sham on the primary motor cortex (M1), bilaterally. The subjects (lower incomplete injury, n = 7; lower complete injury, n = 9; and high complete thoracic injury, n = 3) visited the laboratory three times and received active or sham tDCS for 13min. The heart rate variability (HRV) was measured before, during and after stimulation and analyzed the variables LF, HF and LF / HF. Results: The tDCS modulated the ANS in different ways among the groups. In individuals with SCI high complete thoracic the tDCS did not change the HRV. However, for individuals with SCI low incomplete, tDCS changed the HRV in order to increase sympathetic (LF, p = 0.046) and reduced parasympathetic (HF, p = 0.046). For individuals SCI low complete to tDCS changed the HRV reduction sympathetic (LF, p = 0.017) and increased parasympathetic (HF, p = 0.017). Conclusions: The present study suggests that anodal tDCS applied on the motor cortex bilaterally could modulate the ANS balance in people with spinal cord injury and that this effect is dependent on the degree and level of injury. key words: Transcranial stimulation; Autonomic nervous system; Heart rate variability; Spinal cord injury. 14 1. INTRODUÇÃO Após a lesão medular (LM) existem alterações fisiológicas que repercutem no cotidiano destes indivíduos, tais como: aumento do nível de fadiga, hipotensão com mudanças de decúbito e aumento de fatores que podem desencadear síndrome metabólica. Atualmente, estudos com pessoas com LM com o objetivo voltado para melhora na qualidade de vida destes indivíduos são escassos. Desde então a busca por novas técnicas que gerem resultados positivos no dia a dia desta população são objetivos de estudo de diversos grupos de pesquisas. Visando melhorar a qualidade de vida de pessoas com deficiência física e o aumento do rendimento de paratletas, foi criado em 2011 um projeto de extensão na universidade federal do Rio Grande do Norte (UFRN), núcleo interdisciplinar para pessoa com deficiência (NIPED), que consiste no sincretismo de intervenções e avaliações realizadas por profissionais como fisioterapeutas, educadores físicos, nutricionistas e psicólogos, prestadas a população. Em 2012 iniciou-se dentro do NIPED os estudos específicos com lesão medular (LM), e na busca de sanar alguns questionamentos, observou-se que estudar apenas alterações em nível periférico, não eram suficientes, desde então, o estudo do cérebro se tornou a base necessária para nossas inquietações. Dentro desta perspectiva observou-se que pessoas com LM apresentam diversas alterações como atrofia cortical de áreas diretamente relacionadas ao movimento como o córtex motor primário e a área motora suplementar, assim como o trato corticoespinhal(1), e que este fator interferia diretamente em suas respostas eletromiográficas(2). Para observar se a estimulação do córtex motor primário, área cortical responsável pela liberação descendente do movimento, que em indivíduos com LM é atrofiada, iria interferir na atividade elétrica muscular, chegou-se ao consenso de analisar os efeitos de uma técnica, que atualmente está sendo utilizada na reabilitação de pessoas com LM com dor periférica crônica e para o aumento de rendimento em atletas sem deficiência física que é a estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC), sobre a atividade elétrica muscular (AEM). De acordo com a literatura, a ETCC tem mostrado efeito positivo, aumentando a AEM em contrações isométricas voluntárias máximas(3) em pessoas sem deficiência física. Desde então, na tentativa de observar se a ETCC iria alterar algum padrão 15 elétrico muscular em um tipo de teste que se aproximasse ao máximo de suas habilidades diárias, optou-se por um teste dinâmico. Nos estudos iniciais, analisamos os efeitos da ETCC sobre a atividade eletromiográfica (EMG) e tolerância ao exercício em indivíduos com LM ativos e sedentários, nossos resultados mostraram que a ETCC não alterou a EMG nem a tolerância ao exercício de forma significativa, mas melhorou o tempo de exercício por mais de 1 minutos para alguns indivíduos. Nosso próximo passo foi analisar o efeito da ETCC sobre uma variável de fundamental importância para indivíduos com LM, que foi a variabilidade da frequência cardíaca (VFC), pois estudos com o uso da ETCC em pessoas com LM são escassos e pesquisas sobre seus efeitos na VFC só existem em pessoas sem lesão medular, o que não reflete dados semelhantes, devido aos indivíduos com LM apresentarem diversas alterações centrais e periféricas, e saber como estas alterações ocorrem e como funciona o controle do sistema cardiovascular, é de fundamental importância. O controle do sistema cardiovascular é realizado, em parte, pelo sistema nervoso autônomo (SNA), o qual fornece nervos aferentes e eferentes ao coração, na forma de terminações simpáticas e parassimpáticas. Estas agem no coração de forma antagônica refletindo diretamente na frequência cardíaca(4). O sistema nervoso simpático tem o papel de aumentar a frequência cardíaca (FC), a contratilidade miocárdica, a resistência vascular periférica e a pressão sanguínea, por induzir vasoconstrição. Já o sistema nervoso parassimpático tem o papel de diminuir a FC(5) e seus efeitos são amplamente apreciados devido a sua ação anti-arrítmica que é clinicamente relevante a uma série de estados patológicos(6) e de lesões sobre o sistema nervoso central, como lesão medular (LM)(7). O trauma raqui-medular leva o paciente a complicações neurológicas graves e incapacitantes sob o ponto de vista sensitivo, motor, e neuro-vegetativo abaixo do local comprometido(5). Existem também disfunções no SNA, pois o controle da FC e da pressão arterial dependem da atividade dos centros supra-espinhais e sua comunicação com as vias descendentes e na LM estas vias são interrompidas, tornando os circuitos da coluna vertebral incapazes de gerar atividade simpática. Estes fatores geram no paciente bradicardia reflexa, hipotensão ortostática e perda da flutuação diurna da pressão arterial(5), redução da VFC(8). Esses resultados sugerem um aumento no controle do sistema nervoso parassimpático e uma 16 diminuição do sistema nervoso simpático em indivíduos lesionados na condição de repouso. Existem muitas formas de avaliar o controle neural do coração e atualmente a variabilidade da frequência cardíaca (VFC) vem sendo utilizada como uma ferramenta simples, eficaz e não invasiva, para avaliar as flutuações que ocorrem em períodos curtos ou prolongados entre os batimentos(9). A VFC está relacionada à variação do ritmo cardíaco, medido pelo tempo transcorrido entre duas ondas R consecutivas do eletrocardiograma e pelo monitor cardíaco (intervalo R-R). Um aumento na VFC representa uma maior atividade do sistema nervoso parassimpático (SNP) e menor da atividade do sistema nervoso simpático (SNS). Inversamente, uma maior atividade do SNS, representada por uma menor VFC, estaria relacionada a um maior índice de morbidade e mortalidade(10). Atualmente técnicas de reabilitação, como a estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC), são utilizadas com o objetivo de reduzir os efeitos negativos gerados pela plasticidade cerebral pós-trauma como a inibição inter- hemisférica e função motora em pacientes pós-avc(11) e dor periférica crônica pós- lesão medular(12). A ETCC tem ganhado espaço nas pesquisas por ser uma técnica simples, de fácil manuseio, mais acessível, indolor, não invasiva, sem efeitos colaterais e por influenciar a excitabilidade cortical(13). No uso da ETCC existem diversas configurações para colocar os eletrodos no escalpo, entretanto, na maior parte das pesquisas para dor periférica crônica em pessoas com LM, o eletrodo ativo é colocado no córtex motor de forma unilateral e o de referencia no supraorbital o que poderia inibir o córtex pré-frontal medial e reduzir o controle sobre o sistema nervoso simpático causando simpatoexcitação e assim reduzir a VFC, o que não é positivo para esta população que já apresenta uma VFC reduzida e propensão em desenvolver doenças cardíacas e coronarianas. Embora a aplicação da ETCC em pessoas com LM tenha mostrando resultados positivos para o tratamento da dor periférica crônica, pouco se sabe se esta técnica altera a função do SNA nestes indivíduos, pois em pessoas sem deficiência física a ETCC sobre o córtex motor primário modula o SNA no sentido de aumento simpático(14), mostrando a necessidade de estudos que analisem os efeitos da ETCC sobre a VFC em pessoas com LM, para assim, a técnica ser usada de forma que não apresente riscos aos indivíduos que recebem tal intervenção. Portanto o problema do presente estudo centra-se na investigação sobre a possível 17 ação da ETCC sobre o córtex motor primário interferindo sobre o controle autonômico de repouso em indivíduos com lesão medular e se estas alterações são dependentes do grau e nível de lesão. 18 2. OBJETIVOS 2.1 GERAL Verificar se a ETCC vai conseguir modular o controle autonômico cardíaco de repouso em indivíduos com LM que apresentam diferentes graus e níveis de lesão. 2.2 ESPECÍFICOS  Identificar a ação da ETCC sobre o controle autonômico cardíaco no repouso através da VFC em indivíduos com LM;  Verificar se a ação da ETCC sobre o controle autonômico cardíaco é dependente do grau e nível de lesão.  Observar os períodos que a ETCC gerou diferença significativa em relação ao tempo inicial antes da aplicação da ETCC.  Identificar se o tempo que a ETCC gerou alguma alteração significativa é divergente entre os diferentes graus e níveis de lesão. 19 3. REVISÃO DA LITERATURA 3.1 LESÃO MEDULAR Lesão medular é um dano à rede neural responsável pela transmissão, coordenação sensorial e motora, bem como o controle autonômico dos órgãos(15). Atualmente no Brasil existem cerca de 130 mil pessoas com LM(16), e estimasse que 6 mil novos casos acontecessem por ano(17), sendo caracterizado como o problema de saúde pública. De acordo com as médias, a incidência de pessoas com LM é mais expressiva nos adultos jovens, do sexo masculino, solteiros e residentes em áreas urbanas(18). A causa predominante constitui-se em virtude de algum tipo de trauma, infecção, isquemia, compressão por hematoma, tumor, ou ainda, por doença congênita ou degenerativa, podendo levar a um comprometimento na transmissão dos impulsos nervosos, gerando alterações variadas na sensibilidade e no controle motor voluntário e involuntário(19). É importante ressaltar que a etiologia da LM não implica nas diferenças no quadro da lesão; entre as diversas etiologias há um compartilhamento semelhante de alterações, consequentes do tipo de lesão – parcial/incompleta ou total/completa – e da altura da lesão – quanto mais cranial (alta) a lesão, mais graves são as consequências e comprometimentos. A classificação proposta pela American Spinal Injury Association(20) vem se destacando atualmente na literatura como uma importante (talvez a melhor) ferramenta dentre os principais parâmetros para classificar o indivíduo com LM. A ASIA(20) classifica em dois tipos de lesões: completa (nenhum impulso nervoso aferente ou eferente consegue ser enviado às regiões inervadas abaixo do local da lesão, devido ao total comprometimento das estruturas internas da medula espinhal); ou incompleta (algumas fibras nervosas são mantidas e, assim, uma porção dos impulsos nervosos é transmitida). Conforme a conceituação da ASIA(20), a Tetraplegia refere-se à redução ou perda da função motora e/ou sensorial no segmento cervical da medula espinhal, resultando na diminuição das funções tanto dos membros superiores como dos membros inferiores. A Paraplegia refere-se à redução ou perda da função motora e/ou sensorial nos segmentos torácico e lombar da medula espinhal abaixo da LM. 20 Figura 1. Classificação das LM de acordo com o nível anatômico da lesão. Fonte – Adaptado de Saint Lukes Health, 2009. 3.2 NEUROANATOMIA A medula espinhal está localizada no canal medular da coluna vertebral e é a via de condução dos estímulos motores e sensitivos entre o encéfalo e os órgãos periféricos efetores. Em sua parte externa é encontrada a substância a substância branca, que contém os tratos longitudinais e sua área central é constituída por a substância cinzenta, formada por corpos celulares de neurônios espinhais(21). A medula espinhal mede aproximadamente 42 a 45 cm no adulto do sexo masculino. Em continuidade com o bulbo, seu limite anatômico cranial é o forame magno no osso occipital, e o caudal, geralmente, na 2a vértebra lombar (L2)(22). A medula espinhal faz conexão com 31 pares de nervos espinhais, sendo 8 pares cervicais, 12 torácicos, 5 lombares, 5 sacrais e normalmente 1 coccígeo(19). A medula recebe impulsos parassimpáticos e simpáticos que são realizados por diversos neurônios. O estímulo parassimpático é realizado por neurônios localizados nas regiões tronco-cefálicas e sacrais. Já os estímulos simpáticos são realizados por neurônios localizados nos segmentos da medula da primeira vértebra torácica (T1) a segunda vértebra lombar (L2). Estes estímulos se originam via cerebral e são conduzidos aos órgãos efetores. 21 Figura 2. Sistema nervoso periférico autônomo. Fonte: Adaptado de Machado, 2000. Estudos revelam que existem áreas cerebrais que são responsáveis pelo controle do sistema nervoso autonômico (SNA) como a insula(23), o córtex pré-frontal medial(24), e o córtex motor primário(14) e estas quando estimuladas, inibidas ou lesionadas alteram o controle autonômico. 3.3 LESÃO MEDULAR: ALTERAÇÕES PERIFÉRICAS E CENTRAIS Após a LM, ocorrem diversas alterações tanto em nível periférico como em nível central que normalmente afetam o paciente em sua capacidade funcional e de realizar as tarefas simples em seu cotidiano, podendo assim, aumentar o risco de doenças como diabetes, hipertensão e doenças cardíacas. A intensidade com que estas alterações ocorrem, dependerá do grau e nível da lesão, com indivíduos com lesão mais alta, apresentando efeitos mais expressivos(25). Algumas das alterações em nível periférico que ocorrem pós LM são redução da área de secção transversa da fibra muscular(26), aumento da porcentagem de gordura intra-muscular(27), aumento da insulinemia(27), redução de proteínas responsáveis pelo controle iônico muscular como Na+K+ ATPase(28), aumento da excitabilidade do trato corticoespinhal resultando em um maior potencial motor 22 evocado nas musculaturas preservadas destes indivíduos(29) além das alterações hormonais. Existem diversos hormônios que são alterados pós-lesão, dentre eles as catecolaminas são o maior foco em estudos. Um estudo recente(30) analisou a relação entre a liberação de adrenalina plasmática com a quantidade oxidada de ácido graxo de baixa densidade (LDL) pós-exercício físico, e comparou indivíduos com LM com indivíduos sem LM. Seus resultados mostraram que durante o exercício existiu aumento de catecolaminas para ambos os grupos, só que de forma bem menos expressiva para os indivíduos com LM. Já para a quantidade de LDL oxidada, não foi observado aumento em indivíduos com LM divergindo dos indivíduos sem LM que apresentaram aumento significativo. O que pode mostrar a importante relação da adrenalina para redução de LDL. Estudos(31, 32) que analisam a concentração de catecolaminas no repouso de indivíduos com LM e que dividem por grau e nível de lesão, mostram resultados interessantes, pois indivíduos com paraplegia com a lesão mais baixa apresentam níveis de adrenalina e noradrenalina mais altos que os indivíduos com paraplegia com lesão mais alta e indivíduos sem LM, e esta diferença é ainda mais expressiva quando comparada com tetraplégicos. Estes fatores devem ser levados em consideração em estudos que analisem disfunção autonômica em indivíduos com LM. Estudos com lesados medulares também mostram alterações em nível central(33), como a hipotrofia(1) do córtex motor primário (M1), redução de fluxo sanguíneo cerebral(34) e uma área de representação cortical dos membros superiores maior quando comparados com indivíduos sem lesão medular(29), mostrando que após a LM existe plasticidade, e esta deve ser levada em conta tanto em nível de reabilitação, em estágio agudo, como também crônico, pois muitos destes fatores estão relacionados e divergem de acordo com o tipo, grau e altura da lesão(34), assim como a capacidade plástica cerebral de cada indivíduo(1). 3.4 SISTEMA NERVOSO AUTONÔMICO E ALTERAÇÕES APÓS LESÃO MEDULAR O SNA é composto pelo sistema nervoso simpático (SNS) e pelo parassimpático (SNP). É responsável por controlar múltiplas funções através de vias 23 complexas, simpáticas e parassimpáticas, com funções regulatórias opostas. O SNS tem o papel de aumentar a frequência cardíaca (FC), a contratilidade miocárdica, a resistência vascular periférica e a pressão sanguínea, por induzir vasoconstrição. Já o sistema nervoso parassimpático tem o papel de diminuir a FC(5) e seus efeitos são amplamente apreciados devido a sua ação anti-arrítmica que é clinicamente relevante a uma série de estados patológicos(6) e de lesões sobre o sistema nervoso central, como LM(7). Após a LM alguns eventos são reconhecidos como disfunções autonômicas como o choque neurogênico, a disfunção cardiovascular (hipotensão ortostática) e a disreflexia autonômica. 3.4.1 CHOQUE NEUROGÊNICO Logo após a LM ocorre uma estimulação simpática elevada e uma atividade parassimpática reflexa, que geralmente dura cerca de 3-4 minutos, provocando uma resposta hipertensiva inicial que é condicionada pela grande libertação de catecolaminas da supra-renal e é caracterizado como choque neurogênico. Os efeitos gerados pelo choque neurogênico traduz-se em uma tensão arterial sistólica inferior a 90mmHg (medida em decúbito dorsal), bradicardia, e temperatura da pele mais elevada. Seu tratamento implica na correção da hipotensão e bradicardia, dependendo da gravidade das disfunções cardíaca e vasomotor(35). E seu tempo de duração é dividido em quatro fases: arreflexia ou hiporreflexia (0-24 horas); reversão inicial com aparecimento de reflexos (1-3 dias); hiperreflexia inicial (4 dias - 1 mês) e espasticidade (1-12 meses)(36). 3.4.2 HIPOTENSÃO ORTOSTÁTICA A hipotensão ortostática é caracterizada por uma diminuição ≥ a 20mmHg na pressão sistólica e/ou ≥ a 10mmHg diastólica, que geralmente ocorre com uma média de 3 minutos após a mudança da posição de decúbito para a posição ortostática, independentemente de ser ou não sintomática(37). Os sintomas são tonturas e/ou vertigem, cefaleias, fadiga, hipersudorese, náusea, palidez e até mesmo perda de consciência. Na maioria dos doentes existe uma adaptação 24 progressiva, ao longo do tempo, com diminuição da frequência e gravidade dos episódios(38). 3.4.3 DISREFLEXIA AUTONÔMICA Disreflexia autonômica é uma hipertensão episódica que apresenta risco de vida e se desenvolve em 50-90% das pessoas com tetraplegia ou paraplegia alta(39). Durante a disreflexia, existe um aumento da pressão arterial que é induzida por estímulos sensoriais, na medula espinhal, abaixo do nível da lesão, causando debilitantes dores de cabeça, sudação, convulsões, derrames e até mesmo a morte. Esta hipertensão pode ser iniciada por procedimentos diários de rotina, tais como a distensão da bexiga, falta de evacuação intestinal, objetos que causem efeitos nociceptivos e até mesmo ficar por muito tempo em uma mesma posição(40). Os mecanismos que são desencadeados para ocorrer a Disreflexia autônomica, que são considerados incluem a regulação alta dos receptores vasculares de catecolaminas, aumento da liberação de catecolaminas neural, diminuição da recaptação pré-sináptica de catecolaminas, perda do reflexo barorreceptor e perda de inputs inibitórios via bulbo espinhal(41). 3.5 O CÉREBRO E O CONTROLE DO SISTEMA NERVOSO AUTONÔMICO Embora o sistema cardiovascular seja capaz de manter o fluxo sanguíneo e a função cardíaca na ausência de estímulos provenientes do sistema nervoso central, as vias neurais que estão conectadas ao SNA, permitem um controle mais sincronizado e rápido, quando comparada aos fatores hormonais(42), buscando manter a homeostasia nas diversas condições diárias dos indivíduos. É de conhecimento que centros autonômicos cerebrais recebem informações aferentes sobre os estados autônomos periféricos (43). Assim, áreas do cérebro que fornecem a integração eferente coordenam as respostas para o controle autonômico(44). Estudos experimentais têm ajudado a identificar os componentes da "rede autonômica central" e têm melhorado a nossa compreensão das relações funcionais entre os centros corticais e subcorticais do controle autonômico cardiovascular(43). 25 Uma pesquisa(45) realizada com neuroimagem funcional utilizando tomografia por emissão de pósitrons (PET) em humanos, analisou a pressão arterial média e a freqüência cardíaca, durante exercício isométrico e tarefas de stress mental e concluiram que as respostas neurais em regiões cerebrais distintas acompanham excitação cardiovascular periférica, pois o exercício e as tarefas de stress mental aumentaram as variáveis analisadas, como também aumentaram o nível de excitação em áreas cerebrais específicas como o córtex cingulado anterior , córtex pré-frontal ventromedial e hipocampo córtex pré-frontal medial, cingulado anterior, lobo temporal medial e ínsula. Um estudo(46) utilizando PET analisou pressão arterial, variabilidade da frequência cardíaca e catecolaminas plasmáticas e sua relação com duas áreas cerebrais, núcleo caudado e o córtex motor primário em indivíduos saudáveis, com estímulos visuais diferentes, durante o repouso. Seus resultados mostram correlação negativa entre o aumento do metabolismo da glicose no núcleo caudado e catecolaminas plasmáticas e frequência cardíaca. Entretanto, houve uma correlação positiva entre catecolaminas plasmáticas e ativação do córtex motor primário. 3.6 ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA (ETCC) O uso da corrente elétrica por pesquisadores teve inicio com a descoberta de que descargas elétricas geradas por peixes elétricos colocados em contato com a cabeça de pacientes, desencadeavam efeitos positivos como alivio imediato da dor de cabeça. Com os avanços tecnológicos, novas técnicas não invasivas para modular a função cerebral vêm sendo desenvolvidas, dentre as quais se destaca a ETCC, que tem sido cada vez mais utilizada no âmbito da pesquisa e da prática clínica para alterar o estado funcional do cérebro humano (47-49). A ETCC é uma técnica de neuromodulação não-invasiva(50) que é utilizada para estimulação cortical através de correntes elétricas aplicadas de forma contínua, com o intuito de aumentar ou inibir a excitabilidade da membrana cortical. As correntes elétricas aplicadas pela ETCC são divididas em anódica, responsável pelo aumento da excitabilidade cortical, facilitando o potencial de ação pela redução do limiar excitatório da membrana e catódica, que está relacionada à inibição do 26 estimulo elétrico no córtex agindo na hiperpolarização da membrana, o que aumenta o limiar excitatório (51) as correntes anódicas têm o potencial de despolarizar Os efeitos da ETCC são dependentes de alguns fatores como(51) duração, intensidade da corrente e polaridade do eletrodo. De acordo com Nitsche e Paulus que testaram diferentes protocolos de ETCC sobre o potencial motor evocado (PME), com intensidades de 0,2 e 1,0 mA e tempos de estimulação de 1 e 5 min, respectivamente, observaram que ETCC anódica com duração de 5 min aumentou a excitabilidade cortical, incrementando a amplitude do potencial motor evocado em torno de 40% após a estimulação, enquanto a catódica provocou uma redução de 30% do PME, ou seja, existe uma interdependência entre a polaridade (Figura 2) e o PME (ânodo estimula e cátodo inibe o PME), bem como a intensidade-dependência para a corrente anódica (quanto maior a intensidade, maior o PME e repercussão do efeito pós-estimulação). Posteriormente foi realizado um outro estudo, observando o efeito da ETCC em diferentes tempos de estimulação e com dobro da intensidade, analisando os efeitos da ETCC no decorrer de até 2h pós-estimulação. Foi possível observar que a ETCC aplicada por 9 min. em uma intensidade de 2mA, gera alterações na excitabilidade que persiste por uma hora ou mais(49). Figura 3: Duração dos efeitos da ETCC anódica e catódica. Fonte: Nitsche e Paulus (2000) Tecnicamente, a ETCC consiste no posicionamento de dois eletrodos de borracha, envoltos com esponjas embebecidas em meio líquido salino, com o objetivo de evitar o contato direto com a pele do voluntário, porém permitindo a 27 condução elétrica e reduzindo os riscos de reações indesejáveis(52). A corrente aplicada durante a ETCC varia entre 0,4 e 2,0mA, aplicada no escalpo em um período de 3 a 20 minutos, geralmente. Os eletrodos são posicionados de acordo com o objetivo da aplicação. Caso o intuito seja aumentar a excitabilidade da membrana cortical, o ânodo é colocado sobre a região objetivada e o cátodo, ou eletrodo de referência, sobre outra região que não gere influência sobre a primeira. Se o objetivo for reduzir a excitabilidade do córtex, os eletrodos devem ser posicionados de forma contrária. Para a aplicação da ETCC, utiliza-se um equipamento portátil, como o mostrado na Figura 3, que possui capacidade de transmitir estímulos elétricos constantes com amperagem máxima de 5mA. O equipamento é constituído por dois eletrodos (ânodo e cátodo), potenciômetro (componente que permite o controle de intensidade da corrente) e três baterias de 9V cada. Construído de modo previamente programado para permitir intervenções simuladas, o aparelho possui um interruptor na parte traseira que possibilita interromper a passagem de corrente elétrica aos eletrodos. Porém, é mantida a exibição dos parâmetros de estimulação ao longo da intervenção. Isto faz com que seja possível a realização de estudos com grupos controle, a partir da aplicação de estímulos placebo (53). 3.7 ESTIMULAÇÃO TRANSCRANIANA POR CORRENTE CONTÍNUA SOBRE O CÓRTEX MOTOR E ALTERAÇÕES NO SISTEMA NERVOSO AUTONÔMICO Estudos que analisem os efeitos da ETCC no SNA, quando aplicada sobre o córtex motor primário, são escassos e seus resultados apresentam divergências. Alguns relatam alterações no sentido de aumento simpático e outros não mostram alterações, embora o córtex motor primário esteja ligado a vias de controle autonômico(54), pois o córtex motor apresenta projeções na medula ventrolateral e esta envia projeções para o núcleo intermediolateral espinhal, onde os neurônios pré-ganglionares controladores coração e vasos sanguíneos (segmento T2) e da medula adrenal (segmento T8) são encontrados(54). Um estudo(55) realizado com indivíduos saudáveis, analisando pressão sanguínea, temperatura corporal, variabilidade da frequência cardíaca e concentração plasmática de cortisol, antes e pós 20min de ETCC sobre M1(lado dominante), mostrou que a ETCC apresentou resultados semelhantes para as condições sham e anódica para as diferenças encontradas entre os períodos antes e 28 pós ETCC para as variáveis temperatura corporal e concentração de cortisol. Para as variáveis pressão arterial, variabilidade da frequência cardíaca e ventilação, não foram encontradas diferenças nem entre os períodos, nem entre as condições sham e anódica. Em contra partida, um recente estudo(14) que analisou o efeito da ETCC sobre o SNA em indivíduos saudáveis, observou que a ETCC anódica aumentou a razão LF/HF durante e após a estimulação, quando comparada a catódica e sham. Embora as configurações dos eletrodos, córtex motor primário (hemisfério cerebral esquerdo) e supraorbital, intensidade da corrente (1mA) e tempo de estimulação (15min.) tenham sido divergentes dos nossos, talvez o tempo de 13min. com uma intensidade mais elevada (2mA) sejam suficientes para modular a atividade do SNA em indivíduos com LM, entretanto não sabemos o tempo que este efeito perdura. Outro fator que devemos levar em consideração é a configuração dos eletrodos, pois atualmente a maior parte dos estudos que analisam o efeito da ETCC sobre o SNA colocam o eletrodo de referência na região supraorbital, podendo chegar a inibir o córtex pré-frontal medial, e esta área esta relacionada ao controle do SNA e sua inibição pode gerar aumento de ativação simpática, o que deixa parte destes estudos inconclusivos(14). 3.8 VARIABILIDADE DA FREQUÊNCIA CARDÍACA A variabilidade da frequência cardíaca (VFC) é modulada pela ação do sistema nervoso autonômico, por isto desperta grande interesse do ponto de vista clínico, pela caracterização de doenças e lesão que podem influenciar o controle do sistema nervoso autonômico sobre os batimentos cardíacos, interferindo na variabilidade da frequência cardíaca. O aumento da variabilidade da frequência cardíaca revela a diminuição de mortalidade em ambos os gêneros(10). A mensuração da VFC é um método que nos permite analisar o controle neural cardíaco durante períodos curtos ou prolongados, em diversas condições fisiológicas (durante o sono, monitoramento de 24 horas, repouso, exercício físico e bloqueio farmacológico), patológicas e sobre efeito de intervenções(56-58), apresentando a vantagem de possibilitar uma avaliação não invasiva e seletiva da função autonômica, além de ser um recurso metodológico de grande simplicidade e fácil aplicação(59). 29 O eletrocardiograma (ECG), conversores analógicos e cardiofrequencímetros são os principais instrumentos utilizados para obtenção de índices que possibilitam a análise da VFC. Dentre esses dispositivos os cardiofrequencímetros vem se destacando devido a sua fácil aplicação, natureza não invasiva e a possibilidade do seu uso em estudos de campo e durante a prática desportiva permitindo assim registros da VFC com segurança e praticidade fora do ambiente ambulatorial(60). A VFC pode ser analisada através de dois métodos: pelo cálculo de índices baseado em operações estatísticas dos intervalos R-R (domínio do tempo) e pela análise espectral de intervalos R-R ordenados (domínio da frequência). As análises podem ser realizadas em segmentos curtos - 0,5 a 30 minutos - ou em gravações mais longa de 24 horas(61). As medidas do domínio da frequência são derivadas da análise do espectro de potência que apresenta a distribuição da densidade em função da frequência2. Esta análise decompõe a FC em seus componentes causadores, apresentando-os de acordo com a frequência com que alteram a FC. E, além da quantidade de variabilidade, também mostra as bandas de frequência das oscilações do ritmo cardíaco1. São destacadas duas faixas de frequências distintas: 1) alta frequência (0,15 a 0,40 Hz), elas são devidas à modulação vagal atuante sobre o nódulo sinoatrial(62) e 2) baixa frequência (0,04 a 0,15 Hz) elas expressam a intensidade da modulação simpática sobre o coração(63). Os componentes de alta e baixa frequência são assim chamados devido ao fato do nervo vago e o sistema simpático enviarem, respectivamente, uma maior ou menor frequência de impulsos sobre o nodo sinusal(63). 4. MATERIAIS E MÉTODOS 4.1 MODELO DO ESTUDO O presente estudo caracteriza-se como sendo de medidas repetidas, randomizado com desenho cruzado, placebo controlado e duplo cego. Desta forma, todos os sujeitos passaram por todas as condições de estimulação e a controle(64). 4.2 SUJEITOS 30 Dezenove indivíduos (32,47±8,07 anos; 62,12±13,83 Kg) de ambos os sexos (3 mulheres e 16 homens), com lesão medular crônica (16,92±11,74 anos), dos quais 7 apresentando lesão baixa incompleta em nível T12 - L1, 9 com lesão baixa completa a nível T11 e T12 e 3 com lesão alta completa entre C4 e T6, destros (inventário de dominância lateral de edimburgo(65)), foram informados dos procedimentos e riscos antes de assinarem o termo de consentimento livre e esclarecido. Os critérios de inclusão foram a não existência de lesão cerebral, diabetes, doenças cardíacas de alto risco e não apresentar peças metálicas. Além disso, cada voluntário foi instruído a não se alimentar até 3h antes do teste, não realizar atividade física vigorosa, fazer a ingestão de álcool e alimentos que contivessem cafeína, usar drogas ou nicotina e fazer atividades de stress mental elevado por muito tempo, durante um período de 24h antes dos testes. O laboratório apresentava temperatura e umidade do ar ideais para realização da pesquisa e isolamento acústico para evitar qualquer alteração de estimulo auditivo nos voluntários. Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética local (750.887). Todos os participantes assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido. 4.3 PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS Na primeira visita ao laboratório, cada indivíduo respondeu a uma anamnese que continha questões sobre tempo, tipo e grau da lesão, histórico pessoal de doenças crônicas degenerativas e para pesagem. Posteriormente foi explicado como seria realizada a pesquisa. Nas visitas seguintes ao chegar ao laboratório cada indivíduo ficou em repouso por 10min em uma maca, para analise da VFC, antes de começar a condição experimental – ETCC anódica ou sham (ver procedimentos ETCC) – por 13 min, que foi realizada com indivíduo sentado na cadeira de rodas. Logo após a estimulação, passou mais 10minutos na maca para uma nova analise da VFC. A FC e a VFC foram gravadas em toda a extensão do experimento. Todas as condições da pesquisa foram realizadas em um mesmo horário para evitar os efeitos de alterações do ciclo circadiano e com um intervalo de no mínimo 72hrs entre cada sessão, para não ocasionar o efeito carry-over(66). As sessões foram randomizadas e de forma duplo-cego. A partir dos dados obtidos nos testes, a 31 razão LF/HF, LF e HF foram calculados através dos 5minutos finais de cada condição de repouso na maca e durante toda a condição de ETCC (13 minutos). 4.4 Procedimentos da ETCC A corrente elétrica foi aplicada por um aparelho portátil que é constituído por 4 componentes principais: eletrodos (ânodo e cátodo com área de 35cm2 ou 36 cm2) amperímetro (medidor de intensidade de corrente elétrica), potenciômetro (componente que permite a manipulação da intensidade da corrente) e 3 baterias (9v) para gerar a corrente aplicada. Os eletrodos serão envoltos em uma esponja umedecida com solução salina (150Mm NaCL). Ver figura 4. Figura 4: equipamento portátil de ETCC utilizado no estudo e seus componentes Foi utilizado o sistema internacional EEG 10-20 para posicionamento dos eletrodos que foram colocados na região Cz (área do córtex motor primário (M1)), onde o anodo foi colocado bi-lateralmente com 4,5cm no hemisfério esquerdo e 4,5 cm no direito. O eletrodo de referência foi colocado na protuberância occipital, com o objetivo de evitar efeitos inibitórios sobre a área supra-orbital contra-lateral (Fp2)(14), o que poderia alterar os resultados da VFC. Ver figura 5. Foi utilizada uma corrente elétrica constante de 2 mA aplicada durante 13min com os 30seg iniciais e finais foi realizado a rampa (aumento e redução gradativos da corrente ate chegar aos 2mA (inicial) e 0mA (final)). Para a condição de farsa, os eletrodos foram colocados nas mesmas posições que utilizamos na anódica, no entanto, o estimulador foi desligado após 30 s de estimulação(53). 32 Figura 5. Ilustração da configuração dos eletrodos, ânodo e cátodo, para aplicação da ETCC. 4.5 AQUISIÇÃO DA RAZÃO LF/HF, LF E HF A VFC foi gravada por um monitor cardíaco (polar®RS 800CX). O resultado do intervalo r-r foi passado para o computador através do software polar protrainer 5 (polar®RS 800CX). As variáveis LF/HF, HF e LF foram calculadas utilizando os 5minutos finais dos 10minutos de repouso na maca (antes e pós etcc) e 13min durante toda a estimulação pelo software Kubios HRV. 5. ANÁLISE ESTATÍSTICA Para análise estatística, inicialmente foi realizado um teste não paramétrico Shapiro wilk para observar o comportamento da distribuição de dados. Em seguida foi utilizada a estatística descritiva não paramétrica com os valores de tendência central (mediana). Como análise inferencial da variabilidade da frequência cardíaca utilizou-se o teste de Friedman para comparar as condições pré, durante e pós ETCC e wilcoxon entre dois períodos de intervenção, ambos considerando, para o teste de hipótese, o p-valor < 0,05, ou seja, mais de 95% de probabilidade de não se cometer o erro do tipo I. 33 6. RESULTADOS A Caracterização da amostra pode ser observada na tabela 1 e a descrição dos nossos resultados podem ser vistos na tabela 2. TABELA 1. Características dos sujeitos (n=19) Nº. Idade Sexo Peso Medicações Tempo de lesão Causas da lesão Nível da lesão 1 24 F 63,4 Dor 10 PARASITA LBI 2 24 F 64,4 - 24 MIELOME LBC 3 26 F 54,3 - 26 MIELOME LBC 4 23 M 60,9 - 23 POLIOMIE LBI 5 23 M 54 AU 2 TRAUMA LAC 6 25 M 65,3 - 7 TRAUMA LBC 7 27 M 46,5 AU 27 MIELOME LBC 8 30 M 46,3 - 17 TRAUMA LBI 9 30 M 47,5 - 17 TRAUMA LBI 10 31 M 68,4 TDM/AUC/C/I 16 TRAUMA LBC 11 31 M 60,3 - 31 MIELOME LBC 12 34 M 73,5 AUC 2,5 TUMOR LBC 13 35 M 48,8 - 27 POLIO LBI 14 36 M 51,8 RM 14 TRAUMA LAC 15 38 M 74 AU 9 TRAUMA LAC 16 41 M 89 AH/AU 1,5 TRAUMA LBI 17 41 M 89,1 AU 1,5 TRAUMA LBI 18 46 M 44,9 - 44,9 POLIO LBC 19 51 M 78 - 19 TRAUMA LBC AH= anti-hipertensivo, Dor = para dor aguda e crônica, TDM= tratamento de doenças musculares, C= corticoide, I= imunossupressor, AU= antiespasmódico urinário, AUC= antiulceroso, RM= relaxante muscular, MIELOME= mielomeningocele, PC= paralisia cerebral, POLIO= poliomielite, LBC= lesão baixa completa, LAC= lesão alta completa, LBI= lesão baixa incompleta. 34 Tabela 02. Descrição dos resultados de acordo com o grau e nível de (Wilcoxon test, *§¥p<0,05, n.u. – Unidades normalizadas). Anodal - Before (LF_HF) Anodal - During (LF_HF) Anodal - After (LF_HF) Sham - Before (LF_HF) Sham - During (LF_HF) Sham - After (LF_HF) Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max COMPLETE HIGH 1,4 0,7 8,9 1,8 0,4 3,2 2,2 0,8 10,6 3,0 0,8 6,4 1,3 0,4 3,7 2,0 0,5 4,0 INCOMPLETE LOW 3,0* 0,7 6,9 2,2 1,6 7,2 3,5* 1,4 10,5 4,0 1,6 9,6 3,1 0,7 8,5 3,0 0,6 11,7 COMPLETE LOW 3,5*§ 1,5 8,7 1,8§ 0,5 2,6 2,6* 1,2 6,9 3,1 1,2 7,1 1,8 0,9 4,0 3,1 0,8 7,5 Anodal - Before (LF) Anodal - During (LF) Anodal - After (LF) Sham - Before (LF) Sham - During (LF) Sham - After (LF) Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max COMPLETE HIGH 58,9 41,2 89,9 69,4 28,0 93,6 68,5 43,1 91,4 73,4 44,4 86,4 56,1 28,3 78,9 66,6 34,4 79,9 INCOMPLETE LOW 74,6* 10,1 58,8 68,0 6,4 72,0 76,3* 8,6 56,9 79,2 13,6 61,0 75,4 21,1 71,7 73,8 20,1 65,6 COMPLETE LOW 74,7 39,4 87,3 66,9¥ 61,6 89,5 71,2¥ 58,7 91,3 75,5 62,1 90,5 67,3 42,5 89,5 75,2 38,0 92,1 Anodal - Before (HF) Anodal - During (HF) Anodal - After (HF) Sham - Before (HF) Sham - During (HF) Sham - After (HF) Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max Med Min Max COMPLETE HIGH 41,1 10,1 58,8 30,6 6,4 72,0 31,5 8,6 56,9 26,6 13,6 61,0 43,9 21,1 71,7 33,4 20,1 65,6 INCOMPLETE LOW 25,4* 12,7 60,6 32,1 10,5 38,4 23,7* 8,7 41,3 27,2 13,6 95,0 24,4 13,6 95,0 26,3 10,5 57,5 COMPLETE LOW 25,3 10,3 39,7 33,1¥ 5,6 65,2 28,8¥ 6,1 45,1 24,6 12,3 45,0 32,7 7,4 52,6 24,8 11,8 56,3 Bold indicates significant differences between pairs (* before and after; § Before and during; ¥ During and after). 35 Lesão alta completa Para todas as variáveis (LF/HF, LF e HF) não existiu diferenças significativas entre os períodos analisados. Lesão baixa incompleta Foi observado diferença significativa apenas na condição anódica nas variáveis LF/HF entre os períodos antes e pós-estimulação (p=0,046) e durante e pós-estimulação (p=0,046), para LF no período antes e pós-estimulação (p=0,046) e para HF no período antes e pós-estiulação (p=0,046). Ver figuras 6,7 e 8. Lesão baixa completa Observamos diferenças significativas apenas na condição anódica na variável LF/HF entre os períodos antes e durante (p=0,042) e durante e pós (p=0,018), para LF entre os períodos durante e pós (p=0,017) e HF durante e pós (0,017). Ver figuras 6,7 e 8. FIGURA 6. Efeitos da ETCC sham e anódica sobre LF/HF nos períodos antes (PRÉ- E), durante (DURANTE-E) e depois da estimulação (PÓS-E). * * € € § § ¥ ¥ 36 FIGURA 7. Efeitos da ETCC sham e anódica sobre LF nos períodos antes (PRÉ-E), durante (DURANTE-E) e depois da estimulação (PÓS-E). FIGURA 8. Efeitos da ETCC sham e anódica sobre HF nos períodos antes (PRÉ-E), durante (DURANTE-E) e depois da estimulação (PÓS-E). 7. DISCUSSÃO Nosso estudo analisou o efeito da ETCC aplicada sobre o córtex motor primário, nos dois hemisférios cerebrais, sobre variabilidade da frequência cardíaca em indivíduos com LM que apresentam diferentes graus e níveis de lesão, e observamos ¥ ¥ * * * * ¥ ¥ 37 que a ETCC modula o sistema nervoso autonômico de forma divergente nos grupos analisados. Nos indivíduos com LM completa alta a ETCC não alterou a VFC de forma significativa. Para os indivíduos com LM incompleta baixa a ETCC alterou a VFC no sentido de aumentar o simpático e reduzir o parassimpático e para os indivíduos com LM completa baixa a ETCC não apresentou diferenças significativas entre as condições inicial e final, mas apresentou alteração, embora não significativa, no sentido de reduzir o simpático e aumentar parassimpático. Talvez a diferença entre os efeitos da ETCC entre os indivíduos com LM baixa, possam ser devido à quantidade de adrenalina possivelmente ser mais elevada nos indivíduos com LM completa baixa(32), devido este fator está diretamente relacionado ao grau de desnervação simpática, pois após destruição de um nervo simpático, o órgão inervado se torna bem mais sensível à adrenalina, devido ao aumento de receptores adrenérgicos(67). Desde então, os indivíduos com lesão baixa completa apresentam hipersensibilidade adrenérgica, em nível das adrenais, portanto até mesmo um pequeno estímulo simpático, pode causar uma alta liberação de adrenalina em nível sistêmico, e a ETCC possa ter gerado um efeito rebote durante sua aplicação, reduzindo o estímulo simpático e aumentando o parassimpático, mas posteriormente voltando a seus níveis anteriores. Embora clancy (2014)(14) tenha observado que a ativação do córtex motor primário em indivíduos saudáveis tenha apresentado aumento de estímulo simpático, um estudo(55) anteriormente realizado, pode mostrar um possível efeito rebote da ETCC, pois na análise de cortisol 20min pós ETCC anódica gerou redução dos níveis séricos quando comparados ao período antes da estimulação, caracterizando possivelmente redução do nível de stress. Outro fator interessante é a atuação da ETCC na modulação das supra-renais, mostrando que existe modulação sistêmica e não só local como a cardíaca. Nossos resultados mostraram que a ETCC aumentou o estímulo simpático para o grupo com LM incompleta baixa, mas não para o grupo com LM completa alta, talvez estes dados revelem que a ETCC não seja capaz de modular o SNA quando a inervação simpática na região cardíaca é reduzida. Também é de conhecimento, que indivíduos com LM baixa apresentam uma quantidade de adrenalina mais elevada do que indivíduos com lesão alta e indivíduos sem LM(32), talvez devido à preservação 38 da atividade das adrenais, o que talvez possa justificar o aumento simpático, gerado pela ETCC, neste grupo. Outro fator que talvez possa explicar a inexistência de alteração no SNA gerado pela ETCC nos indivíduos com lesão alta, é que embora a liberação dos hormônios produzidos pelas supra-renais não necessitem de estímulos neuronais diretos, devido a existência de barorreceptores nas células renais apresentarem a capacidade de sentir pequenas alterações no fluxo sanguíneo renal e transmitir esta informação para as supra-renais, dando a capacidade de se autorregular, existe a necessidade de alterações em outras vísceras para que ocorra este mecanismo(67). Estas vísceras necessitam de estimulo neuronal direto para serem ativadas, divergindo das supra-renais, e portanto, a presença de inervação simpática se torna essencial para um bom funcionamento sistêmico, mas em indivíduos com LM alta estas inervações não estão mais preservadas e o estímulo para liberação de adrenalina e noradrenalina, pelas supra-renais estão reduzidos. Estudos com animais (68, 69), relatam que o córtex motor apresenta projeções na medula ventrolateral e esta envia projeções para o núcleo intermediolateral espinhal, onde os neurônios pré-ganglionares controladores coração e vasos sanguíneos (segmento T2) e da medula adrenal (segmento T8) são encontrados. Recente estudo(14) com estimulação cerebral não invasiva em humanos revela participação de M1 na ativação simpática, mostrando aumento simpático pós-estimulo elétrico. Como estimulamos M1 de forma bilateral, talvez os indivíduos com LM incompleta pudessem apresentar inervações sobre as adrenais e ter ocasionado estímulo simpático, gerado via córtex motor, através da ETCC, divergindo assim, dos indivíduos que com LM completa baixa, que não apresentavam as terminações nervosas preservadas e, portanto não aconteceu o mesmo efeito. Como observado em nossos achados, à resposta da ETCC apresentou divergências de acordo com o grau e nível da lesão, este fator pode está também relacionado ao grau de atrofia em áreas corticais(70) e fluxo sanguíneo cerebral reduzido(34) em M1, pois estes fatores estão relacionados com a gravidade da lesão. Sendo assim, a ETCC não conseguiria modular o SNA em indivíduos com LM alta completa, cuja gravidade da lesão é mais acentuada, apresentando maior atrofia e menor fluxo sanguíneo cerebral. 39 Embora estudos(14, 34, 68) mostrem que o córtex motor está envolvido em ajustes cardiovasculares associados com a atividade motora somática, por apresentar ligações funcionais com a medula ventrolateral, uma região do tronco cerebral criticamente envolvida no controle da pressão sanguínea e na regulação dos níveis de catecolaminas no plasma, os resultados de estudos com ETCC estimulando o córtex motor e seus efeitos sobre o SNA são divergentes. Um estudo(55) realizado com indivíduos saudáveis mostrou que a ETCC sobre córtex motor, aplicada unilateralmente, apresentou resultados semelhantes para as condições sham e anódica para as diferenças encontradas entre os períodos antes e pós ETCC nas variáveis temperatura da pele e cortisol. Para as variáveis pressão arterial, variabilidade da frequência cardíaca e ventilação não foram encontradas diferenças significativas entre os períodos, nem entre as condições sham e anódica. Um estudo(14) recente que analisou o efeito da ETCC sobre o SNA em indivíduos saudáveis, corrobora com os nossos resultados, pois observou que a ETCC anódica aumentou a razão LF/HF durante e após a estimulação, quando comparada a catódica e sham. Embora as configurações dos eletrodos, córtex motor primário (hemisfério cerebral esquerdo) e supraorbital, intensidade da corrente (1mA) e tempo de estimulação (15min.) tenham sido divergentes dos nossos, talvez o tempo de 13min. com uma intensidade mais elevada (2mA) sejam suficientes para modular a atividade do SNA em indivíduos com LM baixa, entretanto não sabemos o tempo que este efeito perdura. Outro fator importante a ser analisado é a configuração como os eletrodos são colocados no escalpo do indivíduo, pois a maior parte dos estudos o eletrodo de referência é colocado no supraorbital, e estudos relatam que o córtex pré-frontal medial está relacionado com o controle autonômico simpático, e a colocação do eletrodo de referência na região supraorbital, pode reduzir a ativação do córtex pré- frontal medial e aumentar o estímulo simpático(14). Nosso estudo anula esta possibilidade, pois colocamos o eletrodo de referência na protuberância occipital, desde então, podemos analisar o efeito da ETCC sobre M1. Nossos resultados trazem dados importantes para futuras intervenções com o uso da ETCC em pessoas com LM, pois estes indivíduos apresentam uma variabilidade da FC reduzida e como observado, os indivíduos com LM incompleta baixa 40 apresentaram aumento simpático, efeito considerado bastante positivo para estes indivíduos que praticamente não apresentam alterações diurnas em sua FC, desde então, o uso da ETCC poderia reduzir alguns sintomas como redução de fluxo sanguíneo cerebral, tonturas e fadiga antecipada. Já para os indivíduos com LM completa baixa a ETCC, dependendo da intensidade e tempo que será aplicada, não seria indicada, pois reduz a ativação simpática, o que poderia reduzir ainda mais a variabilidade da FC nestes indivíduos. Já para os indivíduos com LM completa alta, a ETCC por não apresentar alterações, apresenta-se mais segura para a aplicação com outros fins, como tratamento da dor periférica crônica pós-lesão. 8. CONCLUSÃO O presente estudo mostrou evidencias de que a etcc anódica aplicada sobre o cortex motor de forma bilateral, conseguiu modular o balanço do SNA em pessoas com lesão medular e este efeito é dependente do grau e nível de lesão. Os indivíduos com LM completa alta não apresentaram alterações com a aplicação da ETCC. Já os indivíduos com LM baixa incompleta e completa, apresentaram alterações autonômicas, e estas foram divergentes. Os individuos com LM baixa incompleta apresentaram aumento simpático e redução parassimpática, já os indivíduos com LM baixa completa, apresentaram redução do simpático e aumento do parassimpático. 9. AGRADECIMENTOS Agradecemos a todos os integrantes da base de pesquisa em atividade física e saúde (AFISA) e do laboratório do movimento humano (LABMOV) da Universidade Federal do Rio Grande do Norte. 10. COMENTÁRIOS E SUGESTÕES GERAIS Esse estudo trouxe questionamentos pertinentes sobre fatores positivos dos efeitos da ETCC anódica aplicada sobre o córtex motor. Um deles é sobre a duração dos efeitos após aplicação da ETCC, pois dependendo do tempo que perdure o 41 efeito da estimulação, seria interessante a analise da dosagem/dia para ser aplicada em indivíduos com LM, já que os mesmos apresentam uma variabilidade da FC bastante reduzida e a ETCC pode aumentá-la. Outro fator importante é que não temos conhecimento dos efeitos que a ETCC pode gerar nestes indivíduos em nível cortical, quando usado cronicamente, desde então observamos a necessidade de mais estudos. Outro ponto interessante é quanto à montagem dos eletrodos, que podem aplicar corrente elétrica bilateral ou unilateral sobre o córtex motor. Ao que temos conhecimento, nenhum estudo comparou o efeito de diferentes montagens para estimulação no córtex motor em indivíduos com LM. A existência de estudos mais aprofundados que analisem o efeito da ETCC dependendo do grau e nível da lesão também se torna fundamental. REFERENCIAS 1. Freund P, Weiskopf N, Ward NS, Hutton C, Gall A, Ciccarelli O, et al. Disability, atrophy and cortical reorganization following spinal cord injury. Brain. 2011;134(6):1610-22. 2. Lundell H, Christensen MS, Barthélemy D, Willerslev-Olsen M, Biering-Sørensen F, Nielsen JB. Cerebral activation is correlated to regional atrophy of the spinal cord and functional motor disability in spinal cord injured individuals. Neuroimage. 2011;54(2):1254- 61. 3. Krishnan C, Ranganathan R, Kantak SS, Dhaher YY, Rymer WZ. Anodal Transcranial Direct Current Stimulation Alters Elbow Flexor Muscle Recruitment Strategies. Brain Stimulation. 2014. 4. Machado S, Velasques B, Cunha M, Basile L, Budde H, Cagy M, et al. Aplicações terapêuticas da estimulação cerebral por corrente contínua na neuroreabilitação clínica. Revista Neurociências. 2009;17(3):298-300. 5. 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O objetivo dessa pesquisa é verificar se a estimulação transcraniana por corrente contínua, que é uma tecnica de estimulação cerebral não invasiva e indolor, irá modificar o tempo de exercício. O motivo que nos leva a fazer este estudo é a existência de poucas pesquisas que utilizem a ETCC visando melhoras na aptidão física de pessoas com lesão medular, pois estes indivíduos apresentam alterações em nível cerebral e muscular e estas podem reduzir a tolerância ao exercício. Caso decida aceitar o convite, você será submetido(a) ao(s) seguinte(s) procedimentos: (1) Familiarização com os equipamentos e escala utilizada; (2) Testes de esforço máximo no cicloergômetro; (3) através de um sorteio, você será submetido (em dias diferentes) a uma sessão de estimulação cerebral anódica (estimulação verdadeira) ou placebo (estimulação falsa), com duração de 13 (treze) minutos e com 48-72h de intervalo entre elas; (4) ao decorrer dos testes máximos, que você fará até a exaustão, serão coletados frequência cardíaca, em intervalos pré-estabelecido irá nos informar sobre a percepção do esforço (como você está se sentindo) e antes e pós teste será coletado uma pequena quantidade de sangue para análise da glicemia. As sessões experimentais serão realizadas em uma sala especialmente preparada (com pouco barulho e baixa luminosidade). O Projeto não apresenta riscos significativos para os participantes, pois todos os artigos científicos, até hoje, não relatam a existência de efeitos colaterais devido à aplicação da estimulação, mostrando que a técnica é segura, talvez você possa sentir um leve formigamento na região de colocação dos eletrodos e leve dor de cabeça. Você também pode sentir uma leve sensação de fadiga durante a realização dos experimentos. O benefício provável da pesquisa, caso a nossa hipótese seja confirmada, é a melhoria da sua função cerebral e periférica durante a prática de exercício físico associado à ETCC, o que será um avanço tanto em nível de reabilitação aguda como crônica, pois o exercício físico em pessoas com lesão medular, em sua maioria, é desencorajado devido a não aguentarem muito tempo de exercício, levando-os a desistência. Além disso, você pode contribuir para o entendimento da influência do cérebro humano durante a prática de exercício físico em indivíduos com lesão medular. Em caso de algum problema que você possa ter, relacionado com a pesquisa, você terá direito a assistência gratuita que será prestada (pela UFRN e de responsabilidade da pesquisadora Fabiana Tenório Gomes da Silva). Durante todo o período da pesquisa você poderá tirar suas dúvidas ligando para (Fabiana Tenório Gomes da Silva, 9143-1590). 48 Você tem o direito de se recusar a participar ou retirar seu consentimento, em qualquer fase da pesquisa, sem nenhum prejuízo para você. Os dados que você irá nos fornecer serão confidenciais e serão divulgados apenas em congressos ou publicações científicas, não havendo divulgação de nenhum dado que possa lhe identificar. Esses dados serão guardados pelo pesquisador responsável por essa pesquisa em local seguro e por um período de 5 anos. Se você tiver algum gasto pela sua participação nessa pesquisa, ele será assumido pelo pesquisador e reembolsado para você. Se você sofrer algum dano comprovadamente decorrente desta pesquisa, você será indenizado. Qualquer dúvida sobre a ética dessa pesquisa você deverá ligar para o Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, telefone 3215-3135. Este documento foi impresso em duas vias. Uma ficará com você e a outra com o pesquisador responsável (Fabiana Tenório Gomes da Silva). Consentimento Livre e Esclarecido Após ter sido esclarecido sobre os objetivos, importância e o modo como os dados serão coletados nessa pesquisa, além de conhecer os riscos, desconfortos e benefícios que ela trará para mim e ter ficado ciente de todos os meus direitos, concordo em participar da pesquisa (Estimulação Transcraniana por Corrente Contínua (ETCC) altera a tolerância ao exercício em pessoas com lesão medular?), e autorizo a divulgação das informações por mim fornecidas em congressos e/ou publicações científicas desde que nenhum dado possa me identificar. Natal , , 2014 Assinatura do participante da pesquisa Declaração do pesquisador responsável Como pesquisador responsável pelo estudo (Estimulação Transcraniana por Corrente Contínua (ETCC) altera a tolerância ao exercício em pessoas com lesão medular?), declaro que Impressão datiloscópica do participante 49 assumo a inteira responsabilidade de cumprir fielmente os procedimentos metodologicamente e direitos que foram esclarecidos e assegurados ao participante desse estudo, assim como manter sigilo e confidencialidade sobre a identidade do mesmo. Declaro ainda estar ciente que na inobservância do compromisso ora assumido estarei infringindo as normas e diretrizes propostas pela Resolução 466/12 do Conselho Nacional de Saúde – CNS, que regulamenta as pesquisas envolvendo o ser humano. Natal , , 2014. Assinatura do pesquisador responsável 50 ANEXO 2 51 Liberação do comitê de ética