Navegando por Autor "Paiva, Weslley de Souza"
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TCC Avaliação da ação antioxidante de extratos hidrossolúveis das glebas imatura e madura do cogumelo Calvatia bicolor(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-12-14) Costa, Douglas Ferreira Balbino da; Alves, Monique Gabriela das Chagas Faustino; http://lattes.cnpq.br/9570307530482830; Batista, Lucas Alighieri Neves Costa; Paiva, Weslley de SouzaFungos que apresentam corpo de frutificação são denominados macrofungos e são conhecidos popularmente como cogumelos. Diversos compostos bioativos de cogumelos já foram descritos com atividades farmacológicas, dentre eles os carboidratos. Os antioxidantes são moléculas que estão diretamente envolvidas no combate ao estresse oxidativo, que é responsável pelo surgimento e agravamento de diversas patologias. Neste trabalho foi avaliada a atividade antioxidante de extratos solúveis em água ricos em carboidratos das glebas imatura e madura do cogumelo Calvatia bicolor. As glebas imatura e madura, delipidadas com etanol, foram submetidas a extração proteolítica com diferentes volumes (1v, 3v e 5v) de solvente (NaCl 0,25 M). Os extratos brutos da gleba imatura (EB-GI1v, EB-GI3v e EB-GI5v) e da gleba madura (EB-GM1v, EB-GM3v e EB-GM 5v) foram solubilizados em água destilada a 10 mg/mL para separação dos extratos solúveis em água por centrifugação. Os extratos solúveis (ES-GI1v, ES-GI3v e ES-GI5v) e (ES-GM1v, ES-GM3v e ES-GM5v) foram analisados quanto as suas composições químicas, por eletroforese e FTIR, e avaliados quanto à capacidade antioxidante total (CAT) e quelação de cobre e ferro. O rendimento médio de massa seca dos extratos brutos da gleba imatura variou de 258 a 431 mg, e da gleba madura de 69 a 81,5 mg. O rendimento dos ES-GI foi de 191 a 355 mg (79%) em relação ao EB, e da gleba madura de 29,1 a 40,5 mg (47,7%) em relação ao EB. O conteúdo de açúcares, proteínas, compostos fenólicos e sulfato dos ES-GI variaram de 43 a 51%, de 8,4 a 10,8%, de 0,4 a 0,5% e 0%, respectivamente. Dentre os ES-GM, o conteúdo de açúcares, proteínas, compostos fenólicos e sulfato variaram de 14,7 a 15,2%, de 20,3 a 26,1%, de 0,7 a 0,8% e de 1 a 1,4%, respectivamente. ES-GM1v, ES-GM3v e ES-GM5v apresentaram metacromasia e perfil polidisperso, indicando a presença de grupos de polissacarídeos carregados negativamente (sulfatados e carboxilados). ES-GI1v, ES-GI3v e ES-GI5v não apresentaram metacromasia. A análise de FTIR indica que os extratos são constituídos por polissacarídeos do tipo β-glucana e por ésteres de sulfato. Dentre os ES-GI foram observadas CAT de 18,19 a 45,43 mg de ácido ascórbico/g de amostra, quelação de cobre de 27,7 a 51,8% e quelação de ferro de 3,1 a 88,8%. Os ES-GM apresentaram CAT de 12,99 a 22,19 mg de ácido ascórbico/g de amostra, quelação de cobre de 17,5 a 59,5 % e quelação de ferro de 6,5 a 80,8%. ES-GM1v foi o extrato com maior atividade quelante de ferro e cobre. E, de modo geral, a melhor condição de extração para obter extratos ricos em polissacarídeos e com atividades antioxidantes é utilizando 1 volume de NaCl 0,25M. Já que além das características de rendimento e atividades antioxidantes, há uma redução no custo e no tempo de produção dos extratos.Tese Avaliação da atividade antioxidante de quitosana extraída de fungos e de seu derivado conjugado com ácido gálico através de testes in vitro e in vivo utilizando modelo zebrafish (Danio rerio)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-07-22) Paiva, Weslley de Souza; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0002-2022-5659; http://lattes.cnpq.br/6853669083018775; Scortecci, Katia Castanho; https://orcid.org/0000-0002-4690-2785; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; Theodoro, Raquel Cordeiro; Tosin, Fernanda Fogagnoli Simas; Sabry, Diego de AraújoO estresse oxidativo é uma causa de inúmeras doenças em humanos, isso provoca uma busca constante de novas moléculas que possam ter capacidade antioxidante e evitar o surgimento de doenças. O objetivo desse trabalho foi extrair quitosana de fungos (Chit-F) e sintetizar uma nova molécula, conjugando Chit-F com ácido gálico, a qual foi denominada de ChitFGal, a fim de potencializar sua ação antioxidante. Após coleta, isolamento e identificação do fungo como sendo da espécie Rhizopus arrhizus, foi possível extraír uma molécula que, após testes físico- químicos como cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), infravermelho por transformada de fourier (FTIR) e ressonância magnética nuclear (RMN), foi caracterizada como uma quitosana, com grau de desacetilação 86% e baixa massa molecular, além disso, sem presença de proteínas e compostos fenólicos. Após isso, foi realizada com sucesso a síntese de quitosana fúngica + AG (Chit-FGal), comprovada pelo aumento em 4x da quantidade de compostos fenólicos em relação a Chit-F, como também o surgimento de um pico na região dos anéis aromáticos na análise de RMN. Ao ter as 2 amostras extraídas/sintetizadas e caracterizadas, foram realizados os testes antioxidantes in vitro (Quelação de cobre, quelação de ferro, capacidade antioxidante total (CAT), poder redutor e sequestro de radical superóxido), onde as amostras tiveram atividades em todos os testes, porém Chit-FGal obteve resultados pelo menos 50% (p <0,05) superiores, demonstrando a potencialização das atividades ao modificar a molécula nativa. As amostras Chit-F e ChitFGal não foram citotóxicas para fibroblastos murinos (NIH/3T3) em nenhuma das concentrações utilizadas. Quando estas células foram expostas a apenas peróxido de hidrogênio (0.06 mM), detectou-se sinais de citotoxicidade que não abolidos quando estas células foram expostas a peróxido de hidrogênio e Chit-Fgal (de 0,05 a 0,25 mg/mL). Ao testar a capacidade antioxidante in vivo utilizando modelo zebrafish (Danio rerio), foi observado um efeito de proteção dos embriões contra danos causados por peróxido de hidrogênio 0,06 mM. Posteriormente as larvas com 3 dias pós fecundação foram analisadas quanto a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), peroxidação lipídica e a taxa de morte celular por apoptose . Ambas demonstraram ação protetora contras os 3 fenômenos estudadas. Esses resultados demonstram o excelente potencial antioxidante de Chit-F, como também a potencialização dessa ação ao conjugar esse polímero com ácido gálico (ChitFGal), in vitro e in vivo o que torna essa nova molécula como promissora como antioxidante, com potencial para tratar diversos problemas causados pelo estresse oxidativo.Tese Bioprospecção de compostos do fungo Langermannia bicolor: potencial modulador de antibióticos, atividade antioxidante e avaliação de toxicidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-12-04) Moura, Geovanna Maria de Medeiros; Santos, Elizeu Antunes dos; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; https://orcid.org/0000-0002-3480-2218; http://lattes.cnpq.br/0915146393491834; Veras, Bruno Oliveira de; Oliveira, Maria Tatiana Alves; Santos, Paula Ivani Medeiros dos; Paiva, Weslley de SouzaA seleção e aumento da variedade de bactérias multirresistentes tem impulsionado a busca por novos agentes terapêuticos e adjuvantes. Neste estudo investigamos as propriedades de um extrato do cogumelo Langermannia bicolor como modulador de antibióticos (gentamicina, norfloxacina e ampicilina) contra linhagens multirresistentes de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, bem como a sua ação antioxidante e sua toxicidade in vitro e in vivo. O extrato bruto aquoso de L. bicolor foi fracionado com volumes crescentes de acetona, resultando em três frações (F0.5, F1 e F2), que apresentaram diferentes perfis bioquímicos. Testes com eritrócitos humanos revelaram que o extrato e as frações não possuem ação hemolítica, enquanto os ensaios de redução de MTT em células fibroblásticas (NHI/3T3), apenas o extrato bruto reduziu a viabilidade em 50%. Em diferentes estágios de desenvolvimento de zebrafish (Danio rerio), os ensaios in vivo confirmaram a ausência de toxicidade das frações, através de análises em briotóxicas, batimentos cárdiacos e testes comportamentais. Embora nenhuma fração tenha demonstrado atividade antibacteriana direta, todas exibiram efeitos moduladores significativos quando combinadas com antibióticos convencionais nas bactérias multirresistentes testadas. Notavelmente, a fração F2, rica em proteínas, com maiores atividades proteolíticas e hemaglutinante, reduziu a Concentração Inibitória Mínima (CIM) da gentamicina em todas as linhagens testadas. As frações também foram potentes antioxidantes in vitro e in vivo. A fraçãoF0.5, rica em compostos fenólicos e flavonoides, exibiu o espectro mais amplo de atividades antioxidantes, incluindo quelação de metais (Fe+2 e Cu+2), sequestro de radicais livres (OH• e O2-•) e proteção celular, concomitante e preventiva, contra estresse oxidativo induzido por peróxido de hidrogênio (H2O2) em células 3T3. Já a fração F1, com predominância decarboidratos, após o estresse de H2O2, foi capaz de corrigir o dano oxidativo. In vivo, todas as frações protegeram os embriões de zebrafish expostos a H2O2.Na quantificação das espécies reativas de oxigênio (EROs) pela sonda fluorescente (DCFH), as larvas de zebrafish tratadas com a F0.5 e, em seguida, com H2O2 reduziram significativamente a produção de EROs em suas células, com valores menores, até, do que os das larvas não expostas ao agente oxidante. De forma menos expressiva, F1 e F2 também protegeram as células do zebrafish, reduzindo a produção de EROs. Ao explorar de forma pioneira o potencial terapêutico de L. bicolor, nosso estudo pavimenta o caminho para investigações futuras, mais aprofundadas, sobre a composição de bioativos desse cogumelo e seus respectivos mecanismos moleculares, envolvidos nas propriedades encontradas: potencialização de antibióticos e proteção contra o estresse oxidativo.TCC Caracterização físico-química e avaliação da atividade antioxidante de extratos hidrossolúveis do perídio maduro do cogumelo Calvatia bicolor(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-09-15) Lima, Francielton da Silva; Alves, Monique Gabriela das Chagas Faustino; https://orcid.org/0000-0002-9122-1073; http://lattes.cnpq.br/9570307530482830; https://orcid.org/0000-0002-1761-3570; http://lattes.cnpq.br/3788658188920676; Viana, Rony Lucas da Silva; http://lattes.cnpq.br/2739053256443663; Paiva, Weslley de Souza; https://orcid.org/0000-0002-2022-5659; http://lattes.cnpq.br/6853669083018775Os macrofungos, dentre eles os cogumelos, são repletos de diversidade de compostos bioativos como os polissacarídeos, sendo as glucanas de fungos já descritas com diversas atividades farmacológicas. Nesse cenário, foi verificada a influência do volume de NaCl para obter extratos contendo polissacarídeos do perídio do cogumelo Calvatia bicolor. A composição química foi analisada e os polissacarídeos foram purificados e a ação antioxidante deles foi avaliada. Os perídios delipidados, foram submetidos a diversos processos de extração com diferentes volumes de NaCl 0,25M (1v, 3v e 5v). Os extratos brutos (EB-CB1v, EB-CB3v, EB-CB5v) foram solubilizados em água destilada a 10 mg/mL para separação dos extratos solúveis em água (CB1v, CB3v, CB5v) por centrifugação. Foram avaliados o rendimento, composição química e perfil eletroforético de CB1v, CB3v, CB5v, e esses foram submetidos a dois processos diferentes de purificação com ácido tricloroacético (TCA) 90% (CB1v-TCA, CB3v-TCA, CB5v-TCA) e por separação por massa molecular (MM) com filtros de 3kDa (CB1v-MM, CB3v-MM, CB5v-MM). Os extratos purificados foram caracterizados físico-quimicamente e avaliados quanto à capacidade antioxidante total (CAT), poder redutor e quelação de ferro e cobre. O rendimento médio de massa seca dos extratos brutos variou de 79 a 91 mg, enquanto a dos extratos solúveis em água foi de 50 a 60 mg (63,3%) em relação à massa de EB. O conteúdo de açúcares, proteínas, compostos fenólicos e sulfato de CB1v, CB3v, CB5v foi de 8 a 15%, de 6 a 7%, de 0,3% a 0,4% e de 4 a 5%, respectivamente. CB1v, CB3v, CB5v apresentaram perfil eletroforético polidisperso com discreta metacromasia indicando a presença de grupos de polissacarídeos carregados negativamente (sulfatados e carboxilados). O rendimento de CB1v-TCA, CB3v-TCA, CB5v-TCA variou de 5 a 8,6%, enquanto o de CB1v-MM, CB3v-MM, CB5v-MM foi de 60 a 77,5% em relação à massa seca de cada extrato antes da purificação. Já quanto à composição química, os extratos purificados demonstraram percentual de açúcar entre 22 e 49% e proteínas de 1 a 11%. Em CB5v-TCA e CB-5v-MM foram encontrados 0,1 e 0,4% de compostos fenólicos e 12,65% e 19,27% de sulfato, respectivamente. CB1v-MM, CB3v-MM, CB5v-MM apresentaram perfil eletroforético semelhante à dos extratos solúveis em água e CB1v-TCA, CB3v-TCA, CB5v-TCA apresentaram perfis eletroforéticos menos polidispersos, porém foram verificados grupos carregados negativamente. Resultados da composição monossacarídica e dados do infravermelho (FTIR) indicam que os extratos purificados são constituídos por heteroglucanas do tipo β-glucana com galactose e ácido glucurônico e traços de sulfato, esse um achado incomum em fungos. Atividade antioxidante foi observada na CB5v-MM, nos testes de CAT (79,4 mg de ácido ascórbico/g de amostra), poder redutor (21% a 130%), quelação de cobre (46,2%) e quelação de ferro (63,64%). Com base nos dados, a melhor condição de obter extratos hidrossolúveis com alta razão açúcar/proteína do perídio de C. bicolor foi a partir da extração com 5v de NaCl e a melhor forma de purificação destes extratos para aquisição de compostos antioxidantes é por purificação por massa molecular. Por essa razão, CB5v-MM é um possível candidato como um composto antioxidante de origem fúngica.TCC Extração e Quantificação de polissacarídeos Sulfatados da microalga nannochloropis oculuta e avalição da atividade antioxidante in vitro(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-09-17) Quieregati, João Pedro Bauman; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; http://lattes.cnpq.br/4731846046742457; Filgueira, Luciana Guimarães Alves; Paiva, Weslley de SouzaGrande parte da extensão do planeta terra é coberto por águas marinhas ou doces, e nesta existem diversos organismos desde os mais simples até os mais complexos, dentre os muitos pode-se destacar as algas. As microalgas marinhas possuem a capacidade de sintetizar durante seu período de vida carotenóides, ácidos graxos insaturados de cadeia longa, polissacarídeos, em alguns raros casos polissacarídeos sulfatados (PS). Todavia, esses PS oriundos de microalgas costumam apresentar diversas atividades farmacológicas. Dentre desse contexto, pode-se citar a microalga Nannochloropsis oculata, cuja capacidade sintetizar PS foi demonstrada em 2019 (Pandeirada et al. 2019). Foi demonstrado também que um extrato rico em polissacarídeos de N. oculata apresenta atividade antioxidante, mas não se identificou se essa atividade adivinha dos PS. Portanto, com intuito de preenche esta lacuna, nesse trabalho teve-se como objetivo extrair PS de N. oculata e avaliá-los como agentes antioxidantes em diferentes in vitro. Para tal, a alga liofilizada foi delipidada com metanol:clorofórmio (1:2 v/v) e posteriormente, macerada (NaCl, 0,25 M, 4 h, 65 °C). Após centrifugação (8000 x g, 4 °C, 20 min), o sobrenadante obtido foi liofilizado e denominado de extrato bruto (EB). Esse foi submetido a cromatografia de troca iônica (resina TKSgel DEAE- 5PW) e foram obtidas 4 frações. Dosagens químicas e eletroforese em gel de agarose confirmaram a presença dos PS na fração 1,0M. A atividade antioxidante da amostra foi avaliada em 4 testes in vitro: quelação de ferro; quelação de cobre; poder redutor, capacidade antioxidante total (CAT). Nos três primeiros testes a amostra mostrou baixa atividade. Porém, no teste de CAT, 1 g da amostra apresentou um atividade equivalente a aproximadamente 118 mg de ácido ascórbico. Pelo que se sabe esta é a maior atividade de CAT já descrita para um PS. Espera-se futuramente caracterizar quimicamente o PS de N. Oculata, assim como, a sua(as) atividade(s) antioxidante in vivo.Tese Nanobioformulações do tipo SNEDDS à base de Anacardium occidentale L. e avaliações farmacológicas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-01-29) Araújo, Leonardo Bruno Aragão de; Maciel, Maria Aparecida Medeiros; http://lattes.cnpq.br/5360188002708095; http://lattes.cnpq.br/6033875033893673; Padilha, Deborah de Melo Magalhães; Lima, Aurea Echevarria Aznar Neves; Arcanjo, Daniel Dias Rufino; Paiva, Weslley de SouzaSistemas coloidais ampliam a biodisponibilidade de fármacos e são utilizados como estratégia importante na proteção e entrega direcionada de bioativos de caráter sintético ou natural. Nesta perspectiva, a eficácia terapêutica da espécie medicinal Anacardium occidentale Linn. (AO) foi avaliada em um estudo nanobiotecnológico em que se utilizou modelos experimentais in vitro (antioxidante) e in vivo (avaliação anti-inflamatória pulmonar). Para tanto, o extrato hidroalcoólico (EHA-AO) e a fração rica em taninos (FTAO), obtidos das cascas do caule deste vegetal, foram encapsulados em um sistema coloidal carreador do tipo SNEDDS (sistema autoemulsificante/self-nanoemulsion drug delivery system). Neste contexto, destaca-se a importância da redução de doses terapêuticas administradas, redução de riscos toxicológicos, manutenção do nível constante do fármaco no sangue (pela liberação controlada), e eficácia prolongada dos efeitos terapêuticos, amplamente atribuídos aos sistemas coloidais. A escolha do carreador SNEDDS consiste no fato de serem sistemas coloidais estáveis que resistem a diluições em água, a variações de temperatura e/ou pH, são eficazes na liberação controlada (lenta e prolongada), os bioativos veiculados em baixas concentrações podem ser administradas por via oral, com manutenção de suas propriedades. A parte experimental do estudo foi realizada em diferentes etapas: i) análises bromatológicas e microbiológica da matéria prima regional (cascas do caule de A. occidentale); ii) procedimento fitoquímico para obtenção das amostras EHA-AO e FT-AO; iii) estudo de solubilidade e desenvolvimento do nanosistema coloidal polar O/A (óleo em água) com característica SNEDDS, isento de cotensoativo; iv) aplicação das amostras SNEDDSEHA-AO e SNEDDS-FT-AO em testes experimentais in vitro de oxidação, bem como em modelo experimental in vivo de inflamação (enfisema pulmonar em Rattus norvegicus através de instilação orotraqueal por papaína), via administração oral. O carreador SNEDDS foi preparado com Tween 80 (fase tensoativa), um óleo vegetal de uso alimentício em baixa concentração (1%), contendo os seguintes constituintes: vitamina E, poli-insaturados, gordura saturada e uma mistura dos ácidos oléico, linoleico e linolênico. O sistema SNEDDS-branco (isento das amostras do vegetal A. occidentale), após caracterização físico-química (pH, tensão superficial, CMC, viscosidade e diâmetro de gotícula), solubilizou satisfatoriamente as amostras EHA-AO e FT-AO. O potencial antioxidante dos sistemas SNEDDS-EHA-AO (10 mg mL-1 ) e SNEDDS-FT-AO (2,5 mg mL-1 e 5,0 mg mL-1 ) foi avaliado via experimentos in vitro com resultados significativos observados pelos testes de atividade redutora equivalente ao ácido ascórbico, atividade quelante de íons ferro e cobre, bem como sequestro dos radicais hidroxila e superóxido. O sistema SNEDDS-FT-AO não apresentou citotoxicidade para as células saudáveis das linhagens RAW, Vero e L-929. O estudo farmacológico in vivo dos sistemas SNEDDSEHA-AO e SNEDDS-FT-AO, em modelo experimental de inflamação pulmonar, bem como avaliação subsequente das análises histopatológicas, mostrou que a formulação SNEDDS-FT-AO apresenta o melhor resultado anti-inflamatório. Estes achados, juntamente com resultados preliminares do potencial medicinal de Anacardium occidentale Linn., que tem comprovada ação imunomoduladora, anti-inflamatória e antiviral, possibilitarão a validação fitoterapêutica das formulações SNEDDS-EHA-AO e SNEDDS-FT-AO contra o vírus Sars-CoV-2, e, portanto, poderá contribuir na terapia contra a COVID-19.