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Título: Caracterização do efeito de uma fração enriquecida em saponinas obtida de Ziziphus joazeiro em isolados de Candida spp. oriundos de pacientes com candidemia com ênfase na expressão dos fatores de virulência
Autor(es): Bezerra Neto, Francisco de Assis
Orientador: Chaves, Guilherme Maranhão
Palavras-chave: Candida spp.;Fatores de virulência;Candidemia;Antifúngicos sintéticos;Ziziphus joazeiro;Saponinas
Data do documento: 26-Mar-2019
Referência: BEZERRA NETO, Francisco de Assis. Caracterização do efeito de uma fração enriquecida em saponinas obtida de Ziziphus joazeiro em isolados de Candida spp. oriundos de pacientes com candidemia com ênfase na expressão dos fatores de virulência. 2019. 145f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2019.
Resumo: Os isolados de Candida spp. têm chamado atenção pelo número crescente de relatos de resistência a medicamentos antifúngicos, além de seu conhecido potencial de virulência, constituindo um sério problema para o tratamento de infecções causadas por esses micro-organismos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a susceptibilidade fúngica de isolados de Candida spp. oriundos de pacientes com infecção de corrente sanguínea frente a antifúngicos sintéticos, bem como a uma fração enriquecida em saponinas obtida do extrato hidroetanólico de Ziziphus joazeiro, assim como a interferência na expressão dos fatores de virulência. Foram analisados 70 isolados de Candida oriundos de hemoculturas. Realizou-se a técnica de microdiluição em caldo a fim de se observar a susceptibilidade dos isolados frente aos antifúngicos sintéticos Anfotericina B, Caspofungina, Fluconazol e Itraconazol. Posteriormente, 50 isolados foram selecionados e a avaliação da atividade antifúngica da fração foi realizada. Um total de 27 isolados foram selecionados para a realização dos ensaios de expressão dos fatores de virulência na ausência e na presença da fração. Nenhum dos isolados apresentou resistência a anfotericina B e a caspofungina. Quatro isolados de C. albicans e 1 isolado de C. glabrata foram resistentes ao fluconazol, enquanto que 3 isolados de C. albicans, 1 de C. tropicalis e 2 do complexo C. parapsilosis apresentaram susceptibilidade dosedependente a este medicamento. Quatro isolados de C. albicans e 1 isolado de C. tropicalis apresentaram uma susceptibilidade dose-dependente ao itraconazol. Os isolados de C. albicans e C. glabrata foram susceptíveis frente a fração com CIMs na faixa de 5000 – 10000 µg/mL. As cepas tratadas com a fração apresentaram uma redução de cerca de 26% na capacidade de adesão às células do epitélio bucal, diminuição na capacidade de formação do biofilme, diminuição na capacidade de filamentação (em meios líquidos e sólidos) e diminuição da produção de fosfolipases e hemolisinas. A fração enriquecida em saponinas obtida a partir do extrato de Z. joazeiro apresenta significativa atividade antifúngica, sendo capaz de interferir na expressão de fatores de virulência deste grupo de leveduras. Novos estudos devem ser conduzidos para que o mecanismo de ação envolvido seja elucidado.
Abstract: Bloodstream infections represent an important public health problem, with attributed mortality of 40-60%. In addition to their known in vitro virulence potential, Candida spp. have been drawing attention to the growing number of reports of resistance to antifungal drugs, representing a serious problem for the treatment of infections caused by these microorganisms. This study aimed to evaluate the antifungal susceptibility of Candida spp. from patients with Candida bloodstream infection against synthetic antifungal compounds, as well as an enriched fraction obtained from the extract of Ziziphus joazeiro. We also investigated the interference of this natural product on the expression of Candida spp. virulence factors. Material and methods: Seventy Candida spp. isolates from blood cultures were analyzed. The microdilution broth technique was performed to investigate the susceptibility of the isolates against synthetic antifungals. Subsequently, 50 isolates were selected and the evaluation of the antifungal activity of the fraction was performed. A total of 27 isolates were selected for virulence factor expression assays in the absence and presence of the fraction. None of the isolates presented resistance to amphotericin B and caspofungin. Four isolates of C. albicans and 1 isolate of C. glabrata were resistant to fluconazole, whereas 3 isolates of C. albicans, 1 of C. tropicalis and 2 of C. parapsilosis complex showed dose-dependent susceptibility to this drug. Four isolates of C. albicans and 1 of C. tropicalis showed a dose-dependent susceptibility to itraconazole. The isolates identified as C. albicans and C. glabrata were susceptible to the fraction with MFCs ranging from 5000-10000 μg/mL. The strains treated with the fraction showed a reduction of about 26% in the capacity of adhesion buccal epithelial cells, a lower production of phospholipase, haemolisyns and a decrease in filamentation capacity. The enriched fraction of Z. joazeiro presents significant antifungal activity, being able to interfere with the expression of virulence factors in vitro of this group of yeasts. Further studies should be performed in order to evaluate the mechanisms of action involved.
URI: https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/27143
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