Navegando por Autor "Capistrano, Maria de Fátima Pessoa"
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Tese Papel da localização da carga em determinação dos parâmetros do canal iônico(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2007-11-05) Capistrano, Maria de Fátima Pessoa; ; http://lattes.cnpq.br/3549072305661571; ; http://lattes.cnpq.br/6238712881217011; Rodrigues, Claudio Gabriel; ; http://lattes.cnpq.br/0681322721384641; Brandão Neto, José; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783031A0; Braz, Regina de Fátima dos Santos; ; http://lattes.cnpq.br/9442000157600332; Carriço, Artur da Silva; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4787041Z8Para investigar as influências das cargas sobre as propriedades do canal formado pela α-HL do Staphylococcus aureus, foi empregada a técnica de Escaneamento Mutagenese da Cisteína . Vinte e quatro mutantes foram produzidos a partir da substituição de um único aminoácido da estrutura primária da proteína α-HL pela cisteína, em várias posições. As alterações eletrofisiológicas, em decorrência dessa modificação, foram analisadas, após a incorporação do canal mutante em bicamada lipídica plana. As proteínas modificadas foram investigadas na ausência e na presença de reagentes específicos para sulfidrila, visando introduzir uma forte carga positiva ou negativa na posição da substituição. A introdução de uma carga negativa, na região troncular (parte trans do poro) do canal formado pela α-HL, converteu a seletividade do canal de pouco aniônico para mais catiônico, entretanto a introdução de uma carga positiva aumentou, sua seletividade ao anion. A intensidade dessas alterações foi inversamente dependente do raio do poro na posição da carga introduzida. Quanto ao parâmetro assimetria da dependência da condutância-voltagem, a influência da carga foi mais complexa: a incorporação de uma carga negativa na região troncular induziu aumento da assimetria, já a incorporação à região copal (parte cis do poro) provocou uma diminuição. A intensidade destas alterações dependeu do raio, do tipo da carga móvel introduzida sobre o eixo longitudinal do canal, sendo maior nas posições das cargas próxima das entradas do poro. Esses resultados sugerem que a carga livre que reveste a parede do lume do poro seja responsável pela seletividade cátion-anion do canal. Considerando que a distribuição das cargas entre as entradas seja fundamental, para determinar a assimetria da curva de dependência condutância-voltagem. Nós esperamos que esses resultados sirvam de modelo para estudos com outros canais de dimensões nanométricas, em membranas biológicas ou bicamadas lipídicas planas e para aplicações biotecnológicas