Navegando por Autor "Chavante, Suely Ferreira"
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Artigo Anti-IIa activity and antitumor properties of a hybrid heparin/heparan sulfate-like compound from Litopenaeus vannamei shrimp(Elsevier, 2018-06-30) Brito, Adriana da Silva; Cavalcante, Rômulo S.; Cavalheiro, Renan P.; Palhares, Laís C. G. F.; Nobre, Leonardo Thiago Duarte Barreto; Souza, Giulianna Paiva Viana de Andrade; Nader, Helena B.; Lima, Marcelo A.; Chavante, Suely FerreiraIn this present study, the anti-IIa activity and the antitumor properties of a hybrid heparin/heparan sulfate-like compound (sH/HS) from Litopenaeus vannamei shrimp heads are related. In addition to inhibiting 90.7% of thrombin activity at the lowest tested concentration (0.5 μg/mL), sH/HS compound stimulated the synthesis of antithrombotic heparan sulfate by endothelial cells in a dose-dependent manner. In vitro experiments demonstrated that the molecule from shrimp displayed a potent anti-angiogenic effect, reducing over 80% of the tubular structures formation at 50 and 100 μg/mL. In addition, sH/HS compound was able to inhibit the migration of B16F10 cells at all tested concentrations without affecting the cell viability. Although the studied compound had no effect on the proliferation of such cells during a period of 24 h, it had a significant long-term antiproliferative effect, reducing about 80% of colony formation and anchorage-independent growth at 50 and 100 μg/mL concentrations. When its effectiveness was tested in vivo, it was demonstrated that sH/HS promoted a reduction of more than 90% of tumor growth. In the context of thromboembolic disorders associated with cancer, such findings make the sH/HS compound an excellent target for studies on inhibiting of development and tumor progression, and the prevention of coagulopathiesDissertação Atividade antiinflamatória de uma heterofucana da alga marrom Padina gymnospora(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2007-09-05) Marques, Cybelle Teixeira; Leite, Edda Lisboa; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783254U6&dataRevisao=null; ; http://lattes.cnpq.br/7320948901041015; Chavante, Suely Ferreira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8Fucanas, polissacarídeos sulfatados extraídos de alga marrom e alguns equinodermos, têm sido extensivamente estudadas devido as suas diversas atividades biológicas e pela sua interferência com mecanismos moleculares de reconhecimento celular, incluindo o tráfego de leucócitos dos vasos sanguíneos para o interior de sítios inflamatórios mediado pela família das moléculas de adesão denominada selectinas. Neste presente estudo, nós examinamos a estrutura de uma heterofucana extraída da alga marrom Padina gymnospora e seu efeito sobre a migração de leucócitos para o peritônio. Os polissacarídeos sulfatados foram extraídos da alga marrom por proteólise com a enzima proteolítica maxatase. A presença de contaminação por proteínas e ácido urônico foi detectada no extrato bruto dos polissacarídeos. Fracionamento do extrato bruto com concentrações crescentes de acetona produziu cinco frações com diferentes concentrações de fucose, xilose, ácido urônico, galactose, glicose e sulfato. A fração precipitada com 1,5 volume de acetona foi caracterizada por infravermelho e ressonância magnética nuclear, através das quais se pôde constatar a presença de grupos sulfato no C4 da -L-fucose. A ação antiinflamatória deste composto foi avaliada através do ensaio de peritonite induzida por tioglicolato de sódio e através da produção de óxido nítrico por macrófagos peritoneais utilizando-se o reagente de Griess. A fração F1,5 mostrou-se eficiente na redução do influxo leucocitário para a cavidade peritoneal quando utilizados 10 mg/Kg e 25 mg/Kg resultando em uma diminuição na ordem de 56 e 39 %, respectivamente. Uma diminuição na produção de óxido nítrico ocorreu quando altas concentrações de fucana foram usadas. A citotoxicidade do composto também foi avaliada utilizando-se como parâmetro a redução do 3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). A fração F1,5 não apresentou citotoxicidade quando utilizados 500 μg/ml da fração. Este estudo sugere o uso da fração F1,5 (heterofucana) como um antiinflamatórioDissertação Avaliação do efeito do composto tipo heparina isolado do caranguejo Chaceon fenneri na hemostasia e na morte celular(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2012-07-20) Araujo, Raquel Helen Brito de; Chavante, Suely Ferreira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; ; http://lattes.cnpq.br/4051179767333286; Souza, Giulianna Paiva Viana de Andrade; ; http://lattes.cnpq.br/9747224552107070; Lima, Tatjana Keesen de Souza; ; http://lattes.cnpq.br/5504382837656473; Lima, Marcelo Andrade de; ; http://lattes.cnpq.br/2373620610058306A heparina é um agente farmacêutico amplamente utilizado em medicina devido ao seu potente efeito anticoagulante. Além disso, tem a capacidade de inibir a proliferação, invasão e adesão de células cancerosas ao endotélio vascular. No entanto, a sua aplicabilidade clínica pode ser comprometida por efeitos secundários tais como hemorragia. Assim, a busca de compostos naturais com baixo risco hemorrágico e possível aplicabilidade terapêutica tem sido alvo de vários grupos de pesquisa. A partir desta perspectiva, este estudo visa avaliar as atividades hemorrágica, anticoagulante e efeito citotóxico para as diferentes linhagens de células tumorais (HeLa, B16-F10, HepG2, HS-5,) e células de fibroblastos (3T3) proporcionadas pelo composto tipo heparina obtido do caranguejo Chaceon fenneri. Dessa forma, o composto foi purificado após proteólise, cromatografia de troca iônica e fracionamento com acetona, e caracterizado por eletroforese em gel de agarose e degradação enzimática. O composto em estudo mostrou comportamento eletroforético semelhante à heparina de mamífero, e alta razão de proporção de dissacarídeos trissulfatado / N-acetilado. Além disso, o composto apresentou baixa atividade anticoagulante in vitro usando aPTT e um efeito hemorrágico menor quando comparado com heparina de mamífero. O composto tipo heparina obtido do caranguejo Chaceon fenneri mostrou efeito citotóxico significativo (p <0,001) em células linhagens de células tumorais HeLa, HepG2 e B16-F10 com valores de IC50 de 1000 ug / mL, após a incubação durante 72 horas. Para avaliar a influência do composto sobre o ciclo celular em células HeLa, foi realizada uma análise por citometria de fluxo. Os resultados desta análise mostraram que a influência do composto sobre o ciclo celular aumenta a fase S e diminui a fase G2. Assim, essas propriedades do composto tipo heparina obtido do caranguejo Chaceon fenneri sugerem este composto como um agente terapêutico em potencialDissertação Avaliação do extrato do fungo caripia montagnei e de agonistas de PPAR - α no processo inflamatório(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2008-06-27) Queiroz, Lissandra Souza; Leite, Edda Lisboa; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783254U6&dataRevisao=null; ; http://lattes.cnpq.br/1353172786535918; Chavante, Suely Ferreira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; Souza, Giulianna Paiva Viana de Andrade; ; http://lattes.cnpq.br/9747224552107070Os fungos tem sido objeto de intensa pesquisa, tendo em vista seu elevado potencial de aplicação em diferentes setores da indústria farmacológica e alimentar. Dentre os diversos compostos bioativos de natureza polissacarídica presentes nos fungos as glucanas estão entre os mais pesquisados. Estes são polímeros de glucose amplamente distribuídos na natureza e classificadas conforme o tipo de ligação glicosídica [α, β]. Os Receptores Ativados por Proliferadores de Peroxissoma (PPARs) são fatores de transcrição, pertencentes à família de receptores nucleares que se ligam a agonistas específicos e possuem grande importância no controle do processo inflamatório. O objetivo deste trabalho foi realizar a caracterização química do extrato do fungo Caripia montagnei, avaliar seu efeito antiinflamatório e antibacteriano, além de verificar se este efeito acontece via PPAR. C.montagnei é constituído de carboidratos (63.3 ± 0.73%), lipídeos (21.4± 0.9%) e proteínas (2.2±0.4%). O extrato aquoso resultante do fracionamento desse fungo mostrou ser constituído por carboidratos (98.7±0.9%) e proteína (1.3±0.8%). As análises de espectrofotometria de infravermelho e de ressonância magnética nuclear (NMR) demonstraram que o extrato do fungo C. montagnei é rico em β-glucanas. Na peritonite induzida por tioglicolato, o extrato de Caripia montagnei (50 mg/Kg) conseguiu reduzir o processo inflamatório em 65.5± 0.9%, este valor é superior a Wy-14643 (49.3±0.65%), PFOA (48.9±0,69%) e clofibrato (35.2±0,95%), que são agonistas de PPAR-α, e semelhante ao diclofenaco (81.6± 0,79). No edema plantar as glucanas de C. montagnei (50 mg/Kg) e o L-NAME apresentaram redução do edema de forma semelhante, 91.4±1.1% e 92,8±0.9%, respectivamente. O óxido nítrico (NO), mediadores da inflamação mostrou que em todos os grupos testados houve redução significativa (P<0.001) dos níveis de nitrato/nitrito quando comparados ao controle positivo. No ensaio de citotoxicidade as glucanas de C. montagnei não apresentaram toxicidade nas concentrações testadas (2.5, 5.0, 10.0, 20.0 e 40.0 ug/100uL) no período de 4 horas. A atividade antibacteriana (30, 90 e 150 mg/mL) revelou que não houve inibição do crescimento bacteriano. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que as glucanas de Caripia montagnei possuem um grande potencial de aplicação como antiinflamatório. Este efeito é mediado parcialmente por ativação dos PPARs e por inibição da COX e iNOSDissertação Avaliação do potencial anti-inflamatório de composto tipo heparina (cCTH) extraído do caranguejo Goniopsis cruentata em modelo experimental de peritonite(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-03-01) Azevedo, Fernanda Marques de; Chavante, Suely Ferreira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; ; http://lattes.cnpq.br/2480053651570350; Lima, Tatjana Keesen de Souza; ; http://lattes.cnpq.br/5504382837656473; Farias, Eduardo Henrique Cunha de; ; http://lattes.cnpq.br/0933304924768138A heparina, um polissacarídeo sulfatado, foi o primeiro composto utilizado como anticoagulante e agente antitrombótico. Devido às suas características estruturais, possui ainda um grande potencial anti-inflamatório, entretanto tal uso na inflamação é limitado em razão de seus efeitos acentuados na coagulação. A ocorrência de compostos semelhantes à heparina que apresentam atividade anticoagulante diminuída em invertebrados aquáticos, como o caranguejo Goniopsis cruentata, despertou o interesse para o estudo de tais compostos como fármacos anti-inflamatórios. Diante disso, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o potencial modulador do composto semelhante à heparina extraído do Goniopsis cruentata em eventos inflamatórios, coagulação, além de avaliar alguns aspectos de sua estrutura. O composto tipo heparina apresentou alto grau de N-sulfatação em sua estrutura, sendo capaz de reduzir a migração leucocitária para a cavidade peritoneal em doses mais baixas em relação à heparina e ao diclofenaco de sódio (anti-inflamatório comercial). Além disso, foi capaz ainda de inibir a produção de óxido nítrico e fator de necrose tumoral alfa por macrófagos ativados, inibiu a ativação da enzima neutrofílica elastase em concentrações baixas e apresentou um menor efeito anticoagulante em doses altas em comparação com a heparina de mucosa suína. Devido a essas observações, o composto extraído do caranguejo Goniopsis cruentata pode ser utilizado como um modelo estrutural para futuros agentes anti-inflamatóriosDissertação Avaliação do potencial anti-inflamatório, anticoagulante e hemorrágico de heparinóides presentes em "Artemia franciscana"(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2004-11-05) Moura, Celton Pereira de; Chavante, Suely Ferreira; Leite, Edda Lisboa; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783254U6&dataRevisao=null; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4776941E7; Abreu, Luiz Roberto Diz de; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723470U6; Silva, Maria da Paz Carvalho da; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781416A2Heparam sulfato (HS) e Heparina (Hep) são glicosaminoglicanos (GAGs), heterogêneos e altamente polianiônicos. HS é estruturalmente relacionado a heparina, mas contém uma quantidade menor de grupos sulfatados que a Hep. Devido às similaridades estruturais entre estes dois polímeros, eles têm sido denominados conjuntamente de heparinóides. Ambas as cadeias ligam-se a uma variedade de proteínas mediadas por vários processos fisiológicos importantes, incluindo a coagulação sanguínea, adesão celular e regulação dos fatores de crescimento. O presente estudo descreve a presença de uma população de heparinóides (F-3.0M) diferenciados presentes em Artemia franciscana os quais foram isolados por proteólise e fracionados por cromatografia de troca iônica com variadas concentrações de NaCl. Neste trabalho, utilizamos modelos in vivo para avaliar a homeostasia e a atividade anti-inflamatória destes heparinoides. A hemostasia foi avaliada por modelo de escarificação em caudas de ratos Wistar enquanto que o processo inflamatório foi observado através de peritonite induzida por tioglicolato de sódio a 3%. Os heparinóides eluidos com 3,0M de NaCl mostraram por eletroforese em diversos tampões uma única banda com comportamento intermediário entre a Hep de mamífero e HS. O principal produto obtido da fração F-3.0M de Artemia franciscana após a degradação enzimática com heparitinases I e II de Flavo bacterium Heparinum foram dissacarídeos N-sulfatados (U-GlcNS,6S/ U,2S-GlcNS e ∆U-GlcNS) e dissacarídeos N-acetilados (∆U, GlcNAc). Estes heparinóides apresentaram uma baixa atividade hemorrágica somente na concentração de 400μg/ml, é similar a heparina na concentração de 25μg/ml. Os resultados sugerem ainda, que esta fração tem baixa ação anticoagulante APTT (62,2s); não apresentando ação sobre PT, indicando que não tem ação sobre a via extrínseca da cascata. Os testes de atividade anti-inflamatória, desta fração tem efeito inibitório sobre a migração dos leucócitos da ordem de 64,5% na concentração de 10 μg/ml (P<0.001)Heparam sulfato (HS) e Heparina (Hep) são glicosaminoglicanos (GAGs), heterogêneos e altamente polianiônicos. HS é estruturalmente relacionado a heparina, mas contém uma quantidade menor de grupos sulfatados que a Hep. Devido às similaridades estruturais entre estes dois polímeros, eles têm sido denominados conjuntamente de heparinóides. Ambas as cadeias ligam-se a uma variedade de proteínas mediadas por vários processos fisiológicos importantes, incluindo a coagulação sanguínea, adesão celular e regulação dos fatores de crescimento. O presente estudo descreve a presença de uma população de heparinóides (F-3.0M) diferenciados presentes em Artemia franciscana os quais foram isolados por proteólise e fracionados por cromatografia de troca iônica com variadas concentrações de NaCl. Neste trabalho, utilizamos modelos in vivo para avaliar a homeostasia e a atividade anti-inflamatória destes heparinoides. A hemostasia foi avaliada por modelo de escarificação em caudas de ratos Wistar enquanto que o processo inflamatório foi observado através de peritonite induzida por tioglicolato de sódio a 3%. Os heparinóides eluidos com 3,0M de NaCl mostraram por eletroforese em diversos tampões uma única banda com comportamento intermediário entre a Hep de mamífero e HS. O principal produto obtido da fração F-3.0M de Artemia franciscana após a degradação enzimática com heparitinases I e II de Flavo bacterium Heparinum foram dissacarídeos N-sulfatados (U-GlcNS,6S/ U,2S-GlcNS e ∆U-GlcNS) e dissacarídeos N-acetilados (∆U, GlcNAc). Estes heparinóides apresentaram uma baixa atividade hemorrágica somente na concentração de 400μg/ml, é similar a heparina na concentração de 25μg/ml. Os resultados sugerem ainda, que esta fração tem baixa ação anticoagulante APTT (62,2s); não apresentando ação sobre PT, indicando que não tem ação sobre a via extrínseca da cascata. Os testes de atividade anti-inflamatória, desta fração tem efeito inibitório sobre a migração dos leucócitos da ordem de 64,5% na concentração de 10 μg/ml (P<0.001)Dissertação Avaliação do potencial antioxidante de Condroitim sulfato extraído das vísceras de tilápia Oreochromis niloticus(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-08-27) Medeiros, Luiz Henrique Costa de; Chavante, Suely Ferreira; Souza, Giulianna Paiva Viana de Andrade; ; http://lattes.cnpq.br/9747224552107070; ; http://lattes.cnpq.br/3440814329803472; ; http://lattes.cnpq.br/9786859259093914; Bezerra, Iglesias de Lacerda; ; http://lattes.cnpq.br/9190547635625352; Filgueira, Luciana Guimaraes Alves; ; http://lattes.cnpq.br/9951316929526841Os glicosaminoglicanos são polissacarídeos presentes na superfície celular e matriz extracelular da grande maioria dos animais, eles desempenham diversas funções biológicas, tais como crescimento celular, diferenciação, antioxidante, neuroprotetores e outros. Entre os glicosaminoglicanos, o condroitim sulfato (CS) se destaca por seu efeito antioxidante e pode ser encontrado em várias espécies de peixes, como a tilápia (Oreochromis niloticus) cujo cultivo representa uma importante atividade econômica na cidade de Natal (RN/Brasil), a qual gera diariamente dezenas de quilos de vísceras como resíduo de sua produção. Desta forma, esse estudo visa utilizar os rejeitos da tilapicultura obtidos em feiras livres do município de Natal, como matéria prima para extração e purificação de condroitim sulfato, além de avaliar seu efeito antioxidante. Para isso os resíduos foram expostos a um processo de proteólise enzimática, seguido de complexação e descomplexação com resina Lewatit. Este método permitiu obter um pool de glicosaminoglicanos que em seguida foi exposto à técnicas de purificação baseados em fracionamentos com acetona e cromatografia de troca iônica acompanhados por eletroforese em gel de agarose e degradação enzimática. Posteriormente foram feitos testes antioxidantes que visaram quantificar a capacidade do CS em inibir espécies reativas intracelulares e in vitro, visto que o desequilíbrio nos níveis destas espécies reativas tem participação em quadros clínicos como as doenças autoimunes, neurodegenerativas e câncer. Para isso foram usados métodos de inibição de espécies reativas intracelulares (DCFH-DA), quelação dos íons ferroso e cúprico, inibição dos radicais superóxidos e hidroxila, além da inibição de óxido nítrico e peroxidação lipídica. Como resultados, foi possível observar que em cada quilo de massa seca de víscera de tilápia é possível extrair aproximadamente 69mg de condroitim sulfato purificado, sendo composto 59% por condroitim-4-sulfato. Através da observação dos valores obtidos nos testes antioxidante foi possível ressaltar uma inibição de até 52% do total de espécies reativas intracelulares em cultura de células RAW 264.7, sem demonstração de citotoxicidade até a concentração de 200mg/mL de condroitim. Os demais testes sugerem que essa inibição ocorre por diversos fatores, que vão desde a inibição dos metais e dos radicais livres (p<0,05), até a provável participação em vias secundárias, como a ativação de proteínas antioxidantes. Os resultados obtidos nesse estudo fortalecem a extração e uso de glicosaminoglicanos, em especial do condroitim sulfato, auxiliando na compreensão dos efeitos biológicos de condroitins oriundos de múltiplas fontes, dando ênfase para seu efeito antioxidante e fornecendo uma alternativa de descarte para o rejeito biológico produzido pela produção comercial de tilápia, abrindo perspectivas para possíveis usos dessa molécula na pesquisa e indústria.Tese Caracterização estrutural de um condroitim sulfato isolado do camarão Litopenaeus vannamei: atividade antitumoral em modelo de melanoma murino(2019-12-12) Palhares, Lais Cristina Gusmão Ferreira; Chavante, Suely Ferreira; Brito, Adriana da Silva; ; ; ; Scortecci, Katia Castanho; ; Jeronimo, Selma Maria Bezerra; ; Nader, Helena Bonciani; ; Tersariol, Ivarne Luís dos Santos;Os Glicosaminoglicanos são polissacarídeos sulfatados capazes de interagir com uma vasta gama de moléculas bioativas, as quais atuam em importantes processos fisiológicos e patológicos, incluindo o desenvolvimento tumoral. Dentre estas moléculas, a trombina, principal protease da coagulação é capaz de ativar inúmeras repostas celulares através da ativação do receptor ativador de protease 1 (PAR-1), que favorecem o desenvolvimento do câncer, como agregação plaquetária, proliferação, migração, expressão de oncogenes e metástase, além de atuar diretamente sobre a angiogênese, um dos eventos primordiais na biologia tumoral. Assim, uma vez que a trombina favorece de forma intrínseca a progressão tumoral através de PAR-1, biomoléculas capazes de inibir essa protease se tornam modelos interessantes na pesquisa do câncer. O presente trabalho descreve as características estruturais e o potencial antitumoral in vitro e in vivo de um condroitim sulfato isolado do cefalotórax do camarão Litopenaeus vannamei (sCS), o qual apresenta atividade anti-IIa. O composto foi obtido após proteólise, tratamento com acetona e purificação por cromatografias de troca-iônica e gel filtração. O sCS apresentou uma massa molecular média de 12 kDa e as análises por degradação enzimática e RMN revelaram que o composto apresenta resíduos únicos de GlcA 3-O-sulfato, além de GalNAc 4-O-sulfato, GalNAc 6-O-sulfato, e resíduos de GalNAc 4,6-di-O-sulfato. Semelhantemente à heparina, o sCS foi capaz de inibir atividades importantes para a progressão tumoral. Foi demonstrado que o sCS reduz 66% da migração de células de melanoma murino (B16F10) no ensaio da fenda e 70% através do transwell. Embora tenha sido incapaz de inibir a proliferação dessas células durante um período de 24h ou induzir aterações sobre o ciclo celular e apoptose, a molécula em estudo apresentou um importante efeito antiproliferativo em longo prazo, reduzindo cerca de 75% da clonogenicidade das células tumorais na concentração de 100 µg/mL (p<0,001), bem como a proliferação celular independente de ancoragem, um importante indicativo da malignidade do tumor. Esses resultados podem ser corroborados pela diminuição da expressão gênica in vitro mediada por esses GAGs de genes envolvidos no desenvolvimento do melanoma, como Cx-43, MAPK, RhoA, PAFR, NFKB1 e VEGFA. O composto do camarão inibiu ainda in vitro, moléculas cruciais para a agressividade do tumor como a melanina e o TNF-α em 52% e 75%, respectivamente. Esses resultados podem explicar a significativa redução do crescimento tumoral do melanoma (89% de redução) e a diminuição dos níveis plasmáticos de IL-1β, TNF-α e VEGF (32%, 65% e 88% de inibição, respectivamente) em camundongos tratados com 300 µg/Kg/dia de sCS. Adicionalmente, o sCS e heparina reduziram in vivo, os níveis de mRNA de todos os genes avaliados, inclusive PAR-1, bem como a marcação de imunohistoquímica para PAR-1 e VEGF em amostras de tumor e pulmão. Os dados aqui exibidos apontam o sCS como um modelo biotecnológico de potencial para o desenvolvimento de novas moléculas capazes de atuar na terapia oncológica à nível molecular.Tese Caracterização estrutural de um heparinoide com potencial anticoagulante e antitumoral isolado do camarão Litopenaeus vannamei(2015-12-22) Brito, Adriana da Silva; Chavante, Suely Ferreira; Lima, Marcelo Andrade de; ; ; ; Santos, Elizeu Antunes dos; ; Vaez, Juliana Rocha; ; Cavalheiro, Renan Pelluzzi; ; Andrade Neto, Valter Ferreira de;Complicações trombóticas são a segunda causa de morte em pacientes com câncer e a terapia anticoagulante com heparina tem sido amplamente indicada. Além de prevenir a ocorrência de tromboembolismo, a heparina também é capaz de inibir passos importantes da progressão tumoral, contribuindo para a redução da agressividade do tumor. Entretanto, seu aproveitamento clínico é limitado especialmente pela ocorrência de hemorragias, o que tem estimulado a pesquisa por análogos de heparina (heparinoides) com efeitos colaterais reduzidos. O presente trabalho descreve as características estruturais e o potencial anticoagulante e antitumoral de um heparinoide com baixo risco hemorrágico isolado do cefalotórax do camarão Litopenaeus vannamei. A molécula foi obtida após proteólise, tratamento com acetona e purificação por cromatografias de troca-iônica e gel filtração. O heparinoide do camarão apresentou uma massa molecular média de ~ 15 kDa e as análises por despolimerização enzimática e RMN revelaram que o composto compartilha características estruturais com a heparina, como o alto grau de N- e 6-O-sulfatação, além do baixo grau de N-acetilação, e também com o heparam sulfato (HS), como o alto conteúdo de ácido glucurônico. Além de inibir a formação de coágulo pelo ensaio de aPTT, o heparinoide foi capaz de promover a estabilização térmica da antitrombina, o que pode justificar suas atividades anti-Xa e anti-IIa. Semelhante à heparina de mamíferos, o composto de L. vannamei foi capaz de induzir a síntese de HS antitrombótico por células endoteliais (ECs) em todas as concentrações testadas. Quando avaliado com relação a seu efeito sobre as etapas da progressão tumoral, foi demonstrado que o composto isolado do camarão reduz mais de 80% da formação de estruturas tubulares em matrigel, e 86% da migração de células de melanoma murino (B16F10) por uma membrana permeável. Embora tenha sido incapaz de inibir a proliferação dessas células durante um período de 24 h, a molécula em estudo apresentou um importante efeito antiproliferativo em longo prazo, reduzindo cerca de 80% da clonogenicidade das células tumorais nas concentrações de 50 e 100 µg/mL (p<0,001), bem como a proliferação celular independente de ancoragem, um importante indicativo da malignidade do tumor. Esses resultados podem explicar a significativa redução do crescimento tumoral em camundongos C57BL/6 tratados com heparinoide nas doses de 50 e 100 µg/Kg/dia (82,2 e 97% de redução, respectivamente). Os resultados obtidos aqui demonstram que o heparinoide de L. vannamei pode ser um modelo promissor para o desenvolvimento de novos agentes capazes de auxiliar no tratamento oncológico, uma vez que o mesmo pode ser efetivo não apenas em reduzir a progressão do tumor, com também em prevenir as complicações trombóticas que ocorrem no paciente com câncer. Além disso, o heparinoide ainda oferece a vantagem de ser obtido a partir de uma fonte de baixo custo e possuir uma atividade hemorrágica negligente.Dissertação Caracterização estrutural de um novo condroitim antitrombótico altamente sulfatado contendo o resíduo de GlcA 2,3-O-dissulfato do Litopenaeus vannamei(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2015-08-07) Cavalcante, Rômulo dos Santos; Chavante, Suely Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/3440814329803472; ; http://lattes.cnpq.br/2729904948333904; Sassaki, Guilherme Lanzi; ; http://lattes.cnpq.br/6433828746058651; Araújo Júnior, Raimundo Fernandes de; ; http://lattes.cnpq.br/1903940945895093Por muitos anos as doenças cardiovasculares e os distúrbios tromboembólicos vêm representando a principal causa de mortes por doenças no mundo. Diante desta realidade e das complicações do uso da heparina, vários estudos relatando a ocorrência de glicosaminoglicanos com potencial antitrombótico já foram descritos. No entanto, com o aprimoramento e o surgimento de novas técnicas de caracterização estrutural, tem sido possível identificar novas moléculas antitrombóticas e compreender outros aspectos da relação estrutura-atividade destes compostos. Nesse contexto, este trabalho descreve a ocorrência de um condroitim sulfato altamente sulfatado (CSAS) e com grande potencial terapêutico no cefalotórax do camarão Litopenaeus vannamei. Essa molécula foi isolada mediante proteólise, tratamento com acetona e purificado por cromatografias de troca-iônica e gel filtração. Estruturalmente, o CSAS do camarão apresentou uma massa molecular média de ~ 26 kDa e não foi completamente digerido pelas condroitinases AC e ABC liases. A partir dos espectros de RMN unidimensional TOCSY seletivo e bidimensional ¹H/¹³C HSQC foi possível identificar a presença do raro resíduo de ácido glucurônico 2,3-O-disulfatado (GlcA,2,3S), além dos 2-O- e 3-O-sulfatado. A avaliação do CSAS do camarão sobre o sistema de coagulação mostrou uma grande capacidade de inibição da trombina (~ 94% de inibição) e uma insignificante atividade anticoagulante pelos métodos de TTPA, TP e atividade anti-Xa. Esses dados, somados a incapacidade de estabilização da antitrombina III pelo CSAS do camarão, sugerem que sua atividade anticoagulante é mediada pelo cofator II da heparina. Além disso, foi observado que esta molécula também apresenta um baixo efeito hemorrágico e um grande potencial antitrombótico observado pelos métodos de indução de trombose venosa em ratos (~ 70% de redução dos trombos formados) e de estímulo da síntese de GAGs antitrombóticos em células endoteliais. Este trabalho relata pela primeira vez a ocorrência de um CSASDissertação Coordenação dos sistemas antioxidantes da catalase e da ascorbato peroxidase durante o envelhecimento acelerado de sementes de cártamo e girassol(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-12-18) Castro, Érika Cristina Pinheiro de; Lima, João Paulo Matos Santos; Chavante, Suely Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/3440814329803472; ; http://lattes.cnpq.br/3289758851760692; ; http://lattes.cnpq.br/7571203496260428; Scortecci, Kátia Castanho; ; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; Lanza, Luciana Nunes Menolli; ; http://lattes.cnpq.br/7883331115164146O consumo mundial de óleos vegetais aumentou nos últimos anos devido sua aplicação na indústria alimentícia, química, farmacêutica e, recentemente energética. Todavia, as sementes oleaginosas das quais esses óleos são extraídos envelhecem rapidamente, comprometendo o cultivo e a produtividade destas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do envelhecimento sobre a coordenação dos sistemas antioxidantes da catalase (CAT) e da ascorbato peroxidase (APX) em cártamo e girassol. Para tanto, sementes foram submetidas a envelhecimento acelerado por 3, 6 e 9 dias e cultivadas em papel-toalha umedecido durante 72h. Adicionalmente, antes de serem submetidas ao envelhecimento acelerado, sementes de girassol foram pré- tratadas por osmopriming com 10 mM de ascorbato (ASC) ou 3 amino 1,2,4 triazole(3-AT), inibidor específico da CAT. O método de envelhecimento artificial utilizado foi eficiente para ambas espécies, pois promoveu diminuição na germinação, no desenvolvimento de plântulas e no crescimento destas, principalmente no cártamo. O envelhecimento provocou inibição da atividade CAT para ambas as espécies e para compensar tal inibição, o girassol aumentou a expressão do mRNA desta enzima, enquanto o cártamo mobilizou mais a atividade da APX. A análise da expressão da malato sintase e do conteúdo de açucares demonstrou que o girassol consome suas reservas lipídicas no estado quiescente, enquanto o cártamo é mais dependente dos carboidratos. O pré-tratamento com 3-AT inibiu a atividade CAT e estimulou a da APX, enquanto o ASC atuou de forma inversa nesses sistemas. Nenhum dos tratamentos recuperou o declínio fisiológico decorrente do envelhecimento. Conclui-se que o envelhecimento alterou significativamente o metabolismo antioxidante das oleaginosas e, apesar das variações interespecíficas na resposta a esse processo, a depleção do sistema antioxidante da CAT foi comum, deforma que a mensuração da atividade desta enzima pode ser utilizada para identificação de lotes de sementes envelhecidas.Dissertação Um dermatam sulfato antitrombótico do camarão Litopenaeus vanammei inibe a inflamação e angiogênese(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-03-29) Palhares, Lais Cristina Gusmão Ferreira; Chavante, Suely Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/3440814329803472; ; http://lattes.cnpq.br/5860779216293603; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; Filgueira, Luciana Guimarães Alves; ; http://lattes.cnpq.br/9951316929526841; Brito, Adriana da Silva; ; http://lattes.cnpq.br/0887305061762326; Clemente, Tatjana Keesen de Souza Lima;A inflamação é composta de uma reação vascular e outra celular, conferindo diferentes reações de tecidos e células, tanto do ambiente intravascular, como o do ambiente extravascular. À medida que o processo inflamatório ocorre, proteases da coagulação, em especial a trombina (FIIa), são capazes de desencadear diversas respostas celulares na biologia vascular e por isso, frequentemente é observada a ativação de outros sistemas biológicos, levando à complicações durante um evento inflamatório, como a trombose e a angiogênese. Assim, moléculas antagonistas desses eventos são modelos interessantes para o desenvolvimento de novos fármacos anti-inflamatórios. Neste contexto, destacam-se os glicosaminoglicanos (GAGs), os quais interagem com diversas proteínas envolvidas em processos biológicos importantes, incluindo inflamação e coagulação. Por essa razão, o presente trabalho teve por objetivo avaliar os potenciais anti-inflamatórios, antitrombótico, antiangiogênico, bem como anticoagulante de GAGs do tipo dermatam sulfato (DS) extraídos do cefalotórax do camarão Litopenaeus vannamei. O composto foi obtido após proteólise e purificação por cromatografia de troca-iônica. Após total digestão por liases que digerem compostos tipo DS (condroitinase ABC), sua natureza do tipo DS foi revelada, sendo então denominado DSL. O composto do camarão mostrou reduzido efeito anticoagulante pelo ensaio de TTPa, porém apresentou alta atividade anti-IIa, diretamente e via Cofator II da heparina. Sobre a inflamação, o composto apresentou significativo efeito inibitório com redução de citocinas pró-inflamatórias. Potenciais inibitórios foram relatados no ensaio antitrombótico e antiangiogênico, sendo este último dose-dependente. Quanto à atividade anti-hemostática, o polissacarídeo não induziu efeito hemorrágico significativo. Assim, os resultados exibidos pelo composto tipo DS isolado do camarão, apontam este glicosaminoglicano como alvo biotecnológico com perspectivas para o desenvolvimento de novas drogas multipotentes.Tese Desenvolvimento e validação de testes de fluxo lateral para a detecção de cultivares geneticamente modificados e de aflatoxinas em produtos agrícolas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2015-12-03) Evangelista, Vanessa Olinto dos Santos; Grossi, Maria Fátima; ; http://lattes.cnpq.br/3058512809761818; ; http://lattes.cnpq.br/2796222413828925; Uchoa, Adriana Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; Chavante, Suely Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/3440814329803472; Oliveira, Hermógenes David de; ; http://lattes.cnpq.br/4151792037839111; Silva, Maria Cristina Mattar da; ; http://lattes.cnpq.br/6697749659327251A expansão agrícola utilizando cultivares geneticamente modificados (GM) é fenômeno mundial. Esse fato tem impulsionado a implementação de legislações regulatórias para monitorar à presença de variedades GM em culturas agrícolas. Outra importante demanda mundial está relacionada ao consumo de alimentos contaminados por aflatoxinas. Essas moléculas constituem um classe de compostos extremamente tóxicos que causam efeitos danosos para a saúde humana e animal. Por isso, a segurança e qualidade dos produtos agrícolas são essenciais para os consumidores. Os testes de fluxo lateral são métodos alternativos promissores que podem ser utilizados tanto para a detecção de proteínas transgênicas expressas em culturas GM quanto para a detecção de compostos tóxicos em alimentos. Essa técnica apresenta vantagens adicionais quando comparado aos métodos convencionais, como: simplicidade, rapidez e baixo custo. Nesse estudo foram desenvolvidos dois testes de fluxo lateral, um para a identificação das proteínas Cry1Ac e Cry8 Ka5 expressas em cultivares de algodão GM e o outro, para a detecção de aflatoxinas em produtos agrícolas. O teste, para a detecção dos cultivares transgênicos, foi desenvolvido no formato sandwhich. Esse teste foi desenvolvido utilizando os anticorpos monoclonais 1B1 e 5H4, produzidos contra a proteína Cry1Ac, mas que apresentaram reação cruzada para a proteína Cry8Ka5. O monoclonal anti-Cry1B1 foi conjugado com nanopartículas de ouro coloidal (40 nm) e utilizados como reagente de detecção. O monoclonal 5H4 foi adsorvido na membrana de nitrocelulose, na região denominada de linha teste e utilizado como reagente de captura do teste. Na linha controle, foi adsorvido o anticorpo anti-mouse IgG. Esses testes foram validados utilizando amostras de folhas de plantas de algodão GM ( Bollgard I ® e Planta 50- produzida em nosso laboratório) e folhas provenientes de cultivares não GM ( Cooker 312). Os resultados demonstraram que esse teste foi capaz de distinguir eficientemente amostras GM de não GM. Além disso, também apresentou elevada sensibilidade, sendo capaz de detectar 0,06 μg das proteínas respectivas nos cultivares transgênicos. O teste para a detecção de aflatoxinas foi desenvolvido no formato competitivo. O anticorpo α-AFLA 3B6, produzido contra AFB1, apresentou reatividade cruzada contra as aflatoxinas AFB2, AFG1, AFG2 e AFM1 e por isso, foi utilizado para o desenvolvimento das fitas-testes. Nesse teste o anticorpo 3B6 foi conjugado com ouro coloidal (40 nm) e utilizado como reagente de detecção. O antígeno AFB1 foi adsorvido na linha teste e utilizado como reagente de captura e o anti-mouse IgG foi imobilizado na linha controle do teste. Para a validação, grãos de soja contaminados com o fungo Aspergillus flavus, foram utilizados. Esses testes também foram avaliados quanto à habilidade de detecção de aflatoxinas em amostras alimentares, incluindo leite e proteína texturizada de soja. Os resultados demonstraram que a fita eficientemente identificou amostras contendo aflatoxinas. Além disso, apresentou sensibilidade de 0,5 ng/mL ou 0,5 μg/Kg. Os resultados obtidos sugerem que as fitas testes desenvolvidas podem ser utilizadas como método rápido e de baixo custo para o screening de cultivares GM, expressando as proteínas Cry1Ac e Cry8Ka5, quanto para a detecção de aflatoxinas em amostras alimentares.Dissertação Efeito anti-inflamatório do heparinóide isolado do camarão Litopenaeus vannamei sobre a peritonite aguda(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-03-04) Coelho, Luciana de Figueirêdo; Chavante, Suely Ferreira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; ; http://lattes.cnpq.br/4165268111710230; Leite, Edda Lisboa; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783254U6&dataRevisao=null; Bezerra, Ranilson de Souza; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4797575J5Nos últimos anos a heparina tem sido alvo de diversos estudos que visam ampliar seu uso como agente terapêutico, devido à sua habilidade de modular a atividade de várias proteínas que desempenham papéis importantes na regulação de processos fisiopatológicos. Em diversos experimentos e ensaios pré-clínicos, a heparina tem demonstrado papel anti-inflamatório. Entretanto, seu uso clínico é limitado, devido à sua forte atividade anticoagulante e complicações hemorrágicas. Por essa razão, considerável esforço tem sido empregado na descoberta de análogos da heparina (heparinóide) com reduzidos efeitos colaterais, que retenham as propriedades anti-inflamatórias da heparina. Nesse contexto, um heparinóide (HL) obtido da cabeça do camarão Litopenaeus vannamei, de semelhança estrutural à heparina, apresentou em estudos prévios atividade anti-inflamatória em modelo de peritonite aguda, com reduzido efeito anticoagulante in vitro e baixa atividade hemorrágica. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito deste heparinóide sobre a resposta inflamatória aguda em diferentes tempos (3 ou 6 horas após a indução do estímulo inflamatório), utilizando o modelo de peritonite aguda induzida em camundongos. Foi analisado também o efeito do HL sobre a atividade da elastase, uma enzima envolvida no recrutamento de leucócitos. Além disso, para verificar se as diferentes doses do heparinóide e da heparina alteram o equilíbrio hemostático in vivo, foi avaliado o efeito desses compostos sobre o tempo de coagulação do plasma nos animais submetidos à inflamação. Os resultados revelam que em 3 horas, todas as doses do heparinóide foram capazes de interferir de forma eficiente no processo inflamatório agudo sem apresentar efeito anticoagulante e interferência no equilíbrio hemostático, ao contrário da dose de extrapolação da heparina que induziu forte hemorragia, além de apresentar alta atividade anticoagulante. Entretanto, no tempo de 6 horas após a indução da inflamação, apenas as doses de 0,1 e 1,0 μg/Kg da heparina e 1,0 μg/Kg do heparinóide mantiveram o efeito antimigratório, sem alterar o equilíbrio hemostático. Esses resultados indicam que o efeito antimigratório depende do tempo e da dose administrada. O HL e a heparina também foram capazes de inibir a atividade da enzima elastase. A descoberta desse composto bioativo no cefalotórax do camarão poderá despertar grande interesse biotecnológico, pois este composto poderia servir como um modelo estrutural interessante para o desenvolvimento de novos agentes terapêuticos específicos para a peritoniteDissertação Efeito do estado nutricional bioquímico de retinol e alfatocoferol sobre seus níveis em lactantes(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2011-04-01) Lira, Larissa Queiroz de; Dimenstein, Roberto; ; http://lattes.cnpq.br/8520928220989866; ; http://lattes.cnpq.br/8078401196736211; Paiva, Adriana de Azevedo; ; http://lattes.cnpq.br/3029075145981510; Chavante, Suely Ferreira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8As vitaminas A e E são nutrientes essenciais em muitos processos biológicos, de modo que seu adequado fornecimento ao neonato é fundamental. No entanto, a biodisponibilidade dessas vitaminas pode ser limitada por fatores como o estado nutricional materno e a interação entre nutrientes. Este trabalho teve como objetivo investigar o efeito do estado nutricional bioquímico de retinol e de alfa-tocoferol sobre seus níveis no soro e no colostro materno. Participaram do estudo 103 puérperas saudáveis atendidas em maternidade pública de referência estadual (Natal-RN). Amostras de soro e colostro foram coletadas em jejum no pós-parto imediato e as análises de retinol e alfa-tocoferol foram feitas por cromatografia líquida de alta eficiência. Os valores de 1,05 μmol/L-1 de retinol no soro e de 2,09 μmol/L-1 de retinol no colostro foram adotados como pontos de cortes para caracterizar a condição bioquímica referente à vitamina A. Valores de 11,6 μmol/L-1 de alfa-tocoferol no soro e de 26,1 μmol/L-1 de alfa-tocoferol no colostro foram adotados como pontos de cortes para caracterizar a condição bioquímica referente à vitamina E. No grupo total de lactantes, a concentração média de retinol no soro (1,49 ± 0,4 μmol/L-1) e no colostro (2,18 ± 0,8 μmol/L-1), assim como, de alfatocoferol no soro (26,4 ± 8,0 μmol/L-1) e no colostro (26,1 ± 12,8 μmol/L-1) indicou adequado estado bioquímico. No entanto, ao se avaliar o indivíduo, foi constatada elevada prevalência de deficiência de retinol no soro (15%) e no colostro (50%), como também, de alfa-tocoferol no soro (16%) e no colostro (61%). Em mulheres com retinol sérico ≥ 1,05 μmol/L-1, foi encontrado correlação inversa entre retinol sérico e alfa-tocoferol do colostro (p = 0.008, r = -0.28). Esta associação não foi observada em mulheres com retinol sérico < 1,05 μmol/L-1. Tal situação evidencia pela primeira vez em humanos, que níveis fisiológicos adequados de retinol sérico podem influenciar negativamente a passagem de alfa-tocoferol para o leite materno. Apesar do diagnóstico de satisfatório estado nutricional do grupo total de lactantes, ao se avaliar o indivíduo, foi constatado elevado risco de deficiência subclínica para as vitaminas A e E a partir das dosagens feitas no colostroDissertação Influência do tempo e dose de heparina em modelo de peritonite aguda(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2011-08-05) Arimatéia, Dayse Santos; Chavante, Suely Ferreira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; ; http://lattes.cnpq.br/0324949606074190; Cruz, Ana Katarina Menezes da; ; http://lattes.cnpq.br/9810605697247961; Jerônimo, Selma Maria Bezerra; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785584A3&dataRevisao=nullNos últimos anos, a heparina vem sendo alvo de vários estudos relacionados à inflamação, devido sua capacidade de se ligar a diversas proteínas envolvidas com a resposta imune. Recentemente, em nosso laboratório, foi demonstrada, em modelo de peritonite induzida por tioglicolato, a capacidade da heparina em reduzir o influxo celular à cavidade peritoneal, 3 horas após o estímulo inflamatório. No presente trabalho, utilizando o mesmo modelo, foi avaliada a capacidade da heparina em interferir na infiltração leucocitária após 8 horas da indução da inflamação, momento em que a infiltração neutrofílica é máxima. Utilizando contagem diferencial celular, avaliou-se a influência da heparina sobre as populações celulares envolvidas na inflamação. Oito horas após o estímulo inflamatório, apenas a dosagem de heparina de 1 μg/Kg, manteve a capacidade de interferir na migração leucocitária, apresentando 62,8% de diminuição (p < 0,001) no influxo celular, quando comparada ao controle positivo. Enquanto para a dosagem de heparina de 15 μg/Kg foi observado efeito pró-inflamatório no sangue total verificado pelos aumentos de 60,9% (p < 0,001) e 117,8% (p < 0,001) na proporção de neutrófilos e monócitos, respectivamente, em comparação ao controle positivo. Além disso, essa dosagem também apresentou proporção neutrofílica no líquido peritoneal 27,3% maior que o controle positivo (p < 0,05). Essa dualidade entre efeitos anti- e pró-inflamatório nos diferentes tempos e doses analisados corroboram dados da literatura que atribuem à heparina um papel como imunomodulador pleiotrópico.Dissertação Polissacarídeos sulfatados de interesse farmacológico no camarão litopenaeus schimitti(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2006-06-12) Santos, Vanessa Olinto dos; Chavante, Suely Ferreira; Oliveira, Fernanda Wanderley de; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786179U0&dataRevisao=null; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; ; http://lattes.cnpq.br/2796222413828925; Bezerra, Ranilson de Souza; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4797575J5; Cavalcante, Jeferson de Souza; ; http://lattes.cnpq.br/2378505945149958Polissacarídeos sulfatados com características estruturais distintas e importantes atividades biológicas têm sido encontrados em uma diversidade de invertebrados marinhos. Por isso existe um grande interesse no campo da biotecnologia na pesquisa destes compostos sulfatados isolados de organismos aquáticos. No entanto, apesar da posição privilegiada do Brasil para a obtenção destes compostos, ainda são poucas as informações científicas sobre as substâncias isoladas e suas atividades biológicas. Diante do exposto, este presente trabalho teve por objetivos avaliar os potenciais farmacológicos dos glicosaminoglicanos (GAGs) isolados do camarão marinho Litopenaeus schimitti, sobre a hemostasia, coagulação sangüínea, migração leucocitária e adesão celular. Para isso os GAGs foram extraídos dos tecidos do crustáceo mediante proteólise, fracionamento com acetona e posteriormente submetidos aos ensaios farmacológicos. Os tecidos do crustáceo, abdômen e cefalotórax, apresentaram compostos semelhantes à heparina (heparinóides) com atividade anticoagulante de 45 UI/mg e 90 UI/mg, respectivamente. Estas moléculas apresentaram baixo efeito hemorrágico residual na concentração de 100 µg/mL, quando comparada com a heparina comercial não fracionada (HNF). Um outro composto semelhante ao dermatam sulfato (DS), constituído predominantemente por dissacarídeos dissulfatados foi isolado do abdômen do crustáceo. Este composto apresentou, na concentração de 15 µg/µL, uma inibição significativa (P<0.01) da migração leucocitária, reduzindo a infiltração celular em 65% quando comparado com os animais controle. Nessa mesma concentração o DS reduziu em 60% a concentração de proteínas do lavado peritonial. As análises qualitativas da composição celular do exudato peritonial foram similares ao encontrado para os animais controles em todas as concentrações testadas. Na concentração de 0,5 mg/mL foi capaz de reduzir em 40% a adesão das plaquetas aos leucócitos. Os dados obtidos demonstram que estes polissacarídeos sulfatados isolados do camarão L.schimitti podem vir a ser utilizados como compostos bioativos, podendo surgir como princípios ativos para o desenvolvimento de fármacos, anticoagulantes e moduladores da resposta inflamatóriaDissertação Potencial anti-inflamatório e antioxidante do Heparinoide isolado do camarão Litopenaeus vannamei(2018-10-26) Vasconcelos, Bárbara Monique de Freitas; Chavante, Suely Ferreira; Alves, Monique Gabriela das Chagas Faustino; ; ; ; Brito, Adriana da Silva; ; Vaez, Juliana Rocha;A resposta inflamatória é um processo de defesa do organismo, contudo sua atuação exacerbada gera um desequilíbrio, fazendo-se necessário o uso de compostos anti-inflamatórios. Entretanto, devido aos efeitos colaterais causados pelo uso prolongado desses medicamentos, tem-se intensificado a busca por novas moléculas que modulem a inflamação. CNOSiderando que um heparinoide previamente isolado do camarão Litopenaeus vannamei tem demonstrado capacidade de interferir em diferentes etapas da inflamação, foi despertado o nosso interesse em avaliar o efeito desse composto sobre a produção de citocinas e metabólitos reativos, os quais estão elevados durante o processo inflamatório. Para isso, avaliamos a migração leucocitária e os níveis de citocinas em modelo de peritonite induzida por LPS. Em seguida, investigamos a citotoxicidade do composto, produção de óxido nítrico e espécies reativas intracelular em macrófagos induzidos por LPS. Por fim, realizamos a os testes antioxidantes, determinando a quelação de íon ferroso, bem como a inibição das espécies reativas, ânion superóxido e radical hidroxil. Além disso, avaliamos a peroxidação lipídica e o radical DPPH. Os resultados de purificação mostraram que o heparinoide, denominado HL-GAG foi extraído de forma eficiente. O composto também reduziu 50% da migração leucocitária, ao sítio de injúria, além de reduzir os níveis de todas as citocinas testadas, com destaque para o TNF-α que apresentou uma redução de 57%. O HLGAG manteve a viabilidade celular em 90%, mesmo na maior concentração (100µg/mL), reduziu a produção de óxido nítrico, e das espécies reativas intracelular, sugerindo uma possível atuação antioxidante. Nos ensaio de quelação de íon ferroso, o HL-GAG reduziu os níveis deste íon em 48% a 100µg/mL. O composto também diminuiu a produção de ânion superóxido e radical hidroxil. Na peroxidação lipídica, o HL-GAG inibiu cerca de 58% da oxidação de lipídios, na menor concentração testada (25 µg/mL). Com relação ao DPPH, o HL-GAG apresentou uma redução de 70% aproximadamente na menor concentração. Portanto, podemos sugerir que o HL-GAG estaria modulando a resposta inflamatória via citocinas e mecanismos antioxidantes.Dissertação Potencial terapêutico de um heparinóide isolado do invertebrado marinho Litopenaeus vannamei(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2008-06-13) Brito, Adriana da Silva; Chavante, Suely Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=null; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8; ; http://lattes.cnpq.br/0887305061762326; Toma, Leny; ; http://lattes.cnpq.br/3669434753963813; Oliveira, Fernanda Wanderley de; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786179U0&dataRevisao=nullA ocorrência de compostos bioativos em representantes da biodiversidade marinha vem despertando o interesse da indústria farmacêutica. Heparina, um polissacarídeo sulfatado cuja presença já foi identificada em vários invertebrados marinhos, destaca-se por sua extraordinária versatilidade funcional. Além de interferir na coagulação sanguínea, essa molécula possui grande potencial antiinflamatório. No entanto, sua forte atividade anticoagulante dificulta o aproveitamento clínico de sua propriedade antiinflamatória, o que estimula a pesquisa por análogos de heparina com efeitos colaterais reduzidos. Diante disso, este trabalho teve por objetivos avaliar o efeito de um composto semelhante à heparina (heparinóide), isolado do cefalotórax do camarão Litopenaeus vannamei, sobre a resposta inflamatória, hemostasia e síntese de heparam sulfato antitrombótico pelas células endoteliais, além de estudar alguns aspectos relevantes a cerca de sua estrutura. O heparinóide purificado foi estruturalmente caracterizado seguindo uma abordagem analítica, envolvendo eletroforeses e cromatografias. As análises estruturais mostraram que esse composto possui um elevado conteúdo de resíduos de ácido glucurônico e de dissacarídeos dissulfatados. Ao contrário da heparina de mamíferos, o heparinóide foi incapaz de estimular a síntese de heparam sulfato pelas células endoteliais nas concentrações testadas, além de apresentar atividade anticoagulante in vitro e efeito hemorrágico reduzidos. Em um modelo de inflamação aguda, o composto isolado do camarão reduziu mais de 50% da infiltração celular. Além de reduzir a atividade de MMP-9 e proMMP-2 no lavado peritoneal dos animais submetidos ao modelo de inflamação, o heparinóide também reduziu a atividade de MMP-9 secretada por leucócitos humanos ativados. Esses resultados demonstram o potencial do heparinóide de L. vannamei em interferir em vários eventos da resposta inflamatória. Por possuir atividade anticoagulante e efeito hemorrágico reduzidos, esse composto pode servir como um modelo estrutural para direcionar o desenvolvimento de agentes terapêuticos mais específicos para o tratamento de doenças inflamatóriasTCC Resíduo da carcinicultura como fonte para obtenção de glicosaminoglicanos com potenciais biotecnológicos(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-02-14) Barreto, Arlen Cabral; Cavalcante, Rômulo dos Santos; Chavante, Suely Ferreira; http://lattes.cnpq.br/2729904948333904; http://lattes.cnpq.br/7666233529800106; Chavante, Suely Ferreira; http://lattes.cnpq.br/3440814329803472; Brito, Adriana da Silva; http://lattes.cnpq.br/0887305061762326; Palhares, Lais Cristina Gusmão Ferreira; http://lattes.cnpq.br/5860779216293603Ao longo de milhões de anos de evolução, desenvolveu-se uma extensa variedade de espécies pelo mundo e, dentre essas, as de origem marinha são constituídas por uma grande riqueza molecular. Espécies aquáticas são compostas por biomoléculas altamente diversificadas que apresentam propriedades estruturais e funcionais peculiares. Entre esses animais, o camarão pode ser fonte dessas biomoléculas a partir de um viés sustentável devido ao seu reaproveitamento residual. A carcinicultura em 2019, atingiu a marca de 4 milhões de toneladas mundialmente e, com essa grande produção, são gerados resíduos que, eventualmente, são descartados de forma inadequada no meio ambiente, tornando essencial a criação de medidas de reaproveitamento. Esses subprodutos orgânicos podem servir como fontes de moléculas como quitina, quitosana, compostos carotenóides e glicosaminoglicanos (GAGs). Nesse contexto, o atual trabalho de revisão bibliográfica busca relatar as características estruturais e as propriedades biológicas de GAGs obtidos dos resíduos da carcinicultura. Em sua maioria, os GAGs são polissacarídeos sulfatados constituídos por um resíduo de hexosamina e um ácido urônico, que estão amplamente distribuídos na superfície celular e na matriz extracelular. A partir da cabeça do camarão Litopenaeus vannamei, foram isolados e caracterizados a estrutura de quatro GAGs, um composto tipo heparina, um híbrido com características de heparina e heparam sulfato e duas populações de condroitim sulfato. De uma forma geral, os resultados retratam que esses GAGs apresentam propriedades anticoagulantes, anti-inflamatórias e antitumorais. Esses estudos permitiram reforçar a ideia de que a atividade anticoagulante de alguns compostos tipo GAGs está associada à capacidade de estabilizar a antitrombina e, consequentemente, inibir a trombina. Essa protease da coagulação desempenha um papel central como molécula intercessora da inflamação e da coagulação, bem como está associada a mecanismos frequentemente ativados na tumorigênese. As particularidades estruturais desses GAGs são notáveis e podem servir como um modelo de estudo para ampliar os conhecimentos sobre a relação estrutura e função. Possivelmente, essa diversidade estrutural seja reflexo de processos adaptativos que os camarões tenham desenvolvido a diferentes condições ambientais, o que os tornam uma fonte promissora de moléculas com potenciais biotecnológicos.