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Análise cromossômica por microarranjos aplicada à identificação de alterações genômicas em pacientes com fissura lábio palatina
(2019-11-12) Silva, Heglayne Pereira Vital da; Rezende, Adriana Augusto de; ; ; Luchessi, André Ducati; ; Ferreira, Leonardo Capistrano; ; Araújo, Juliana Forte Mazzeu de; ; Cruz, Aparecido Divino da;
Fissuras ou Fendas orofaciais (FO) não-sindrômicas consistem em malformações craniofaciais caracterizadas pela presença de espaços ou lacunas anormais no lábio superior, alvéolo e/ou palato, que podem trazer efeitos sobre a fala, audição, aparência e cognição, bem como resultados adversos de longa duração para a saúde e para a integração social. A despeito dos diversos agentes ambientais já identificados, a susceptibilidade genética é, de fato, o componente principal da etiologia das FO não-sindrômicas. No entanto, apesar de décadas de pesquisa genética e dos diferentes tipos de estudos genéticos empregados, ainda não está claro exatamente quantos genes podem controlar o risco ou como eles agem para influenciar o risco de fendas orofaciais. Estudos em larga escala do genoma inteiro utilizando tecnologias de alto rendimento como matrizes de Análise Cromossômica por Microarranjos (CMA) tem se mostrado uma importante ferramenta no estudo de doenças complexas e heterogêneas, pois possibilitam o mapeamento de largas variações estruturais de um genoma de referência incluindo deleções e duplicações, denominadas coletivamente como Copy Number Variations (CNVs). Assim, o presente estudo objetivou identificar e descrever CNVs raras em pacientes com FO não-sindrômicas, utilizando CMA, com o objetivo de explorar a implicação dos genes sobrepostos às CNVs para a etiologia genética das FO. Cinco CNVs raras foram identificadas em cinco pacientes com FO não sindrômicas: uma deleção de 220kb localizada na região 1p12, sobrepondo aos três genes GDAP2, WDR3, SPAG17; uma duplicação de 326kb na região 3p22.3, abrangendo os genes CCR4 e GLB1 e as duplicações nas regiões 4q32.3, 10p14, 15q13.3 sobrepondo aos genes SPOCK3, CELF2, CHRNA7, respectivamente. A duplicação de 440kb no cromossomo 15 envolvendo o gene receptor colinérgico, nicotínico neuronal, polipeptídeo alfa 7 (CHRNA7) foi previamente descrita em um paciente com fenótipo de FO. Todos os genes evidenciados têm participação em eventos celulares essenciais ao desenvolvimento embriológico do lábio e palato e, portanto, podem representar potenciais genes candidatos dos pacientes estudados.
Análise da estabilidade genética de células-tronco mesenquimais humanas
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2012-04-13) Cornélio, Déborah Afonso; Medeiros, Sílvia Regina Batistuzzo de; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781004Y8; ; http://lattes.cnpq.br/7690257454964600; Toledo, Silvia Regina Caminada de; ; http://lattes.cnpq.br/8408786810979968; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/6851351991421755; Costa, Marcos Romualdo; ; http://lattes.cnpq.br/6118493598074445; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278
Células mesenquimais estromais multipotentes, também conhecidas como células-tronco mesenquimais humanas (CTMH), são células multipotentes utilizadas em várias pesquisas de terapia celular, pois apresentam a capacidade de se diferenciar em múltiplas e diferentes linhagens, têm grande capacidade de autorrenovação e de expansão in vitro, excelentes propriedades imunossupressoras e são capazes de secretar moléculas bioativas que exercem efeitos tróficos. O cordão umbilical é uma fonte de CTMH cuja extração não necessita de um procedimento invasivo, além de não envolver controvérsias éticas, políticas e religiosas. Um dos problemas que envolvem linhagens de CTMH de diferentes fontes é a possibilidade de ocorrência de alterações cromossômicas e instabilidade genética, que podem aparecer durante a expansão in vitro. Além disso, as CTMH de um dos cordões apresentaram uma alteração cromossômica constitucional: inversão paracêntrica no braço curto do cromossomo 3, cariótipo: 46,XY,inv(3)(p13p25~26). Em 3p25-26, estão localizados vários genes de grande importância biológica, como genes envolvidos com o reparo de DNA e outros responsáveis pelo desenvolvimento de tumores. O titânio é um dos materiais mais utilizado para fabricação de implantes ortopédicos e dentários, e é considerado um excelente biomaterial, entretanto, as partículas derivadas de próteses acumulam-se nos tecidos periprostéticos e na medula óssea local, disseminam-se para linfonodos, fígado e baço. As implicações biológicas em longo prazo da disseminação sistêmica de partículas de metais e seus efeitos cito e genotóxicos não estão bem caracterizados. Neste trabalho investigamos a estabilidade genética de CTMH isoladas da veia do cordão umbilical durante a expansão in vitro, após a criopreservação, e em diferentes condições de cultivo, na presença e na ausência de titânio, antes e após o aparecimento de células senescentes no cultivo. As células foram isoladas, expandidas, diferenciadas em osteoblastos, adipócitos e condroblastos e analisadas com citometria de fluxo para comprovar que são células-tronco mesenquimais. As CTMH foram tratadas com diferentes doses/ tempo de exposição à micropartículas de titânio. A avaliação da estabilidade genética das CTMH foi realizada através da análise do cariótipo, de hibridação in situ por fluorescência (FISH) e da análise do micronúcleo e outras alterações nucleares (CBMN). Ficou estabelecido que as CTMH foram capazes de internalizar as micropartículas de titânio, mas as células mantém sua capacidade de proliferação, diferenciação e preservam os mesmos marcadores de membrana. Além disso, demonstrou-se que existe um aumento na instabilidade genética com o decorrer do tempo de expansão in vitro, e esta instabilidade foi maior na presença de grande concentração de micropartículas de titânio que induzem estresse oxidativo. É necessário sempre avaliar os riscos/ benefícios da utilização do titânio na terapia tecidual envolvendo CTMH, considerando a biossegurança da utilização da regeneração óssea guiada que utiliza CTMH e titânio. Mesmo não se utilizando o titânio, é importante que o uso terapêutico de tais células seja baseado em análises que garantam a qualidade, segurança e estabilidade celular, com a padronização de programas de controle de qualidade adequados. Como conclusão, sugere-se que a análise citogenética, FISH e a análise do micronúcleo e outras alterações nucleares sejam realizadas nas CTMH antes de implantar num paciente, sejam elas cultivadas por longo tempo ou não
Análise da expressão gênica na disfunção ventricular após o infarto agudo do miocárdio
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-08-04) Cruz, Marina Sampaio de Menezes; Luchessi, André Ducati; Silbiger, Vivian Nogueira; 32160245801; http://lattes.cnpq.br/6121935907512568; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; http://lattes.cnpq.br/6681979238632936; Evangelista, Karine Cavalcanti Mauricio de Sena; http://lattes.cnpq.br/2628723272728505; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Fernandes, Luciana Sacilotto; http://lattes.cnpq.br/9294434070186263; Bezerra, João Felipe; http://lattes.cnpq.br/7464620984028550
A insuficiência cardíaca (IC) é uma síndrome progressiva caracterizada pela incapacidade do coração bombear sangue suficiente para os demais tecidos, e sua principal causa é o infarto agudo do miocárdio (IAM). Apesar dos avanços na identificação de marcadores associados ao remodelamento do ventrículo esquerdo (VE), o marcador ideal para uma detecção precoce e acurada da IC isquêmica ainda não foi encontrado. Sendo assim, esse estudo tem como objetivo avaliar a expressão de 13 genes previamente associados ao IAM em pacientes com disfunção ventricular após o IAM comparando-os com aqueles que não tiveram complicações após o IAM. Além disso, esse estudo buscou listar os miRNAs mais frequentemente citados na literatura por estarem relacionados ao desenvolvimento da IC isquêmica e verificar a influencia deles na expressão dos genes estudados. Os pacientes que sofreram IAM prévio foram classificados em dois grupos: disfunção do VE [fração de ejeção do VE (FEVE) ≤ 40%, n = 14] e função do VE normal (FEVE > 40%, n = 14). A expressão de ALOX15, AREG, BCL2A1, BCL2L1, CA1, COX7B, ECHDC3, IL18R1, IRS2, KCNE1, MMP9, MYL4 e TREML4 foram avaliados por RT-PCR. Apenas a expressão de KCNE1 diminuiu no grupo FEVE ≤ 40% (p = 0,007). Foi encontrada correlação positiva entre KCNE1 e fração de ejeção (r = 0,557; p = 0,001). Houve um risco de 12,25 vezes (IC 95%: 1,33 - 113,06; p = 0,027) de disfunção do VE para pacientes com menor expressão de KCNE1. A expressão de KCNE1 mostrou alto AUROC (AUROC: 0,811, IC 95%: 0,642-0,979, p = 0,007), indicando a expressão de KCNE1 como um bom preditor em desfechos cardíacos. Análise da literatura mostrou que os miRNAs mais associados com o desenvolvimento da IC isquêmica são miR-499, miR-1, miR-133a, e miR-208b, sendo o miR-1 já descrito como regulador da expressão do KCNE1, de acordo com banco de dados público miRNet. Dessa forma, este estudo sugere que a expressão de KCNE1, bem como seus mecanismo regulatórios como o miR-1, podem estar relacionados com os níveis de FEVE e, portanto, com o risco de desenvolvimento da IC pós-IAM.
Análise de variantes genéticas população-específica associadas ao risco de covid-19
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-08-14) Nascimento, Daniel Jerônimo do; Ferreira, Leonardo Capistrano; https://orcid.org/0000-0001-9268-4881; http://lattes.cnpq.br/2739353650933389; https://lattes.cnpq.br/5912736104176143; Gomes, Carlos Eduardo Maia; http://lattes.cnpq.br/8235024740448274; Luchessi, André Ducati; https://orcid.org/0000-0002-2758-8102; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278
Este estudo investiga a complexidade e a diversidade de variantes genéticas e genes associados à COVID-19, utilizando dados do pangenoma humano e estudos de associações genômicas amplas (GWAS), e tem como objetivo identificar a distribuição de variantes genéticas entre diferentes populações e fenótipos: casos severos, hospitalizados e COVID-19 positivo. A metodologia baseia-se no uso de dados de GWAS das populações americanas, africanas e do leste asiático, e destaca a profundidade e escopo do pangenoma na caracterização da diversidade genética entre as populações estudadas. Os resultados mostram a importância de variantes genéticas população-específicas envolvidas na susceptibilidade, gravidade e resposta à COVID-19, como as associadas a locus já anteriormente identificados em diversos estudos além de genes potencialmente envolvidos em processos imunológicos que afetam a resposta à doença. Variantes encontradas neste estudo, sugerem a necessidade de abordagens diversificadas para o entendimento da genética da COVID-19, indicando diferenças significativas na suscetibilidade e na resposta à infecção entre diferentes populações. As limitações deste estudo, inclui a predominância de softwares desenvolvidos para GWAS, apontando a necessidade de novas ferramentas bioinformáticas para a análise de dados pangenômicos, dados insuficientes para algumas populações e limitações na submissão de dados em ferramentas web. Por fim, este estudo destaca a importância de uma abordagem genômica ampla e diversa para entender a complexidade genética da COVID-19, contribuindo para a medicina personalizada e para estratégias de saúde pública mais eficazes.
Análise dos polimorfismos Arg194Trp e Arg399Gln no gene de reparo de DNA XRCC1 em pacientes com meningite bacteriana
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2012-09-28) Pinheiro, Daniele Maria Lopes; Lima, Lucymara Fassarella Agnez; ; http://lattes.cnpq.br/1083882171718362; ; http://lattes.cnpq.br/5225954788648294; Rabenhorst, Silvia Helena Barem; ; http://lattes.cnpq.br/3868264006150535; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278
A meningite é uma doença infecto-contagiosa, na qual foi visto que características genéticas estão envolvidas na susceptibilidade à doença e na resposta inflamatória e isso pode ser determinado por polimorfismos de um único nucleotídeo (SNPs). As espécies reativas de oxigênio (ERO) participam do rompimento da barreira hematoencefálica (BHE), contribuindo dessa maneira para a entrada do patógeno no sistema nervoso central (SNC), na qual induz uma resposta inflamatória, a qual tem sido associada à morte neuronal e surgimento de sequelas nos pacientes que sobrevivem à doença. A via de reparo por excisão de bases (BER) é a principal via envolvida na correção de danos oxidados no DNA em neurônios e tem sido implicada na resposta a meningite bacteriana (MB). Neste trabalho foram avaliados dois SNPs não sinônimos do gene de reparo XRCC1 Arg194Trp (rs 1799782) e Arg399Gln (rs 25487) em pacientes com MB e pacientes não infectados (Controle). Os genótipos dos pacientes foram investigados pela PCR-RFLP. Os danos no DNA genômico foram detectados pelo tratamento com a glicosilase formamidopirimidina (FPG). As imunoglobulinas IgG e IgA foram analisadas através do plasma e as quimio/citocinas foram quantificadas em amostras do líquido cefalorraquidiano. Não foi encontrada nenhuma relação com a doença para o polimorfismo em XRCC1 Arg194Trp, no entanto para o polimorfismo XRCC1 Arg399Gln, foi observado um aumento na frequência do alelo variante no grupo controle em relação ao grupo de pacientes com MB (P = 0,008; OR=0,45). Não foi observada nenhuma alteração nos níveis de quimio/citocinas e imunoglobulinas, como também dos danos ao DNA dos pacientes com o alelo variante em relação aos pacientes com o alelo selvagem para o SNP XRCC1 Arg399Gln. Em conclusão, foi visto que apenas o SNP em XRCC1 Arg399Gln pode apresentar um possível efeito protetor em relação à doença.
Análise in silico para predição da interação RNam-miRNas relacionados ao transtorno bipolar
(2019-03-28) Pinheiro, Marília Gabriella de Oliveira; Luchessi, André Ducati; ; ; Nunes, Emerson Arcoverde; ; Bortolin, Raul Hernandes;
O transtorno bipolar (TB) é uma doença psiquiátrica conhecida por suas altas taxas de morbidade influenciadas por um diagnóstico clínico tardio e impreciso. Neste contexto, biomoléculas como miRNAs e RNAm têm sido estudados para elucidar a patogênese de muitas doenças, levando ao desenvolvimento de técnicas para obter um diagnóstico precoce ou garantir um tratamento individualizado. Este estudo utilizou análise integrativa in silico de dados de expressão de miRNAs e RNAm diferencialmente regulados em amostras de sangue total de pacientes com TB, com o objetivo de elucidar possíveis interações destas biomoleculas no TB. Portanto, interações de miRNA-RNAm em TB foram investigadas por meio de ferramentas de bioinformática usando dados de microarray e revisão bibliográfica. Foi feita uma lista de 81 RNAm diferencialmente expressos em pacientes com TB quando comparados a controles de dois conjuntos de dados disponíveis (GSE46416 e GSE23848) e miRNAs. Estes dados foram utilizados no programa de análise Ingenuity Pathways Analysis 6 (IPA). Concluída a análise in silico foi feita a casuística clínica, composta por dois grupos: um de pacientes com TB (n=30) e outro de voluntários controles (n=30). Houve a análise dos dados gerais e clínicos dos voluntários da pesquisa, além da análise dos prontuários dos pacientes com TB. Os resultados in silico mostraram 34 predições de interação entre miRNA-RNAm, quando foram realizadas análises de miRNA-RNAm diretamente envolvidas no TB, 9 miRNAs e 28 RNAm foram interconectados, em destaque a ligação encontrada para o TB foram mi140-3p com o gene COX6C, e destes com o COX7B. Os três estão relacionados com a mitocôndria, organela que em estudos sugerem que pode ser prejudicada no TB. Quanto a etapa clínica foram encontradas diferenças significativas na obesidade, dislipidemia e histórico familiar de transtornos mentais, em pacientes com TB quando comparados com controles. Em conclusão, esses resultados direcionam os futuros estudos experimentais para alguns miRNAs e RNAm que podem estar envolvidos direta ou indiretamente na fisiopatologia do TB e poderiam ser potenciais biomarcadores circulantes para serem usados na detecção precoce do TB.
Aptidão cardiorrespiratória, composição corporal e parâmetros bioquímicos em gêmeos monozigotos e dizigotos
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-10-16) Borges, Michelle Vasconcelos de Oliveira; Dantas, Paulo Moreira Silva; ; http://lattes.cnpq.br/0392766010188739; ; http://lattes.cnpq.br/5402923122245427; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; Cavalcanti Júnior, Geraldo Barroso; ; http://lattes.cnpq.br/0091662650633339; Nunes, Rodolfo de Alkmim Moreira; ; http://lattes.cnpq.br/5512484703392566; Oliveira, Vinícius Cunha de; ; http://lattes.cnpq.br/3112253098487245
Introdução: A relação do ponto ótimo cardiorrespiratório com medidas de composição corporal e variáveis bioquímicas é desconhecida, bem como a influência de fatores genéticos e ambientais sobre esta variável. Além disso, são raras as pesquisas que utilizam gêmeos discordantes para o exercício físico. Objetivo: Avaliar a aptidão cardiorrespiratória, composição corporal e parâmetros bioquímicos em irmãos gêmeos concordantes e discordantes para o exercício físico. Métodos: Estudo transversal com gêmeos adultos. A amostra consistiu em 102 indivíduos, 72,5% do sexo feminino e 27,5% do sexo masculino com idade média 25,4 ± 5,69. A coleta de dados foi realizada entre os anos de 2016 e 2018. No dia 1, os indivíduos foram submetidos a uma avaliação de aptidão física, incluindo medidas de antropometria, composição corporal por Absorciometria de feixe duplo de raios X, e teste de esforço cardiorrespiratório. No dia 2, amostras de sangue periférico foram coletadas para determinar o perfil lipídico e a glicemia de jejum. Utilizou-se a correlação de Spearman para a verificação da herdabilidade e para relacionar as variáveis com o ponto ótimo cardiorrespiratório. Os gêmeos monozigotos foram separados em três grupos: Gêmeos concordantes ativos, Gêmeos concordantes inativos e pares discordantes para o exercício físico. Aplicou-se o teste ANOVA (p<0,001) para análise entre os grupos e o teste Wilcoxon (p<0,05) para uma análise intrapar. Resultados: Não foram observadas associações entre o ponto ótimo cardiorrespiratório e as variáveis de composição corporal. As variáveis bioquímicas lipoproteínas de alta densidade, lipoproteínas de baixa densidade, glicemia de jejum, e triglicerídeos apresentaram correlação fraca, mas significativa. Foram observadas diferenças na composição corporal e variáveis cardiorrespiratórias entre os pares de gêmeos discordantes e entre os grupos concordantes. Conclusão: O Ponto Ótimo Cardiorrespiratório e as variáveis bioquímicas demonstraram maior tendência a serem influenciados por fatores ambientais. Já a composição corporal demonstrou maior influência da herdabilidade e não se correlacionou com o ponto ótimo cardiorrespiratório. Além disso, os gêmeos ativos tiveram melhores valores de composição corporal, VO2máx e do segundo limiar ventilatório, quando comparados aos gêmeos sedentários, no entando não foi possível observar diferenças no perfil lipídico ou na glicemia de jejum nos gêmeos monozigotos discordantes para o exercício físico.
Associação dos polimorfismos gênicos para interleucina 17 (IL-17) e Foxp3 em mucosa gengival e vaginal de mulheres adultas
(2015-06-12) Gomes, José Giovani Nobre; Rego, Delane Maria; ; http://lattes.cnpq.br/5517143911175495; ; http://lattes.cnpq.br/3872552451523411; ; http://lattes.cnpq.br/5446698015405038; Oliveira, Ana Katherine da Silveira Goncalves de; ; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; Freitas, Janaina Cristiana de Oliveira Crispim; ; http://lattes.cnpq.br/2644540835478572; Lucena, Eudes Euler de Souza; ; http://lattes.cnpq.br/6969519171915250; Fernandes, Thales Allyrio Araújo de Medeiros; ; http://lattes.cnpq.br/5229478510326510
Introdução: As membranas mucosas são responsáveis para a interface com o mundo exterior, respondendo especificamente às ameaças externas dos agentes patogénicos. Tomados em conjunto, a flora normal exerce efeitos profundos no sistema imune das mucosas, e provavelmente desempenha um papel importante na fisiologia e patologia humana. Recentemente identificou-se que o papel de duas subpopulações de células T auxiliares [Treg; forkhead caixa P3 positivo (Foxp3)] e células Th17 [interleucina-17-positivo (IL-17)] mantém forte relação com a doença periodontal (DP), mas a sua relação com gengivite, assim como com outras patologias de mucosas precisa ser esclarecida. Objetivo: O objetivo deste estudo foi o de identificar variantes polimórficas na região promotora do gene de Foxp3 e IL-17A e sua possível correlação com a gravidade da gengivite, assim como, a associar flora microbiana e ecossistema vaginal e o papel das variantes polimórficas na região promotora do gene Foxp3 e IL-17A em citologia cervical (papanicolau), além da associação com grau de esfregaços inflamatórios, dados clínicos e laboratoriais da população do nordeste do Brasil. Métodos: Estudo analítico e transversal com a pesquisa clínica, realizada através dos dados clínicos e laboratoriais de condições gengivais e cervicais de um grupo de mulheres adultas. OS parâmetros periodontais clínicos avaliados foram: índice de placa (IP), índice gengival (IG) e Periodontal Screening e gravação (PSR). Com base nos valores Índice Gengival (IG), os indivíduos foram classificados de acordo com a gravidade da inflamação gengival. Citopatológico de colo uterino foram realizados e determinou-se a correlação entre o relatório citológico usando o sistema de Bethesda. Esfregaços inflamatórios tiveram suas intensidades classificadas como leve, moderada e grave. Os polimorfismos de Foxp3 e IL-17 genes foram analisados pelo método de restrição do fragmento Lenght Polymorphism (RFLP). As amostras de DNA foram obtidas a partir de sangue periférico. Os dados foram organizados em um banco de dados no programa estatístico SPSS ® e submetidos a testes estatísticos. Para avaliar o grau de associação entre gengivite e aspectos qualitativos foi avaliada pela aplicação do teste Qui-quadrado. Teste de Fisher e Odds Ratio (OR) foi calculado com intervalo de confiança de 95% (IC 95%). A análise do grau de associação do nível de inflamação do colo do útero com variáveis qualitativas foi utilizado o teste qui-quadrado. Para análises quantitativas foram aplicados Kruscal-Wallis e teste de Jonckheere-Terpstra. Foi utilizado o teste t de Student para comparar as médias de GI entre os grupos, assim como o One-way ANOVA para comparar as médias entre mais de dois grupos. O equilíbrio de Hardy-Weinberg foi avaliada pelo teste do qui-quadrado Goodness-of-Fit. Resultado: O estudo confirma a alta prevalência de gengivite, com 74 (52,9%) com gengivite leve e 67 (47,1%) com gengivite moderada. Houve associação entre o grau de gengivite leve, com mais jovens do que 38 anos (OR = 2,618), escovando freqüência (p = 0,012), e triagem periodontal e gravação (PSR) categorização de acordo com a classe (p <0,0001), com diferenças significativas em a idade (p = 0,028), soma dos valores obtidos PSR examinou a seis locais (p <0,0001) analisado o número de dentes (p = 0,027) e PI (p <0,001); Os esfregaços foram negativos para lesão intraepitelial escamosa ou malignidade (NILM) em todas as examinadas. Com base teste de Papanicolau, as amostras apresentaram microbiota vaginal com lactobacilos em 40 pacientes (23%) e com outros patógenos microbianos em 131 pacientes (77%). Os Polimorfismo IL-17A e Foxp3 foram investigados após genotipagem e cálculo do Equilíbrio de Hardy-Weinberg (HWE) em ambos os SNPs. FoxP3 e IL-17 de acordo com HWE nos pacientes estudados. Não houve associação com os polimorfismos Foxp3 entre pacientes e controles, bem como entre a microbiota vaginal na análise de relação em grupos. No entanto, o polimorfismo IL-17, na análise de associação de pacientes e controles, houve associação (p = 0,02), com predominância do alelo G em pacientes, bem como a distribuição de genótipos foi associado entre GA frente GG (p = 0,04) em comparação com GG e GA + GG (p = 0,02), com predomínio do genótipo GG em pacientes. No grupo de pacientes, a análise de associação mostrou predominância do alelo G em pacientes com micróbios patogênica em detrimento das pessoas com microbiota normal (Lactobacillus) (p = 0,04). Não houve diferenças significativas entre os grupos com diferentes graus de gengivite encontrados através da comparação das distribuições de genótipos e alelos de rs3761549 e rs2275913. Além disso, há diferenças significativas entre os rs3761549 e rs2275913 polimorfismo e os parâmetros clínicos de GI e PI encontrados. Para os IL-17 e FOXP3 polimorfismos, nenhuma associação foi encontrada no GI e nas distribuições de genótipos ou alelos diferentes. Conclusão: As influências mais fortes sobre o grau de inflamação gengival foram a quantidade de biofilme, a freqüência de escovação, e idade. Além disso, os escores PSR foram bons indicadores para avaliar os resultados. Nenhuma evidência foi encontrada em relação à doença periodontal com parâmetros sistêmicos investigados. Os polimorfismos do FOXP3 não mostraram diferenças entre os grupos em relação à composição do ecossistema vaginal. Por sua vez, o polimorfismo de IL-17 mostrou uma associação entre os pacientes em comparação com os controles, bem como entre os grupos de pacientes. O papel da IL-17 e seu polimorfismo no ecossistema vaginal ainda necessita ser investigado, mas este estudo mostra que o polimorfismo IL-17A, especialmente o alelo G e GG genótipo foi associado com piores condições de saúde relacionamento ecossistema vaginal. Os polimorfismos de FOXP3 e IL17 não apresentaram diferenças no diagnóstico da inflamação gengival ou susceptibilidade e prognóstico na patogênese. Mais estudos são necessários para caracterizar estes gens mais precisamente e entendê-los em mais detalhes, revelando o seu papel na fisiopatologia da gengivite e outras alterações de mucosas.
Association of insertion-deletions polymorphisms with colorectal cancer risk and clinical features
(World Journal Of Gastroenterology, 2017-10-07) Correa, Romualdo da Silva; Marques, Diego; Costa, Layse Raynara Ferreira; Costa, Lorenna Larissa Ferreira; Borges, Aline Maciel Pinheiro; Ito, Fernanda Ribeiro; Ramos, Carlos Cesar de Oliveira; Bortolin, Raul Hernandes; Luchessi, André Ducati; Santos, Ândrea Ribeiro dos; Santos, Sidney; Silbiger, Vivian Nogueira
AIM To investigate the association between 16 insertion-deletions (INDEL) polymorphisms, colorectal cancer (CRC) risk and clinical features in an admixed population. Methodos: One hundred and forty patients with CRC and 140 cancer-free subjects were examined. Genomic DNA was extracted from peripheral blood samples. Polymorphisms and genomic ancestry distribution were assayed by Multiplex-PCR reaction, separated by capillary electrophoresis on the ABI 3130 Genetic Analyzer instrument and analyzed on GeneMapper ID v3.2. Clinicopathological data were obtained by consulting the patients’ clinical charts, intra-operative documentation, and pathology scoring. Rerults: Logistic regression analysis showed that polymorphism variations in IL4 gene was associated with increased CRC risk, while TYMS and UCP2 genes were associated with decreased risk. Reference to anatomical localization of tumor Del allele of NFKB1 and CASP8 were associated with more colon related incidents than rectosigmoid. In relation to the INDEL association with tumor node metastasis (TNM) stage risk, the Ins alleles of ACE, HLAG and TP53 (6 bp INDEL) were associated with higher TNM stage. Furthermore, regarding INDEL association with relapse risk, the Ins alleles of ACE, HLAG, and UGT1A1 were associated with early relapse risk, as well as the Del allele of TYMS. Regarding INDEL association with death risk before 10 years, the Ins allele of SGSM3 and UGT1A1 were associated with death risk. Conclusion: The INDEL variations in ACE, UCP2, TYMS, IL4, NFKB1, CASP8, TP53, HLAG, UGT1A1, and SGSM3 were associated with CRC risk and clinical features in an admixed population. These data suggest that this cancer panel might be useful as a complementary tool for better clinical management, and more studies need to be conducted to confirm these findings.
Association of serum alpha-tocopherol and retinol with the extent of coronary lesions in coronary artery disease
(Journal of Nutrition and Metabolism, 2018-12-11) Ribeiro, Karla Danielly da Silva; Miranda, Carolinne Thaísa de Oliveira Fernandes; Duarte, Victor Hugo Rezende; Cruz, Marina Sampaio de Menezes; Duarte, Mychelle Kytchia Rodrigues Nunes; Araújo, Jéssica Nayara Góes de; Santos, Ayda Maria Quirino Silva dos; Oliveira, Juliana Marinho de; Paiva, Maria Sanali Moura Oliveira; Rezende, Adriana Augusto; Hirata, Mario Hiroyuki; Hirata, Rosario Dominguez Crespo; Luchessi, André Ducati; Silbiger, Vivian Nogueira; https://orcid.org/0000-0001-7708-4271; https://orcid.org/0000-0003-3073-5967; https://orcid.org/0000-0002-9252-0278; https://orcid.org/0000-0002-2251-5967; https://orcid.org/0000-0002-3122-9073; https://orcid.org/0000-0002-2276-690X; https://orcid.org/0000-0003-2452-4047; https://orcid.org/0000-0002-9521-7979; https://orcid.org/0000-0002-2758-8102
Background and aims: Fat-soluble vitamins play an important role in the pathogenesis of cardiovascular disease and progression ofatherosclerosis. +is study aimed at investigating the relationship of the serum levels of alpha-tocopherol and retinol with theextent of coronary lesions in patients with coronary artery disease. Methods. Patients with coronary artery disease (n = 177) aged 30 – 74 years, who underwent their ﬁrst coronary angiography, were enrolled. The extent of coronary lesions was assessed using th eFriesinger index (FI). Accordingly, patients were grouped as follows: FI = 0–4 (n = 90), FI = 5–9 (n = 50), and FI = 10–15 (n = 37).Serum levels of vitamins were determined via high-performance liquid chromatography and serum biochemical analysis. Results.Assessment of FI-based groups revealed that 50.8% patients had a coronary artery lesion to a low extent (FI 0–4). Individuals inthis group were younger and had lower glucose and serum alpha-tocopherol levels than the other groups (p < 0.05). Low levels of alpha-tocopherol were more frequent in the FI 0–4 group than that in the other groups (p = 0.03). No diﬀerence was observedbetween the mean serum retinol levels among the FI-based groups (n = 0.492), and the low frequency of retinol was consistentamong the FI groups (n = 0.348). Conclusions. The low level of alpha-tocopherol together with the presence of dyslipidemia isprobably associated with the initial events in atherosclerosis. Increased alpha-tocopherol levels in patients with more extensivecoronary artery lesions may have resulted from altered vitamin E metabolism with increased oxidative stress.
Avaliação da atividade citotóxica e pró-apoptótica de Croton blanchetianus baill. em linhagens de câncer cervical humano
(2016-07-27) Carvalho, Kleyton Thiago Costa de; Freitas, Janaina Cristiana de Oliveira Crispim; ; http://lattes.cnpq.br/2644540835478572; ; http://lattes.cnpq.br/3970007029924837; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; Donadi, Eduardo Antônio; ; http://lattes.cnpq.br/8778713382135771
Câncer cervical (CC) é o terceiro tipo de câncer mais comum em mulheres no mundo todo e a quarta principal causa de morte em mulheres nos países em desenvolvimento. Os Papilomavírus humano (HPV) de alto risco tais como HPV 16, 18, 31 e 33 são o principal fator de risco para esse tipo de câncer. Entre estes, o HPV-16 e -18 são responsáveis por quase 70% dos casos de CC. Quimioterapia com compostos à base de platina em combinação com a radioterapia ou a cirurgia é o tratamento de escolha para CC, mas sua eficácia é limitada, especialmente em estágios avançados da doença. Além disso, estes tratamentos podem facilmente levar a reações adversas e resistência às drogas. Assim, a busca por novos agentes antitumorais seletivos e de alta eficácia para o tratamento deste tipo de tumor é necessária. Croton blanchetianus (CB), popularmente conhecida como “marmeleiro preto”, é um arbusto pertencente à família Euphorbiaceae e amplamente disseminado no nordeste brasileiro. Alguns estudos têm demonstrado a atividade citotóxica de plantas do gênero Croton em linhagens tumorais humanas. Contudo, até o momento, não há nada descrito na literatura quanto ao efeito citotóxico da espécie Croton blanchetianus. Assim, o presente trabalho teve como objetivo investigar, in vitro, os efeitos de frações obtidas das folhas e raiz de CB nas linhagens de câncer cervical humano HeLa e SiHa. As frações foram obtidas pelo método de variação do pH, a partir do qual foram obtidas duas frações ácidas, uma das folhas (CBaF) e outra da raiz (CBaR), e duas básicas, também das folhas (CBbF) e raiz (CBbR). O perfil fitoquímico das frações foi avaliado por Cromatografia em camada delgada (CCD). A atividade citotóxica e a avaliação do tipo de morte celular foram determinados pelos ensaios de MTT e Anexina V/PI, respectivamente, enquanto que para avaliação de alterações morfológicas nucleares e ensaio do ciclo celular foram utilizados, respectivamente, microscopia de fluorescência com o corante DAPI e citometria de fluxo. De acordo com os resultados, a maioria das frações apresentou terpenos, alcaloides e flavonoides. Além disso, todas as frações testadas foram capazes de diminuir significativamente a viabilidade celular de HeLa e SiHa de maneira concentração e tempo dependentes, promoveram modificações morfológicas celulares e nucleares, além de induzirem apoptose e parada do ciclo celular. Este é o primeiro estudo que demonstrou os efeitos citotóxicos e pró-apoptóticos de CB em linhagens de câncer cervical humano. Portanto, CB parece ser uma fonte natural promissora para o desenvolvimento de agentes para o tratamento do CC. No entanto, mais estudos são necessários para isolar, purificar e elucidar os possíveis mecanismos de ação dos compostos ativos.
Avaliação da suplementação com vitamina D na expressão gênica e aptidão física em gêmeos saudáveis
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-12-11) Pires, Jeane Franco; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; ; http://lattes.cnpq.br/6188695140509637; Dantas, Paulo Moreira Silva; ; http://lattes.cnpq.br/0392766010188739; Evangelista, Karine Cavalcanti Mauricio de Sena; ; http://lattes.cnpq.br/2628723272728505; Gonçalves, Maria da Conceição Rodrigues; ; http://lattes.cnpq.br/0107894093263204; Bortolin, Raul Hernandes; ; http://lattes.cnpq.br/4523552279957454
A presença do receptor de vitamina D em várias células e tecidos humanos relacionando a vitamina D com diversos processos fisiológicos não esqueléticos vem gerando interesse em pesquisas que ajudem a entender melhor esta relação. Além disso, a suplementação profilática com este nutriente vem crescendo a cada dia, em todas as faixas etárias. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da suplementação com colecalciferol sobre a expressão gênica do VDR, TNFa e PPARa, composição corporal, aptidão cardiorespiratória e força muscular em gêmeos adultos saudáveis. Foi um estudo realizado em gêmeos monozigóticos adultos, do tipo ensaio clínico de intervenção, longitudinal, randomizado dividido em dois grupos: grupo controle (sem tratamento) e grupo suplementado (com suplementação individual diária de 2000 UI/dia de vitamina D3 durante 60 dias). Foram realizadas analises bioquímicas, análises de composição corporal por meio da Absorciometria de feixe duplo, análise da aptidão cardiorrespiratória em Ergoespirômetro Cortex, avaliação da força muscular pelo teste de preensão manual e força escapular e realizado a expressão gênica por PCR em tempo real. A análise estatística foi realizada no software estatístico IBM SPSS versão 20.0 para Windows. Nossos resultados mostraram que houve um aumento significativo dos níveis séricos de vitamina D no grupo suplementado em comparação aqueles que não usaram o suplemento (65% de aumento), assim como a expressão do gene VDR (p = 0,001). Observamos melhorias nos parâmetros da aptidão física, com redução de gordura corporal e aumento do VO2máx após a suplementação. Assim, concluímos que o aumento dos níveis séricos de vitamina D acima de 30 ng/mL podem trazer benefícios à saúde da população.
Avaliação da toxicidade subcrônica e reprodutiva do extrato seco de pericarpo de passiflora edulis variedade flavicarpa degener em ratos
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2015-07-20) Arruda, Andréa Caroline Costa de; Schwarz, Aline; Langassner, Silvana Maria Zucolotto; ; http://lattes.cnpq.br/7390416147619446; ; http://lattes.cnpq.br/2401319567715548; ; http://lattes.cnpq.br/2930523989643205; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; Carvalho, Virginia Martins; ; http://lattes.cnpq.br/3629850103370810
O pericarpo de Passiflora edulis var. flavicarpa Degener atualmente está sendo investigado para fins medicinais. Não há relatos na literatura sobre sua toxicidade. O objetivo do presente estudo foi investigar a toxicidade sub-crônica em ratos machos e toxicidade em ratas fêmeas prenhes e fetos expostos durante a gestação a um extrato obtido por infusão do pericarpo em água (1:3 m/v; 100o C, 10 min). A composição do extrato foi avaliada por meio de reações químicas e também por cromatografia de camada delgada. Ratos machos adultos (n=8) foram tratados com 300 mg/kg de extrato, por gavagem, durante 30 dias e ratas prenhes (n=7) do dia 0 ao dia 20 de gestação. Os grupos controle de ratos machos (n=8) e ratas fêmeas (n=7) receberam água potável (1 ml). Durante o tratamento foram registrados o consumo de água e de ração e o peso corporal. No dia 29 o comportamento sexual dos machos foi analisado e, em seguida, metade dos machos de cada grupo receberam ciclofosfamida (50 mg/kg, i.p.) para avaliação (anti) genotóxica na medula óssea e a outra metade recebeu apenas solução salina 0,9% (1 mL, i.p.). No dia 30, os machos foram anestesiados para coleta de sangue, medula óssea e órgãos. No dia 20 de gestação, as ratas prenhes foram anestesiadas para avaliação do desempenho reprodutivo. A análise dos fetos foi realizada por exame visceral e esquelético. A análise fitoquímica revelou a presença de flavonóides, alcalóides inespecíficos, compostos fenólicos e triterpênicos. A análise estatística revelou ausência de diferenças em todos os parâmetros analisados para machos, para fêmeas e para fetos experimentais em relação aos animais controle. A citotoxicidade foi avaliada pela relação entre eritrócitos policromáticos e normocromáticos (EPC/ENC). A análise estatística (média ± erro do desvio padrão) revelou ausência de alterações na frequência de EPCMN (controle negativo: 3,26±0,42; controle positivo: 11,72±1,02; experimental negativo: 4,02±0,13; experimental positivo: 10,47±0,87) ou citotoxicidade (controle negativo: 0,37±0,08; controle positivo: 0,23±0,05; experimental negativo: 0,37±0,07; experimental positivo: 0,23±0,02). Este estudo sugere que o extrato aquoso obtido de pericarpo de P. edulis var. flavicarpa Degener não foi capaz de promover efeitos tóxicos em ratos nas condições utilizadas.
Avaliação do HLA-G solúvel e do perfil de citocinas como potenciais biomarcadores plasmáticos do carcinoma papilífero da tireoide
(2018-04-05) Araújo, Jéssica Nayara Góes de; Silbiger, Vivian Nogueira; Luchessi, André Ducati; ; ; ; Rezende, Adriana Augusto de; ; Wastowski, Isabela Jubé; ; Genre, Julieta;
O carcinoma papilífero de tireoide (CPT) é o tumor maligno mais frequente da tireoide. Limitações no diagnóstico e determinação de prognóstico ainda representam um grande desafio para o manejo clínico do CPT, logo a busca por novos biomarcadores para o diagnóstico minimamente invasivo torna-se crucial. Considerando a reconhecida associação entre o CPT e a inflamação crônica, o objetivo do presente estudo foi investigar a concentração plasmática de citocinas e HLA-G solúvel como potenciais biomarcadores de diagnóstico e/ou prognóstico do CPT. Este estudo avaliou pacientes com CPT antes (n = 85) e após a realização da tireoidectomia (n = 77), e controles (n = 80). Os níveis plasmáticos de 13 citocinas foram mensurados por citometria de fluxo, e HLA-G solúvel foi mensurado por ELISA. Os dados foram avaliados por meio de análises univariada e multivariada, e curvas ROC. Os níveis de IL-4, IL-10, TNF, IFN-α e TGF-β1 estavam aumentados no póstireoidectomia comparado ao pré-tireoidectomia. Comparado aos controles: i) os níveis de sHLA-G diminuíram pós-tireoidectomia, ii) os níveis de IL-6 aumentaram, enquanto os níveis de IL-1β, IFN-α e TGF-β1 diminuíram no pré-tireoidectomia, iii) Os níveis de IL-5 e IL-6 estavam aumentados, enquanto IFN-α e o TGF-β1 estavam diminuídos no pós-tireoidectomia. IFN-α e TGF-β1 foram capazes de discriminar de forma independente os pacientes com CPT de controles, e IFN-α apresentou a melhor performance diagnóstica (AUC: 0,94). Aumento de IL-1β e diminuição de IL-12p70 no plasma estava associado independentemente com tumores maiores (> 2,0 cm), enquanto a diminuição dos níveis de sHLA-G estava associada à presença de invasão. Pacientes com resposta bioquímica/estrutural incompleta apresentaram níveis mais altos de IL-5 e IFN-α em comparação aos pacientes de resposta excelente/indeterminada. Em conclusão, observou-se um perfil diferenciado de citocinas nos plasmas pré- e pós-tireoidectomia, e o níveis de IFN-α e o TGF-β1 mostraram-se bons candidatos a biomarcadores pré-cirúrgicos do CPT. Citocinas estavam associadas com fatores de pior prognóstico (IL-1β e IL-12p70) e de resposta insatisfatória ao tratamento (IFN-α e IL-5). No entanto, mais estudos são necessários para confirmar a relevância clínica dessas moléculas para o CPT.
Avaliação dos polimorfismos e expressão do RNAm do TREML4 em leucócitos de pacientes com doença arterial
(2017-04-26) Duarte, Victor Hugo Rezende; Silbiger, Vivian Nogueira; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; ; http://lattes.cnpq.br/6121935907512568; ; http://lattes.cnpq.br/5892971598537293; Lajus, Tirzah Braz Petta; ; http://lattes.cnpq.br/9979644969955564; Caland, Lilia Basilio de; ; http://lattes.cnpq.br/4055624426698955
As proteínas da família triggering receptor expressed on myeloid cells (TREM) são associados com o risco e progressão da aterosclerose. Em resultados prévios observamos que a alta expressão do TREML4está relacionada com fase inicial da Síndrome Coronariana Aguda (SCA).Neste estudo, investigamos a relação dos polimorfismos e a expressão do RNAm do TREML4 em leucócitos de pacientes estratificados de acordo com a extensão das lesões das atrérias coronárias. Foram incluídos pacientes com doença arterial coronariana (DAC) (n=151), com idades entre 30 e 74 anos, submetidos à angiografia coronária eletiva. A extensão da lesão coronariana foi avaliada através do índice de Friesinger. Os polimorfismosrs2803495 (A> G), rs2803496 (T> C) e aexpressão do RNAm do TREML4 em leucócitos foram analisadas por qRT-PCR. A expressão de TREML4 foi maior em pacientes com lesões coronarianas graves em relação aos sem lesão, baixas e intermediárias, (p <0.05). Indivíduos portadores do alelo G do rs2803495 (genótipos AG / GG) e do alelo C do rs2803496(genótipos TC / CC) apresentaram uma expressão de RNAm de TREML4 positiva (Alelo G: OR = 2.4, 95% CI 1.0-5.7, p < 0.05; e Alelo C: OR = 7.8, 95% CI = 2.9-20.9, p < 0.01, respectivamente).Entretanto, os polimorfismos do TREML4 não foram associados com as extensões das lesões coronárias. Em conclusão, a expressão aumentada de mRNA de TREML4 nos leucócitos é influenciada por polimorfismos e está associada a lesões mais graves das artérias coronárias, sugerindo seu papel como potencial biomarcador para investigar a extensão da lesão coronariana em pacientes com DAC.
Biomarcadores moleculares na cardiomiopatia diabética: uma abordagem in silico, in vivo e in vitro
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-09-29) Lopes, Mariana Borges; Luchessi, André Ducati; Bortolin, Raul Hernandes; ; http://lattes.cnpq.br/4523552279957454; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; ; http://lattes.cnpq.br/7272064734644521; Rodrigues, Alice Cristina; ; http://lattes.cnpq.br/6683814406203359; Maureira, Álvaro Danilo Cerda; ; http://lattes.cnpq.br/0268793562726403; Silva, Marcelo de Sousa da; ; http://lattes.cnpq.br/1295430560645312; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; ; http://lattes.cnpq.br/2929963416385218
A hiperglicemia causada pelo Diabetes mellitus (DM), acarreta alterações moleculares na expressão de RNAm, miRNAs e citocinas inflamatórias, que estão relacionadas ao aparecimento de alterações estruturais e funcionais características da CMD. O presente estudo buscou, através de análise in silico, RNAms e miRNAs envolvidos na CMD e validar, in vivo e in vitro, a via de regulação do rno-miR-214-3p e seu possível RNAmalvo, a fosfolipase A2 do grupo IIA (Pla2g2a) em condições de hiperglicemia. Assim, bancos de dados de microarray do Gene Expression Omnibus (GSE4745 e GSE44179) e ferramentas como Ingenuity Pathway Analysis e TargetScan 7.1 foram usados para buscar possíveis interações miRNA-RNAm relacionadas à CMD. In silico, foi observado que a expressão de Pla2g2a estava aumentada e de seu possível miRNA regulatório rno-miR214-3p diminuída no ventrículo esquerdo (VE) de ratos diabéticos. Através de abordagens in vivo e in vitro utilizando amostras de VE de ratos Wistar com diabetes induzido por estreptozotocina (40 mg/kg, i.v.) e cultura de células H9c2 em condições normoglicêmicas (NG, 5,5 mmol/L de glicose), hiperglicêmicas (25 mmol/L de glicose) e transfectadas com rno-miR-214-3p mimético em meio hiperglicêmico buscamos validar esses resultados encontrados utilizando ferramentas de predição. RNA total e proteínas foram extraídos das amostras e a expressão de rno-miR-214-3p, Pla2g2a e Il6 avaliada por RT-qPCR e/ou Western Blot. In vivo, observou-se aumento na deposição de colágeno no miocárdio dos animais diabéticos (p = 0,023) caracterizando o início de um processo fibrótico. A hiperglicemia reduziu a expressão do rno-miR-214-3p (p = 0,043 e p = 0,020) e aumentou de Pla2g2a (p = 0,016 e p = 0,043) e Il6 (p = 0,016 e p = 0,011) in vivo e in vitro, respectivamente. A expressão das proteínas sPLA2-IIA (p = 0,011) e IL-6 (p = 0,011) aumentou no VE dos ratos diabéticos. Houve correlação positiva entre a expressão de Pla2g2a, Il6 e hiperglicemia (p < 0,05). O uso de mimético de rno-miR-214-3p em células H9c2, levou à redução na expressão de Pla2g2a e Il6 em meio hiperglicêmico (mimético a 50 nM/24 h). Sendo assim, observamos que a expressão de rno-miR-214-3p está diminuída e de seu gene alvo Pla2g2a aumentada no DM nas três abordagens propostas pelo presente estudo. Além disso, o aumento da expressão de rno-miR-214-3p através do uso de miméticos ocasionou a diminuição na expressão de Pla2g2a e também de Il6, indicando uma participação desse miRNA no controle da inflamação causada pelo DM.
Biomarcadores para cardiomiopatia arritmogênica do ventrículo direito através de análise bioinformática
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-02-27) Rosa Neta, Antônia Pereira; Luchessi, André Ducati; Duarte, Victor Hugo Rezende; https://orcid.org/0000-0002-2758-8102; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; https://orcid.org/0009-0001-9194-0502; http://lattes.cnpq.br/4525592745290959; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; https://orcid.org/0000-0003-0229-9416; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Marques, Otávio Cabral
A cardiomiopatia arritmogênica do ventrículo direito (CAVD) é uma doença caracterizada patologicamente pela substituição do tecido cardíaco normal, principalmente no ventrículo direito por tecido fibrogorduroso e clinicamente por arritmias ventriculares potencialmente fatais em jovens aparentemente saudáveis. A prevalência da doença foi estimada em 1:5.000 indivíduos. A CAVD tem um diagnóstico muito difícil devido à necessidade de investigar e diferenciar os resultados de vários exames eletrocardiográficos que também são comuns a outras cardiopatias. O objetivo deste trabalho é analisar os dados do perfil de expressão de miRNA e RNAm de pacientes com CAVD e fornecer esclarecimentos sobre a fisiopatologia da CAVD e novas conexões da rede miRNAs-RNAms para uma investigação mais aprofundada e triagem de biomarcadores eficientes para CAVD. Para isso, bancos de dados de conjuntos de dados GEO e ferramentas de bioinformática foram utilizados para rastrear 47 DEGs em CAVD. Em seguida, foi realizada análise de enriquecimento de Gene Ontology (GO) e análise de interação proteína-proteína (PPI). Por fim, foram identificadas 3 pequenas moléculas (hsa-miR-21-5p, hsa-miR-4443, hsa-miR-486-5p) mais importantes que mostram expressão no tecido e no plasma e possuem mecanismos moleculares relacionados a doença no ciclo da doença e poderia servir como um biomarcador promissor para o CAVD.
Características clínicas associadas ao agravamento da Covid-19 e na predisposição ao desenvolvimento da Condição Pós-Covid
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-10-17) Silva, Nayara Sousa da; Luchessi, André Ducati; https://orcid.org/0000-0002-2758-8102; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; https://orcid.org/0000-0002-3864-4106; http://lattes.cnpq.br/2002678643031631; Fregonezi, Guilherme Augusto de Freitas; https://orcid.org/0000-0003-4938-7018; http://lattes.cnpq.br/2201375154363914; Marques, Otavio Cabral; Braga Neto, Pedro; Cobucci, Ricardo Ney Oliveira
O Brasil registrou aproximadamente 37 milhões de casos de COVID-19 até janeiro de 2023. Além dos impactos agudos, a COVID-19 pode se tornar um agravo crônico, conhecido como a Condição Pós-Covid (CPC). Estudos longitudinais são cruciais para entender os impactos de longo prazo da COVID- 19. O presente estudo descreve o perfil clínico de uma coorte de 704 pacientes infectados com SARS-CoV-2 e analisa as consequências na saúde e qualidade de vida dois anos após a infecção. A primeira fase do estudo caracterizou a fase aguda da COVID-19 em pacientes infectados durante os primeiros meses de 2020. Casos críticos representaram 29% do grupo estudado, sendo o sexo masculino e a presença de diabetes as variáveis com maior risco para a gravidade da doença (RR= 1,76; IC95%: 1,43 - 2,17 e RR = 1,60; IC95%: 1,28 - 2,00). O uso de antimaláricos, azitromicina e ivermectina, medicamentos do “Kit COVID”, foi significativamente maior nos grupos de gravidade severa e crítica (p = 0.010, p <0.001, p = 0.010, respectivamente), porém não apresentaram efeito na sobrevivência dos pacientes. Um total de 105 pacientes faleceram decorrente da COVID-19 e suas complicações. A segunda fase do estudo ocorreu entre os meses de maio a junho de 2022, envolvendo 137 sobreviventes da primeira fase. Sintomas persistentes foram relatados por 56.9% dos pacientes. Mulheres e pessoas hospitalizadas durante a infecção aguda apresentaram maior risco de apresentarem sintomas após a COVID-19 (RR=2,07; IC95%: 1,47 - 2,94 e RR=1,53; IC95%: 1,07 - 2,18). Distúrbios respiratórios, efeitos neurológicos e dores no corpo foram as manifestações mais frequentemente relatadas. Pelo menos 20% dos indivíduos referiram algum grau de dificuldade na realização das atividades diárias. Países que enfrentaram altas taxas de infecção por SARS-CoV-2 devem estar preparados para lidar com as consequências de longo prazo da COVID-19. Neste contexto, nosso estudo é fundamental para fornecer um panorama da situação brasileira e orientar a realização de estudos adicionais, bem como a formulação de políticas públicas direcionadas para o enfrentamento da CPC.
Efeito da fração acetato de etila do extrato de Eugenia uniflora na expressão global de proteínas durante a morfogênese Candida albicans
(2017-03-30) Silva, Walicyranison Plinio da; Chaves, Guilherme Maranhão; ; http://lattes.cnpq.br/1463249528959656; ; http://lattes.cnpq.br/2562169002627604; Melo, Analy Salles de Azevedo; ; http://lattes.cnpq.br/8922840487452492; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; Silva, Marcelo de Sousa da; ; http://lattes.cnpq.br/1295430560645312; Batista, Wagner Luiz;
Em certas circunstâncias, Candida albicans pode passar de colonizante para infectante e, como na candidíase oral. A morfogênese de C. albicans, bem como sua capacidade de combater o estresse oxidativo no interor de células fagocíticas, é um fator essencial para a invasão tecidual e estabelecimento da infecção. Devido ao baixo arsenal antifúngico disponível no mercado e o constante surgimento de cepas resistentes, faz-se necessária a pesquisa de novas fontes terapêuticas, principalmente oriundas de produtos naturais. No presente estudo foram selecionados 48 isolados clínicos de C. albicans oriundos da cavidade bucal de pacientes transplantados renais. A fração acetato de etila de Eugenia uniflora foi utilizada na concentração de 1000 μg/mL para avaliar a ação comparativa (tratada e não tratada com extrato) sobre a fagocitose e morfogênese de C. albicans. Foi realizado o ensaio de resistência ao ataque de neutrófilos polimorfonucleares. O isolado 111R, de alta capacidade filamentação foi utilizado para avaliação do perfil protéico por meio de análise proteômica, bem como da interação com proteínas diretamente associadas à morfogênese. A resposta à infecção foi observada em modelo murino de candidíase oral e a ação tóxica do extrato de E. uniflora foi observada em ensaio de MTT. O extrato de E. uniflora reduziu significativamente a capacidade de fagocitose de C. albicans (média total de 120.36 ± 36.71 vs. 44.68 ± 19.84). Trinta e nove proteínas foram identificadas na análise proteômica, relacionadas à geração de energia, metabolismo de proteínas e glicose, divisão celular, transporte citoplasmático, metabolismo de ácidos nucléicos, estrutura celular e resposta ao estresse. Importantes proteínas relacionadas com a formação do citoesqueleto foram reguladas negativamente nas células tratadas. Houve instalação de infecção na cavidade oral dos camundongos e a infecção foi atenuada quando C. albicans foi pré-incubada na presença do extrato de E. uniflora e quando o extrato foi aplicado na cavidade oral após a instalação da infecção. Este resultado foi condizente com a redução na contagem de UFC (2.36 vs. 1.85 Log10 CFU/ml) e a atenuação dos danos teciduais observados na análise histopatológica. O extrato de E. uniflora não foi tóxico para células humanas mesmo em concentrações 8x acima da utilizada nos experimentos. A fração acetato de etila de E. uniflora poderá causar danos à parede celular e proteínas essenciais ao metabolismo de C. albicans, afetando proteínas relacionadas à estrutura celular, reduzindo a capacidade plástica de filamentação, atenuando a ação invasiva em modelo animal, sem causar efeito tóxico em células humanas, podendo ser uma futura alternativa terapêutica para o tratamento de infecções por Candida.
Estudo da associação dos genes RANk, RANKL e OPG com a osteopatia diabética
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2014-03-31) Loureiro, Melina Bezerra; Rezende, Adriana Augusto de; ; http://lattes.cnpq.br/4245215108740331; ; http://lattes.cnpq.br/8172108729779350; Luchessi, André Ducati; ; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; Abreu, Bento João da Graça Azevedo; ; http://lattes.cnpq.br/1725848357337658; Santos, Marivânia da Costa; ; http://lattes.cnpq.br/5924954175074341; Dib, Sergio Atala; ; http://lattes.cnpq.br/3659437526996462
O objetivo do presente trabalho foi avaliar a expressão de RNAm e os polimorfismos dos genes RANK, RANKL e OPG de crianças, adolescentes e adultos jovens com DM1, bem como estudar a associação dos mesmos com o desenvolvimento de alterações no metabolismo ósseo.No total, foram incluídos no estudo 119 crianças e adolescentes com DM1 e 161 indivíduos normoglicêmicos (NG) da mesma faixa etária. Foram pesquisados os polimorfismos dos genes OPG (1181 G>C e 163 A>G), RANK (575 C>T e 3'UTR C>A) e RANKL (Íntron A>G) e determinadas as expressões gênicas de OPG, RANK e RANKL. Além disso, foram avaliados o controle glicêmico e parâmetros laboratoriais de função óssea, além da densitometria óssea. Os indivíduos com DM1 apresentaram um controle glicêmico insatisfatório e valores diminuidos de cálcio total, propeptídeo do colágeno tipo 1 (CTX), como também baixa densidade mineral óssea, quando comparados com os NG (p<0,05). O polimorfismo OPG 1181 G>C pode estar associado com susceptibilidade ao DM1 (p=0,054). Estudando apenas os indivíduos com DM1, foi observado que os carreadores do genótipo OPG 1181 GG apresentaram maiores concentrações de cálcio ionizado no modelo recessivo (p<0,05). Esses resultados sugerem que o polimorfismo OPG 1181 G>C pode contribuir para o desenvolvimento do DM1 e da osteopatia diabética.

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