Navegando por Autor "Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos"
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Tese Atividade antibacteriana das plantas copaifera duckei dwyer e pseudobombax marginatum e sua interação com a superfície celular bacteriana(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-06-26) Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos; ; http://lattes.cnpq.br/0321740024191482; ; http://lattes.cnpq.br/6990029952181366; Chaves, Guilherme Maranhão; http://lattes.cnpq.br/1463249528959656; Giordani, Raquel Brandt; ; http://lattes.cnpq.br/5032750980466610; Santos, Simone Gon�alves dos; ; http://lattes.cnpq.br/2078192817381979A resistência microbiana a antimicrobianos tem favorecido a busca por substâncias bioativas provenientes de plantas usadas na medicina popular, com o intuito de se obter novos fármacos com atividade antimicrobiana. Neste estudo, foi proposta a investigação da atividade antibacteriana do óleo-resina de Copaifera duckei e de diferentes extratos da casca de Pseudobombax marginatum, e seus possíveis mecanismos de ação. O potencial inibitório antibacteriano foi avaliado utilizando-se os métodos de difusão e diluição em ágar, e a bioautografia. O mecanismo de ação foi analisado por microscopia eletrônica, no qual se observou alterações na ultraestrutura bacteriana, e por eletroforese em SDS-PAGE, que determinou ação sobre as proteínas das superfícies celulares. A análise química foi realizada pelas técnicas de Espectrometria de massas acoplada ao Cromatógrafo a gás- EM/CG (C. duckei) e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência- CLAE (P. marginatum). Entre as bactérias estudadas, B. cereus foi a mais suscetível às plantas em estudo, com concentrações inibitórias mínimas (CIMs) correspondentes a 0,3125 mg/mL para o óleo-resina de copaíba, e 0,5 mg/mL para extrato hidroalcoólico (1:1) e 0,512 mg/mL para a fração butanólica da casca P. marginatum, nos quais pôde-se observar alterações na parede celular do B. cereus, com remoção da camada S, espessamento da parede celular e formação de diversos septos nos centros de divisão celular. A análise química por EM/CG mostrou compostos terpênicos no óleo-resina de C. duckei, tendo como composto majoritário o β-bisaboleno, e a análise por CLAE mostrou a presença de compostos derivados da catequina na casca do P. marginatum. Desta forma, as plantas em estudo mostram um potencial antibacteriano considerável, podendo contribuir tanto na terapia antimicrobiana como na área de alimentos, tendo como um de seus prováveis sítios de ação a parede celular bacterianaTCC Atuação do farmacêutico no CAPS AD III Leste Natal: oportunidades e desafios(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-12-06) Ferreira, Pedro Fernandes; Noronha, André Gustavo Gadelha Mavignier de; http://lattes.cnpq.br/8800524734580457; Diniz, Rodrigo Santos; http://lattes.cnpq.br/0085346724655944; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dosEste trabalho de TCC tem como foco a atuação do farmacêutico em um Centro de Atenção Psicossocial para Álcool e Drogas (CAPS AD). O objetivo principal do estudo foi entender a atuação do farmacêutico no CAPS AD, avaliando desafios e oportunidades em sua rotina. A metodologia incluiu uma pesquisa descritiva em um CAPS AD em Natal, Rio Grande do Norte, onde foram feitas 9 perguntas relacionadas às atividades do farmacêutico. Os resultados da pesquisa foram apresentados em forma de tabela, destacando se o CAPS atende plenamente, parcialmente ou não atende a cada pergunta. Das 9 perguntas, 1 foi classificada em não atende, 4 foram em atende parcialmente e 4 como atende plenamente. Concluindo, o estudo identifica que o farmacêutico no CAPS AD desempenha um papel fundamental na promoção da saúde mental dos pacientes, fornecendo cuidados de qualidade, monitorando o esquema terapêutico e contribuindo para o sucesso terapêutico. No entanto, o trabalho do farmacêutico enfrenta desafios, como a sobrecarga de trabalho devido à falta de profissionais, problemas de articulação intersetorial e a dependência de pacientes em situação de vulnerabilidade. O estudo destaca a necessidade de políticas públicas para apoiar pacientes carentes e a importância do fortalecimento da equipe farmacêutica no CAPS AD. Além disso, enfatiza a importância da integração entre os diversos componentes da Rede de Atenção Psicossocial (RAPS) para garantir um atendimento eficaz aos pacientes com transtornos mentais relacionados ao abuso de substâncias.Tese Efeito do extrato de Eugenia uniflora sobre fatores de virulência e caracterização da ação antifúngica em isolados de Candida spp. oriundos da cavidade oral de receptores de transplante renal(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-06-10) Souza, Luanda Bárbara Ferreira Canário de; Chaves, Guilherme Maranhão; http://lattes.cnpq.br/1463249528959656; http://lattes.cnpq.br/0567484662111463; Padovan, Ana Carolina Barbosa; http://lattes.cnpq.br/7106567615656883; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos; http://lattes.cnpq.br/6990029952181366; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Langassner, Silvana Maria Zucolotto; http://lattes.cnpq.br/7390416147619446A candidíase oral é uma importante manifestação clínica em receptores de transplante renal. Candida spp. possuem fatores de virulência que contribuem para o processo infeccioso, incluindo a capacidade de aderir a células epiteliais e de formar de biofilme em superfícies bióticas e abióticas. Devido ao limitado arsenal de antifúngicos disponíveis no mercado, as reações adversas e o surgimento de espécies resistentes, torna-se necessário encontrar novos antifúngicos que atuem em alvos alternativos, ou de forma sinérgica aos atuais antifúngicos e que possuam menor toxicidade. Nesse contexto, os produtos naturais têm ganhado importância. O extrato obtido a partir das folhas de Eugenia uniflora [acetona: água (7:3, v/v)] tem demonstrado atividade antifúngica contra Candida spp.. Portanto, este estudo objetivou avaliar o efeito do extrato de E. uniflora sobre fatores de virulência in vitro e caracterizar a ação antifúngica em isolados de Candida spp. oriundos da cavidade oral de receptores de transplante renal. O extrato de E. uniflora foi caracterizado por cromatografia líquida de alta eficiência e as cepas de Candida spp. pertencentes a um banco de microrganimos foram reativadas e utilizadas nas análises. A determinação da concentração inibitória mínima do extrato foi realizada pelo método de microdiluição em caldo, assim como ensaios de toxicidade frente a eritrócitos e células epiteliais bucais humanas (CEBH) foram realizados a partir da determinação do índice de hemólise e da contagem de 150 CEBH em microscópio óptico, respectivamente. Para os ensaios de virulência in vitro, as leveduras foram cultivadas na presença e ausência de 1000 µg/mL do extrato. A adesão foi quantificada usando o número de células de Candida spp. aderidas a 150 CEBH determinadas por microscópio óptico. A formação de biofilme foi avaliada usando duas metodologias: XTT (2,3-bis (2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil) -2H-tetrazólio-5-carboxanilida) e o ensaio do cristal violeta, sendo analisado posteriormente por microscopia eletrônica de varredura. A hidrofobicidade da superfície celular (HSC) foi quantificada com o teste de adesão microbiana a hidrocarbonetos. Realizaou-se análise in silico para predição de atividade antifúngica dos compostos majortitarios determinados no extrato. Determinou-se a CIM quando na presença de ergosterol exógeno, bem como em ambiente osmoprotegido por sorbitol (0,8 M). A ação do extrato na parede celular foi avaliada a partir do crescimento das células tratadas com extratdo de E. uniflora em Ágar Sabouraud Dextrose (ASD) acrescido de calcofluor, vermelho congo e dodecil sulfato de sódio (SDS). Avaliou-se a perda de integridade da membrana utilizandose a marcação com o iodeto de propídio (IP). A ação combinada do extrato de E. uniflora com o Fluconazol, a Micafungina e o Ácido gálico foi determinada pelo método checkerboard e por fim foi determinada a curva de morte de Candida spp. tratadas com o extrato de E. uniflora e em combinação em função do tempo. O extrato de E. uniflora foi capaz de inibir em 50% o crescimento das células de Candida spp. e possui dois compostos majoritários: miricitrina e ácido gálico. Além disso, mostrou-se não citotóxico aos eritrócitos e CEBH. Reduziu a adesão as CEBH e HSC para as espécies de Candida analisadas, e observou-se uma capacidade reduzida estatisticamente significativa para formar biofilmes usando os dois métodos de quantificação. A análise in silico demonstrou que não há alvos moleculares que correlacionem a miricitrina à ação antifúngica do extrato de E. uniflora, já o ácido gálico demonstrou ligação a enzima CPY51 presente na célula fúngica. O extrato aumentou discretamente as CIM quando realizado o ensaio de ligação ao ergosterol. Porém, no ensaio na presença do sorbitol, os valores de CIM para o extrato foram aumentados, sugerindo-se que um dos possíveis mecanismos de ação seja atuar na parede celular fúngica. O tratamento das células de Candida com o extrato conferiu resistência frente aos perturbadores de parede celular, e houve perda de integridade da membrana celular fúngica quando as células tratadas com o extrato foram coradas com IP. O extrato de E. uniflora apresentou ação sinérgica aditiva quando combinado com o Fluconazol e a Micafungina. Entretanto, a combinação com o ácido gálico apresentou um efeito indeterminado (sem interação). A curva de morte das células tratadas com o extrato demonstrou uma diminuição na contagem do número de UFC em 48 horas e a combinação do extrato de E. uniflora com o fluconazol resultou em uma queda significativa na contagem de UFC. O extrato de E. uniflora pode de alguma forma estar perturbando a membrana celular, tendo visto a perda de integridade da membrana verificada no ensaio com marcação com IP. Entretanto, aparentemente esse processo não se dá, exclusivamente, através da ligação direta ao ergosterol, ou somente pela inibição da enzima CYP51 (14 α-demetilase), ação atribuída ao ácido gálico nas análises in silico. O extrato interage em nível de parede celular fúngica, haja visto o aumento da CIM no ensaio com o sorbitol e a discreta diminuição de crescimento para algumas cepas no ensaio com os perturbadores de parede celular. O extrato de E. uniflora mostrou-se promissor como uma plausível alternativa de terapia combinada com o fluconazol para o tratamento de candidíase oral. Entretanto, mais análises devem ser realizadas para confirmação das evidências apresentadas pelos ensaios realizados quanto ao mecanismo de ação do extrato de E. uniflora.Dissertação Plasmídeos formulados com nanopartículas catiônicas: análise da estabilidade físico química e biológica(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2019-03-28) Cardoso, Anna Clara de Araújo; Silva, Marcelo de Sousa da; https://orcid.org/0000-0002-1000-0149; http://lattes.cnpq.br/1295430560645312; http://lattes.cnpq.br/3358002467400398; Silva Júnior, Arnobio Antônio da; https://orcid.org/0000-0002-7516-1787; http://lattes.cnpq.br/2593509584288129; Lacerda, Ariane Ferreira; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dosOs plasmídeos (pDNAs) são ferramentas biotecnológicas, usados principalmente na área de vacinas de DNA. A agência Food and Drug Administration recomenda a utilização da isoforma superenrolada dos plasmídeos em protocolos de imunização, estudos conferem a isoforma superenrolada a eficiência de transferência gênica. A isoforma superenrolada é degrada por nucleases presentes no plasma e no interior das células. A nanotecnologia vem sendo usada como uma alternativa para proteção do plasmídeo contra nucleases e entrega eficiente as células alvo. Tendo em vista a importância da estabilidade estrutural de pDNAs na sua função biológica, esse estudo objetivou avaliar a estabilidade de dois pDNAs, o pVAX1 e pVAX1LacZ, e formular estes a nanopartículas catiônicas. Foi produzido um protocolo de degradação utilizando variáveis de temperatura de incubação, tamanho do plasmídeo e concentração de soro, fonte de nucleases para avaliar a estabilidade dos plasmídeos. Posteriormente, os pDNAs foram formulados com nanopartículas catiônicas, e sua estabilidade frente a variáveis de tempo e concentração de soro foram testadas. O protocolo desenvolvido demonstrou degradação total dos plasmídeos nas maiores concentrações de soro, a temperatura influenciou de forma direta, a 37 °C ocorreu a maior atividade de degradação dos pDNAs, sendo o pDNA de maior tamanho, o mais degradado. As nanopartículas catiônicas obtiveram 100% de associação com o pDNA, com características físico químicas dentro do padrão requerido. A formulação demonstrou estabilidade em função do tempo, e quando em contato com diferentes diluições do soro humano, não ocorreu degradação do plasmídeo associado. A preparação de nanopartículas catiônicas com pDNA associado se mostrou um sistema promissor para conferir proteção ao pDNA, direcionando a mais estudos in vitro e in vivo dessa formulação.Artigo Potent and broad-spectrum antimicrobial activity of analogs from the scorpion peptide stigmurin(MDPI, 2019-01-31) Carmo, Bruno Amorim do; Silva, Alessandra Daniele da; Parente, Adriana Marina e Silva; Furtado, Allanny Alves; Carvalho, Eneas; Oliveira, Johny Wysllas de Freitas; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos; Silva, Marcelo S.; Silva, Sérgio Ruschi Bergamachi; Silva Júnior, Arnóbio Antônio da; Monteiro, Norberto K.; Fernandes-Pedrosa, Matheus F.Scorpion venom constitutes a rich source of biologically active compounds with high potential for therapeutic and biotechnological applications that can be used as prototypes for the design of new drugs. The aim of this study was to characterize the structural conformation, evaluate the antimicrobial activity, and gain insight into the possible action mechanism underlying it, for two new analog peptides of the scorpion peptide Stigmurin, named StigA25 and StigA31. The amino acid substitutions in the native sequence for lysine residues resulted in peptides with higher positive net charge and hydrophobicity, with an increase in the theoretical helical content. StigA25 and StigA31 showed the capacity to modify their structural conformation according to the environment, and were stable to pH and temperature variation—results similar to the native peptide. Both analog peptides demonstrated broad-spectrum antimicrobial activity in vitro, showing an effect superior to that of the native peptide, being non-hemolytic at the biologically active concentrations. Therefore, this study demonstrates the therapeutic potential of the analog peptides from Stigmurin and the promising approach of rational drug design based on scorpion venom peptide to obtain new anti-infective agents.Dissertação Redução da susceptibilidade à clorexidina e distribuição dos genes qacA/B em isolados de estafilococos coagulase-negativa(2017-06-29) Vale, Bruna Costa Moura do; Melo, Maria Celeste Nunes de; http://lattes.cnpq.br/0580551464788795; http://lattes.cnpq.br/4485434453166894; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos; http://lattes.cnpq.br/6990029952181366; Motta Neto, Renato; http://lattes.cnpq.br/6909091962347443As infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS) são atualmente um dos principais problemas de saúde pública. Os estafilococos coagulase-negativa (ECN) estão entre as espécies mais prevalentes neste tipo de infecção, devido à sua capacidade de colonizar dispositivos médicos invasivos. A clorexidina é extensivamente utilizada no ambiente hospitalar como forma de prevenção e controle de IRAS. No entanto, a literatura relata a existência de cepas com susceptibilidade reduzida ocasionada possivelmente pela presença dos genes qacA/B. O objetivo do estudo foi investigar a susceptibilidade à clorexidina e sua relação com a presença dos genes qacA/B em 211 isolados de ECN provenientes de diferentes hospitais da cidade do Natal-RN. As amostras foram identificadas por testes bioquímicos convencionais; a susceptibilidade à antimicrobianos foi realizada pela metodologia disco-difusão; a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) para a clorexidina foi avaliada pela técnica de diluição em ágar; a técnica da PCR foi utilizada para pesquisar os genes qacA/B e o gene mecA. No total de 211 amostras de ECN, 69% foram isolados a partir hemoculturas. As espécies mais frequentes foram S. epidermidis, S. hominis hominis, S. auricularis e S. haemolyticus, respectivamente. As cepas apresentaram um perfil de resistência a multidrogas de 87%, incluindo resistência à oxacilina; 31% demonstraram susceptibilidade reduzida à clorexidina. Os genes qacA/B foram detectados tanto em amostras resistentes à clorexidina (32/32) quanto em amostras susceptíveis (17/32). Grande parte das cepas com susceptibilidade reduzida à clorexidina exibiram também multirresistência aos antibióticos testados (94%). A identificação de cepas com susceptibilidade reduzida à clorexidina nesse estudo representa uma ameaça as práticas de controle de IRAS. Apesar de todas as cepas resistentes à clorexidina possuírem os genes qacA/B, sua presença não foi um fator determinante para a expressão da resistência, necessitando de estudos adicionais. A diminuição da susceptibilidade à antissépticos pode levar à persistência bactérias no ambiente hospitalar contribuindo, dessa forma, para a sobrevivência de cepas multirresistentes.TCC Revisão: atividade antibacteriana de peptídeos nativos e análogos de escorpião(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2018-06-18) Costa, Tiago Marinho Martins da; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; Alessandra Danielle da Silva; Furtado, Allanny Alves; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos; Soares, Fabiano Henrique RodriguesUm dos grandes problemas de saúde pública no mundo a ser enfrentado nos próximos anos é a problemática da resistência bacteriana nas instituições de saúde. Muitos estudos estão sendo realizados por vários grupos de pesquisa no mundo para mitigar esse problema por meio de pesquisas que buscam moléculas alternativas para incrementar o arsenal terapêutico contra as doenças infecciosas, principalmente no que diz respeito às doenças infecciosas bacterianas. Nesse sentido, um grupo de moléculas tem ganhado notoriedade como candidatas a ser uma boa alternativa nessa “guerra biológica”, os chamados peptídeos antimicrobianos (PAMs). Tais peptídeos podem ser de origem natural, oriundos de diversas fontes, como plantas, artrópodes, outros animais (anfíbios, o homem), procariotos; podem ser sintéticos, como o exemplo dos análogos dos peptídeos naturais; podem ser peptídeos recombinantes, obtidos a partir da tecnologia do DNA recombinante, por meio da alocação do gene que codifica tal peptídeo antimicrobiano em qualquer ser vivo ou cultura de células de seres vivos, tornando-os capazes de produzir o peptídeo de interesse (GANZ; LEHRER, 1999; LI et al., 2012). Dentro desse contexto, a revisão a seguir versará sobre os peptídeos antibacterianos oriundos dos escorpiões, animais que, por sinal, apresentaram-se como uma das grandes fontes de moléculas bioativas antimicrobianas (PRIMON-BARROS; JOSE MACEDO, 2017). Dentro da classe dos peptídeos antimicrobianos (PAM) com ação antibacteriana presente na peçonha de escorpiões, podemos citar moléculas como a Stigmurina oriunda da peçonha do escorpião Tityus stigmurus (DE MELO et al., 2015; DANIELE-SILVA et al., 2016); as Hadrurinas oriundas da peçonha do escorpião Hadrurus aztecus (TORRES-LARIOS et al., 2000; SANCHEZ-VASQUEZ et al., 2013); o peptídeo IsCT, presente na peçonha do escorpião Opithancatus madagascariensis (DAI et al., 2002; DE LA SALUD BEA et al., 2017); o peptídeo BmKn2 encontrado na peçonha do escorpião Buthus martensii (CAO et al., 2012). Além disso, há relatos na literatura de que os peptídeos antimicrobianos derivados do veneno de escorpião apresentam outras atividades, dentre as quais podemos destacar as atividades antifúngica, antiparasitária, antiviral e até anticâncer (WANG; WANG, 2016; PEDRON et al., 2018). Em comum tais moléculas compartilham a característica de apresentarem-se como peptídeos catiônicos devido à presença de aminoácidos básicos como a lisina e arginina, podendo ou não apresentar pontes dissulfetos. PAMs sem pontes dissulfeto presente em escorpiões, em geral, apresentam a capacidade de modificar a sua conformação estrutural dependendo do meio, sendo esta flexibilidade associada ao mecanismo de ataque na superfície da membrana celular bacteriana e consequentemente ao exercício de seu efeito antibacteriano. Em geral, os principais mecanismos de ação relatados para os PAMs (incluindo os presentes em escorpiões) consistem em 3 modelos: o modelo de poro toroidal, o modelo em forma de tapete e o modelo em barril (HARRISON et al., 2014; FRATINI et al., 2017). Em face do que foi descrito acima, o objetivo dessa revisão é mostrar para o leitor uma corrente de pesquisa que visa contribuir quanto a novas possibilidades terapêuticas frente à problemática do gradativo aumento da resistência bacteriana na prática clínica, enfocando, especificamente, nos peptídeos antimicrobianos de ação antibacteriana isolados a partir da peçonha de escorpiões e seus análogos (novos peptídeos com ação antibacteriana modificados a partir dos nativos com mesma propriedade, visando melhorar a atividade antibacteriana ou visando melhorar a segurança terapêutica dos mesmos), moléculas essas que mostram-se promissoras, nos mais recentes estudos, no que diz respeito a sua atividade antibacteriana in vitro e em modelos animais, apresentando-se como uma possível alternativa, para serem utilizadas como protótipo para obtenção de novos agentes antibacterianos.