Navegando por Autor "Sousa, Angélica Fernandes Gurgel de"
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Dissertação Avaliação da genotoxicidade e do potencial osteogênico de polissacarídeos sulfatados de algas marinhas(2017-05-26) Sousa, Angélica Fernandes Gurgel de; Moreira, Susana Margarida Gomes; Moreira, Susana Margarida Gomes; ; ; ; Lima, Jailma Almeida de; ; Lajus, Tirzah Braz Petta;Os problemas relacionados com defeitos ósseos continuam a motivar a busca de terapias mais eficazes. Assim, a combinação de biomateriais, células-tronco e moléculas bioativas fazem parte das ferramentas usadas pela medicina regenerativa para alcançar esse objetivo. Diversos estudos já mostraram o potencial osteogênico dos polissacarídeos sulfatados (PSs) extraídos de macroalgas marinhas. Entre eles, o fucoidan, isolado da alga marrom Fucus vesiculosus, é o mais estudado, sendo já comercializado por algumas empresas. As algas verdes também são fonte de PSs, mas estas são ainda pouco exploradas para aplicações na regeneração óssea. Em geral, as aplicações clínicas dos PSs extraídos de algas ainda são limitadas devido à escassez de estudos sobre os seus efeitos, como por exemplo, o potencial genotóxico é desconhecido na maioria dos casos. Assim, neste trabalho avaliamos a atividade osteogênica 1) do Fucoidan de F. vesiculosus (um extrato comercializado pela Sigma), 2) das amostras ricas em PSs obtidas do subfracionamento do fucoidan comercial, e 3) do extrato rico em PSs extraídos da alga verde Caulerpa sertularioides usando como modelo células-tronco humanas isoladas da geleia de Wharton de cordões umbilicais (CTMH-GW). Estudou-se também o potencial genotóxico dos extratos totais de F. vesiculosus e C. sertularioides e posteriormente, da subfração do fucoidan que apresentou maior potencial osteogênico, utilizando do ensaio de micronúcleo com bloqueio da citocinese (CBMN) na linhagem CHO-K1. Os ensaios de redução do MTT evidenciaram que as amostras ricas em PSs não apresentaram citotoxicidade significativa ao longo de 72 h, até 10 μg.mL-1. Os ensaios de atividade da fosfatase alcalina (ALP) e de mineralização sugerem que as amostras ricas em PSs possuem atividades osteogênicas diferentes: a subfração do fucoidan FUC 0.5 (5 μg.mL-1) foi a que apresentou melhor resultado, aumentando 124% a atividade da ALP em relação ao controle positivo (células mantidas em meio osteogênico). Já o extrato total de C. sertularioides (5 μg.mL-1) aumentou 192% a atividade da ALP. Adicionalmente, todas as amostras testadas induziram o acúmulo de cálcio na matriz extracelular. Quanto à genotoxicidade, os resultados do ensaio CBMN sugerem que, nas condições testadas, estas amostras não são genotóxicas, indicando que podem ser uma alternativa para terapias de regeneração óssea.Artigo Genotoxicity and osteogenic potential of sulfated polysaccharides from Caulerpa prolifera seaweed(Elsevier, 2018) Chaves Filho, Gildácio Pereira; Sousa, Angélica Fernandes Gurgel de; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; Medeiros, Silvia Regina Batistuzzo de; Moreira, Susana Margarida GomesMarine algae are sources of novel bioactive molecules and present a great potential for biotechnological and biomedical applications. Although green algae are the least studied type of seaweed, several of their biological activities have already been described. Here, we investigated the osteogenic potential of Sulfated Polysaccharide (SP)- enriched samples extracted from the green seaweed Caulerpa prolifera on human mesenchymal stem cells isolated from Wharton jelly (hMSC-WJ). In addition, the potential genotoxicity of these SPs was determined by cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay. SP-enriched samples did not show significant cytotoxicity towards hMSCs-WJ at a concentration of up to 10 μg/mL, and after 72 h of exposure. SP enrichment also significantly increased alkaline phosphatase (ALP) activity, promoting calcium accumulation in the extracellular matrix. Among the SP-enriched samples, the CP0.5 subfraction (at 5 μg/mL) presented the most promising results. In this sample, ALP activity was increased approximately by 60%, and calcium accumulation was approximately 6-fold above the negative control, indicating high osteogenic potential. This subfraction also proved to be non-genotoxic, according to the CBMN assay, as it did not induce micronuclei. The results of this study highlight, for the first time, the potential of these SPs for the development of new therapies for bone regeneration