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Avaliação das citocinas na doença hepática gordurosa não alcoólica: uma revisão da literatura
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-12-04) Oliveira, Laryssa Caroline Andrade de; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; Stephany Ann Costa do Rosario; Luz, Jefferson Romáryo Duarte da; Souza, Luanda Bárbara Ferreira Canário de
A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) tornou-se um desafio crescente para a saúde pública mundial, estando diretamente relacionada à inflamação do tecido adiposo. Neste contexto, sabe-se que as citocinas, especialmente as pró-inflamatórias, Interleucina (IL-1) e o fator de necrose tumoral (TNF-α) estão envolvidas nesse processo. O objetivo desta revisão da literatura foi analisar o perfil destas citocinas em pacientes com DHGNA. Para isso, foram analisados inicialmente 4503 artigos, nas seguintes bases de dados: PubMed e Science Direct, utilizando-se como descritores: “NAFLD” AND “anti-inflammatory cytokines”; “NAFLD” AND “cytokines”; “NAFLD” AND “IFN”; “NAFLD” AND “IL-2”; “NAFLD” AND “IL-10”; “NAFLD” AND “IL-1”; “NAFLD” AND “IL-6”; “NAFLD” AND “TNF”. Ao final, após análise de títulos, resumos e do texto completo dos artigos, foram incluídos 4 artigos onde observou-se um perfil de elevação das citocinas IL-6 e TNFα. Assim, apesar da fisiopatologia da DHGNA não estar bem descrita, o estudo do perfil das citocinas pró-inflamatórias pode direcionar o desenvolvimento de futuras intervenções.
Avaliação de fatores de virulência de isolados clínicos e ambientais do complexo Candida parapsilosis
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2019-11-05) Chacon, Dayane Araújo; Chaves, Guilherme Maranhão; Silveira, Ivanaldo Amancio da; Souza, Luanda Bárbara Ferreira Canário de
Background: In recent years, an attack of infections related to Candida-non-Candida albicans (CNCA) species and species of the Candida parapsilosis Complex frequently associated with infection has been observed. Over the past two decades, the prevalence of infections caused by C. parapsilosis Complex has increased dramatically. And because they are yeast commonly found as commensals of the human skin, C. parapsilosis Complex species are important agents of nosocomial infections, presenting as opportunistic fungal pathogen, being also associated with candidemia, and together with four other species Candida (C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis and C. krusei) represent 90% of isolates from patients with candidemia. Objectives: The present work aimed to compare the pathogenic potential of environmental isolates (pigeon droppings), with clinical isolates (blood culture) of C. parapsilosis complex, through phenotypic analysis of in vitro virulence factors. Methods: In order to analyze the virulence factors, adherence tests were performed on human buccal epithelial cells (HBEC), enzyme secretion (phospholipases) and protease activity of all C. parapsilosis isolates. The results were also compared with reference strains of C. albicans ATCC 90098 and C. parapsilosis ATCC 22019. Results: Clinical isolates of C. parapsilosis showed a greater ability to adhere to the HBEC, with an average of 144.4 ± 67.5 cells adhered, as opposed to the environmental isolates, which had an average of 77.3 ± 63.4 cells adhered. Regarding protease activity, 78.3% (18/23) of the clinical isolates showed protease activity, while 78.3% (18/23) of the environmental isolates showed protease activity. Environmental isolates had a similar average phospholipase production than clinical isolates (Pz = 0.70 ± 0.08 and 0.77 ± 0.19, respectively). Conclusions: Our results suggest a similar pathogenic potential between clinical and environmental isolates, which may lead to infection of those who frequent pigeon environments, such as public squares, emphasizing that studies that evaluate the pathogenicity of environmental isolates of C. parapsilosis are still lacking in the literature.
Efeito da suplementação com vitamina D em pacientes com COVID-19: uma revisão da literatura
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-12-08) Pinheiro, Brenda Lorena Macena; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; Renata Kelly de Freitas Mano; Souza, Luanda Bárbara Ferreira Canário de; Morais, Tássia Loise Sousa Augusto de
O SARS-CoV-2, um vírus pertencente à classe do β-coronavírus, é responsável pela pandemia atual de Covid-19 e está envolvendo a ciência mundial em busca de tratamentos e profilaxia eficazes. O sistema imune inato é prejudicado com a deficiência da Vitamina D, sendo assim, predispõe pacientes infectados com infecções virais, como o Covid-19. A suplementação da vitamina D surge como uma alternativa adjuvante no tratamento do Covid-19. Dessa forma, nessa revisão foram analisados 764 artigos inicialmente nas bases de dados: PubMed e Science direct, foram utilizados durante as pesquisas os descritores: “Covid-19” AND “Vitamin D supplementation”. Após avaliação dos títulos, foram analisados 151 artigos e em seguida os resumos e texto completo dos artigos, restando 3 estudos. Os estudos divergiram com relação a dose, tipo de formulação e número de pacientes, no entanto todos apresentaram desfechos favoráveis nos pacientes que foram suplementados com vitamina D, como uma menor permanência em UTI de pacientes infectados com Covid-19. Os trabalhos incluídos revisados, mostraram evidências de que a vitamina D pode ser uma terapêutica eficaz como adjuvante no tratamento do Covid-19, apesar das limitações apresentadas em cada estudo.
Efeito do extrato de Eugenia uniflora sobre fatores de virulência e caracterização da ação antifúngica em isolados de Candida spp. oriundos da cavidade oral de receptores de transplante renal
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-06-10) Souza, Luanda Bárbara Ferreira Canário de; Chaves, Guilherme Maranhão; http://lattes.cnpq.br/1463249528959656; http://lattes.cnpq.br/0567484662111463; Padovan, Ana Carolina Barbosa; http://lattes.cnpq.br/7106567615656883; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos; http://lattes.cnpq.br/6990029952181366; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Langassner, Silvana Maria Zucolotto; http://lattes.cnpq.br/7390416147619446
A candidíase oral é uma importante manifestação clínica em receptores de transplante renal. Candida spp. possuem fatores de virulência que contribuem para o processo infeccioso, incluindo a capacidade de aderir a células epiteliais e de formar de biofilme em superfícies bióticas e abióticas. Devido ao limitado arsenal de antifúngicos disponíveis no mercado, as reações adversas e o surgimento de espécies resistentes, torna-se necessário encontrar novos antifúngicos que atuem em alvos alternativos, ou de forma sinérgica aos atuais antifúngicos e que possuam menor toxicidade. Nesse contexto, os produtos naturais têm ganhado importância. O extrato obtido a partir das folhas de Eugenia uniflora [acetona: água (7:3, v/v)] tem demonstrado atividade antifúngica contra Candida spp.. Portanto, este estudo objetivou avaliar o efeito do extrato de E. uniflora sobre fatores de virulência in vitro e caracterizar a ação antifúngica em isolados de Candida spp. oriundos da cavidade oral de receptores de transplante renal. O extrato de E. uniflora foi caracterizado por cromatografia líquida de alta eficiência e as cepas de Candida spp. pertencentes a um banco de microrganimos foram reativadas e utilizadas nas análises. A determinação da concentração inibitória mínima do extrato foi realizada pelo método de microdiluição em caldo, assim como ensaios de toxicidade frente a eritrócitos e células epiteliais bucais humanas (CEBH) foram realizados a partir da determinação do índice de hemólise e da contagem de 150 CEBH em microscópio óptico, respectivamente. Para os ensaios de virulência in vitro, as leveduras foram cultivadas na presença e ausência de 1000 µg/mL do extrato. A adesão foi quantificada usando o número de células de Candida spp. aderidas a 150 CEBH determinadas por microscópio óptico. A formação de biofilme foi avaliada usando duas metodologias: XTT (2,3-bis (2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil) -2H-tetrazólio-5-carboxanilida) e o ensaio do cristal violeta, sendo analisado posteriormente por microscopia eletrônica de varredura. A hidrofobicidade da superfície celular (HSC) foi quantificada com o teste de adesão microbiana a hidrocarbonetos. Realizaou-se análise in silico para predição de atividade antifúngica dos compostos majortitarios determinados no extrato. Determinou-se a CIM quando na presença de ergosterol exógeno, bem como em ambiente osmoprotegido por sorbitol (0,8 M). A ação do extrato na parede celular foi avaliada a partir do crescimento das células tratadas com extratdo de E. uniflora em Ágar Sabouraud Dextrose (ASD) acrescido de calcofluor, vermelho congo e dodecil sulfato de sódio (SDS). Avaliou-se a perda de integridade da membrana utilizandose a marcação com o iodeto de propídio (IP). A ação combinada do extrato de E. uniflora com o Fluconazol, a Micafungina e o Ácido gálico foi determinada pelo método checkerboard e por fim foi determinada a curva de morte de Candida spp. tratadas com o extrato de E. uniflora e em combinação em função do tempo. O extrato de E. uniflora foi capaz de inibir em 50% o crescimento das células de Candida spp. e possui dois compostos majoritários: miricitrina e ácido gálico. Além disso, mostrou-se não citotóxico aos eritrócitos e CEBH. Reduziu a adesão as CEBH e HSC para as espécies de Candida analisadas, e observou-se uma capacidade reduzida estatisticamente significativa para formar biofilmes usando os dois métodos de quantificação. A análise in silico demonstrou que não há alvos moleculares que correlacionem a miricitrina à ação antifúngica do extrato de E. uniflora, já o ácido gálico demonstrou ligação a enzima CPY51 presente na célula fúngica. O extrato aumentou discretamente as CIM quando realizado o ensaio de ligação ao ergosterol. Porém, no ensaio na presença do sorbitol, os valores de CIM para o extrato foram aumentados, sugerindo-se que um dos possíveis mecanismos de ação seja atuar na parede celular fúngica. O tratamento das células de Candida com o extrato conferiu resistência frente aos perturbadores de parede celular, e houve perda de integridade da membrana celular fúngica quando as células tratadas com o extrato foram coradas com IP. O extrato de E. uniflora apresentou ação sinérgica aditiva quando combinado com o Fluconazol e a Micafungina. Entretanto, a combinação com o ácido gálico apresentou um efeito indeterminado (sem interação). A curva de morte das células tratadas com o extrato demonstrou uma diminuição na contagem do número de UFC em 48 horas e a combinação do extrato de E. uniflora com o fluconazol resultou em uma queda significativa na contagem de UFC. O extrato de E. uniflora pode de alguma forma estar perturbando a membrana celular, tendo visto a perda de integridade da membrana verificada no ensaio com marcação com IP. Entretanto, aparentemente esse processo não se dá, exclusivamente, através da ligação direta ao ergosterol, ou somente pela inibição da enzima CYP51 (14 α-demetilase), ação atribuída ao ácido gálico nas análises in silico. O extrato interage em nível de parede celular fúngica, haja visto o aumento da CIM no ensaio com o sorbitol e a discreta diminuição de crescimento para algumas cepas no ensaio com os perturbadores de parede celular. O extrato de E. uniflora mostrou-se promissor como uma plausível alternativa de terapia combinada com o fluconazol para o tratamento de candidíase oral. Entretanto, mais análises devem ser realizadas para confirmação das evidências apresentadas pelos ensaios realizados quanto ao mecanismo de ação do extrato de E. uniflora.
Isolation, identification and phenotypic characterization of clinical isolates of the Sporothrix schenckii Complex
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2019-11-05) Costa, Alexandre Soares de Sena; Chaves, Guilherme Maranhão; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; Souza, Luanda Bárbara Ferreira Canário de
Sporotrichosis, caused by fungi belonging to the Sporothrix schenckii complex, is widely distributed around the globe, especially in tropical and subtropical regions. Traumatic inoculation is the usual route of acquisition. This infectious disease used to be restricted to farmers and armadillo’s hunters due to vegetable manipulation injuries. However, studies in Brazil have reported frequent outbreaks associated with feline transmission, characterizing sporotrichosis as a zoonotic infection. This study aimed to isolate, purify and evaluate in vitro virulence factors (colony growth and melanin production at different glucose concentrations), as well as, antifungal susceptibility testing to itraconazole (ITZ) and amphotericin B (AmB) of 40 clinical isolates obtained from patients living in Rio Grande do Norte state, Brazil. In our study, 75% of the patients were female and two clinical forms of infection were predominant, cutaneous-fixed and lymphocutaneous. We also report a case of primary pulmonary sporotrichosis leading to patient’s death. The molecular screening revealed that 12 strains were identified as S. brasiliensis. All the isolates were susceptible to both antifungal drugs tested, with MIC values ranging from 0.0312 to 0.5 μg/mL for ITZ and 0.125 and 1 μg/mL for AmB. There was no remarkable conclusion for colony growth, but a low number of strains produced melanin. Our study shows a prevalence of cases of sporotrichosis in female patients and S. brasiliensis as an etiological agent of infection in the region. In addition, the isolates demonstrated a satisfactory antifungal susceptibility profiling, with low MIC values to the antifungal drugs tested.

SIGAA

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