Programa de Pós-Graduação em Patologia Oral
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Navegando Programa de Pós-Graduação em Patologia Oral por Autor "Andrade, Ana Luiza Dias Leite de"
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Tese Análise do papel dos exossomos derivados das linhagens celulares SCC-15 e HSC-3 no processo de angiogênese tumoral(2016-02-18) Andrade, Ana Luiza Dias Leite de; Galvão, Hebel Cavalcanti; ; ; Costa, Antonio de Lisboa Lopes; ; Nonaka, Cassiano Francisco Weege; ; Colleta, Ricardo Della; ; Freitas, Roseana de Almeida;Os exossomos são vesículas extracelulares originadas por brotamento interno da membrana de endossomos tardios que representam uma eficiente forma de comunicação intercelular. Devido às suas múltiplas funções biológicas, o foco de alguns estudos atuais tem se concentrado na análise do seu papel no desenvolvimento do câncer, progressão da doença, invasão, angiogênese e formação de metástases tumorais. Nesta perspectiva, o presente estudo objetivou caracterizar os exossomos secretados por duas linhagens celulares de carcinomas epidermoide oral (CEO) (SCC-15 e HSC-3) e avaliar seus efeitos sobre uma linhagem de células endoteliais (HUVEC), em relação à sua capacidade de formação de estruturas vasculares, taxas de migração, proliferação e índices de apoptose/necrose. Médias significativamente maiores de células com potencial invasivo (p<0,0001) e migratório (p<0,0001) foram observadas para a linhagem HSC-3. Ultraestruturalmente, verificou-se que as partículas derivadas da linhagem SCC-15 exibiram morfologia arredondada e diâmetro inferior a 150 nm. Nenhuma diferença estatisticamente significativa foi revelada entre as linhagens celulares estudadas, considerando a quantificação de nanovesículas (p=0,2252) e tamanho exossomal (p=0,1765). Por imunofluorescência indireta, identificou-se que 22,15% dos exossomos secretados pelas células SCC-15 e 18,37% dos exossomos derivados da linhagem HSC-3 expressaram o anticorpo anti-Anexina. No que se refere aos ensaios funcionais com as HUVECs, o tratamento com exossomos derivados da linhagem SCC-15 induziu um aumento significativo da capacidade de formação de estruturas vasculares (p<0,0001), potencial migratório (p=0,0016) e taxa de apoptose (p<0,0001), enquanto que uma redução da proliferação celular foi apontada (p=0,0030). Por outro lado, o tratamento com exossomos secretados pela linhagem HSC-3 promoveu uma redução significativa da formação tubular (p<0,0001), motilidade (p=0,0042) e proliferação celular (p=0,0010), ao passo que nenhuma diferença estatisticamente significativa foi observada no índice apoptótico (p=0,3004). Os resultados do presente estudo indicaram a participação dos exossomos derivados de linhagens de CEO no processo de angiogênese tumoral, onde as células SCC-15 exibiram forte resposta proangiogênica e a linhagem HSC-3 demonstrou efeito antiangiogênico.Dissertação Estudo imunoistoquímico das subpopulações de macrófagos em cistos radiculares e granulomas periapicais de acordo com aspectos clínicos e morfológicos(2018-02-23) França, Glória Maria de; Galvão, Hebel Cavalcanti; ; ; Andrade, Ana Luiza Dias Leite de; ; Santos, Pedro Paulo de Andrade;Introdução: Os cistos radiculares (CRs) e os granulomas periapicais (GPs) se desenvolvem em resposta aos mediadores inflamatórios da necrose da polpa. Os macrófagos desempenham um importante papel na etiopatogenia dessas lesões e estão envolvidos na resposta protetora do hospedeiro, bem como, na perpetuação das reações inflamatórias. A infiltração das subpopulações de macrófagos M1 e M2 dentro dos sítios de inflamação crônica permite a fagocitose de agentes estranhos, a liberação de mediadores químicos e ainda podem atuar como células apresentadoras de antígenos. Objetivo: Identificar as subpopulações de macrófagos M1/M2 nos CRs e GPs e relacioná-los com aspectos clínicos e morfológicos. Material e Métodos: Foram realizadas análises clínica, histopatológica e imunoistoquímica em 30 CRs e 30 GPs. A subpopulação de macrófagos M1 foi avaliada pelos percentuais de imunomarcação do CD68 associado à citocina pró-inflamatória TNF-α e a subpopulação de macrófagos M2, pelo seu anticorpo específico CD163. Características clínicas, radiográficas, sintomatologia, tratamento, parâmetros morfológicos das lesões foram coletados e para análise estatística foi adotado um nível de significância de 95%. Resultados: A razão das células CD68+/CD163+ foi maior nos CRs (mediana = 1,22; p = 0,002), somado a isso, os maiores escores de imunoexpressão pelo TNF-α foram encontrados nos CRs (p = 0,018); Nos GPs, a razão CD68+/CD163+ foi menor e associado com uma maior imunoexpressão das células CD163+ (mediana = 1,02; p<0,001). Além disso, as células CD68+ tiveram maiores percentuais de imunoexpressão em CRs com tamanhos menores (p = 0,034). Conclusão: A maior imunoexpressão do CD68 associado ao TNF-α em CRs sugere a maior diferenciação para um fenótipo M1 neste tipo de lesão. A maior imunoexpressão do CD163 nos GPs configurou a maior diferenciação para um fenótipo M2. Portanto, o estado pró-inflamatório promovido pelos macrófagos M1 está relacionado com o surgimento e manutenção dos CRs, por outro lado, o estado imunomodulatório dos macrófagos M2 está relacionado com o desenvolvimento dos GPs.Dissertação Expressão imuno-histoquímica de IL-17, TGF-β1 e FOXP3 em ganulomas periapicais, cistos radiculares e cistos radiculares residuais(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2012-02-27) Andrade, Ana Luiza Dias Leite de; Galvão, Hébel Cavalcanti; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4794937Z9; ; http://lattes.cnpq.br/9269247386262941; Rosa, Marize Raquel Diniz da; ; http://lattes.cnpq.br/2781775396459009; Costa, Antônio de Lisboa Lopes; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786083Z7&dataRevisao=nullLesões periapicais crônicas são condições inflamatórias dos tecidos perirradiculares consideradas sequelas diretas de processos infecciosos resultantes da necrose pulpar e consequente progressão para a região periapical. A participação da resposta imunológica e da reabsorção óssea na formação destas lesões tem sido bastante investigada, de modo que diversos tipos celulares e citocinas foram apontados como colaboradores deste processo. Nesta perspectiva, o presente estudo objetivou avaliar a expressão imuno-histoquímica da IL- 17, TGF-β1 e FoxP3 em granulomas periapicais (GPs), cistos radiculares (CRs) e cistos radiculares residuais (CRRs), buscando um melhor entendimento sobre a etiopatogênese destas periapicopatias. Para tanto, foram selecionados 20 casos de GPs, 20 de CRs e 10 de CRRs para serem submetidos à análise morfológica e imuno-histoquímica para os biomarcadores supracitados, sendo esta última realizada quantitativamente através de escores e percentuais médios de imunomarcação para a análise da IL-17 e do TGF-β1, enquanto que para o FoxP3 foram contados apenas os linfócitos positivos. Os resultados demonstraram diferenças estatisticamente significativas entre as imunoexpressões do TGF-β1 e do FoxP3 em relação as lesões periapicais pesquisadas (p = 0,002; p < 0,001, respectivamente), mas não entre a IL-17 e estas (p = 0,355). Além disso, a análise dos linfócitos FoxP3-positivos revelou diferenças estatísticas significativas no que se refere à intensidade do infiltrado inflamatório (p = 0,003) e também quanto à espessura do revestimento epitelial (p = 0,009). Por fim, observou-se nos casos de GPs, forte correlação positiva entre a quantidade de linfócitos FoxP3-positivos e a imunoexpressão do TGF-β1 (r = 0,755; p < 0,001), assim como moderada correlação positiva entre as imunoexpressões da IL-17 e do TGF-β1 (r = 0,503; p = 0,024). Destarte, pode-se concluir que interações entre células Th17 e Treg parecem ser estabelecidas no local da agressão, sugerindo a participação de citocinas tanto próinflamatórias como imunorregulatórias na patogenia das lesões periapicaisDissertação Imunossupressão das proteínas XPF e XRCC1 em carcinoma epidermoide de língua oral e lábio inferior(2018-02-23) Moreira, Deborah Gondim Lambert; Freitas, Roseana de Almeida; ; ; Andrade, Ana Luiza Dias Leite de; ; Souza, Lelia Batista de;O sistema de reparo do DNA envolve genes e proteínas essenciais à manutenção da integridade do genoma e consequente controle de diversos processos celulares. Alterações nesses genes e proteínas estão envolvidas no desenvolvimento de tumores, em sua evolução e na resistência a tratamentos radio e quimioterápicos. O objetivo deste trabalho foi analisar a imunoexpressão das proteínas de reparo do DNA, XPF e XRCC1 em carcinoma epidermoide de lábio inferior (CELI) e de língua oral (CELO) e investigar possíveis associações com os parâmetros clínicos e histopatológicos. Foram selecionados 80 casos de CELI e CELO analisados morfologicamete por meio dos sistemas de gradação propostos por BrandweinGensler et al. (2005) e Almangush et al. (2014). A expressão imuno-histoquímica foi realizada de forma semi-quantitativa, utilizando para a análise estatística os testes de Quiquadrado, ou quando aplicável, o teste exato de Fisher, para investigar a associação entre as expressões das proteínas com as características clínico-patológicas. A alta expressão nuclear de XPF foi observada em 72,5% dos casos de CELO e em 70% dos casos de CELI. Quanto à imunoexpressão de XRCC1 nos casos de CELO, alta expressão foi observada em 60% dos casos e nos CELI 70% apresentaram alta expressão nuclear, não sendo observada expressão citoplasmática. Foram observadas associações estatisticamente significativas (p < 0,05) entre a imunoexpressão de proteínas com alguns parâmetros clínicos e histopatológicos, no entanto, não se verificaram associações com o prognóstico dos pacientes. A alta expressão das proteínas XPF e XRCC1 nos casos de CELO e CELI sugere sua importância no desenvolvimento e progressão destes tumores. Os resultados desta pesquisa indicam que a imunoexpressão dessas proteínas não está associada a parâmetros clínicos e histopatológicos determinantes para o comportamento biológico tumoral.