Navegando por Autor "Morais, Ana Heloneida de Araújo"
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Artigo Activity toward bruchid pest of a kunitz-type inhibitor from seeds of the algaroba tree (prosopis juliflora D.C.)(Pesticide Biochemistry and Physiology, 2002) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Oliveira, Adeliana; Pereira, Railene; Lima, Liziane; Franco, Octávio Luiz; Bloch Júnior, Carlos; Sá, Maria Fátima Grossi de; Sales, MaurícioA proteinaceous inhibitor with high activity against papain was found in seeds of the xerophytic algaroba tree (Prosopis julifora). The proteinase inhibitor Pj was purified using Sephacryl S-200 gel filtration followed by reverse-phase high-performance liquid chromatography on a Vidac 18 TP. Inhibitor Pj showed a Mr of 20,000 on sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis and a Mr of 19.2K by mass spectrometry. The inhibition of papain by the Pj inhibitor was the noncompetitive type, with a Ki value of 0.59 3 1029 M. The gelatinase activity of papain was strongly inhibited by Pj too. The N-terminal amino acid sequence of the Pj inhibitor showed homology with the N-terminal amino acid sequence of the Kunitzproteinase inhibitor family. Pj was strongly effective against digestive proteinases from bean weevil Acanthoscelides obtectus and cowpea weevil Callosobruchus maculatus and was moderately active toward midgut proteinases from pod weevil Mimosestes mimosae and Mexican bean weevil Zabrotes subfasciatus. The data shown here suggest that the protein present in algaroba seeds is involved with defense responses to insects and may be an important tool to be used in engineering plants resistant to bean weevilArtigo Adipocytes and intestinal epithelium dysfunctions linking obesity to inflammation induced by high glycemic index pellet-diet in wistar rats(Bioscience Reports, 2018-06) Maciel, Bruna Leal Lima; Luz, Anna Beatriz Santana; Figueredo, Júlia Braga dos Santos; Salviano, Bianca Damásio Pereira Dantas; Aguiar, Ana Júlia Felipe Camelo; Pinheiro, Luiza Gabriella Soares Dantas; Krause, Matheus Felipe Dantas; Camillo, Christina da Silva; Ladd, Fernando Vagner Lobo; Bortolin, Raul Hernandes; Silbiger, Vivian Nogueira; Morais, Ana Heloneida de AraújoWe investigated the inflammatory effect of a pellet-diet with high glycemic index and load (HGLI) on the histological organization of adipocytes, intestinal epithelium, and fat in liver and pancreas in adult male Wistar rats. Two groups (n=10) received for 17 weeks: (1) HGLI diet or (2) Standard diet (LabinaR ). Histological analyses of adipose tissue, jejunum, liver, and pancreas were performed. Stereology analysis, visceral adiposity index, gene expression, and immunohistochemistry of tumor necrosis factor-α (TNF-α) in visceral adipose tissue and plasma TNF-α were also assessed. The HGLI diet-induced hypertrophy of adipocytes with adipocyte volume density equal to 97.0%, cross-sectional area of adipocytes equivalent to 1387 μm2 and a total volume of adipocytes of 6.97 cm3 an elevation of 8%, 25%, and 58%, respectively. Furthermore, the HGLI diet increased liver and pancreatic fat deposition, altered and inflamed the intestinal epithelia, and increased TNF-α gene expression (P=0.014) with a positive immunostaining in visceral adipose tissue and high plasma TNF-α in comparison with standard diet. The results suggest that this diet was able to generate changes commonly caused to solid diets with high fat or fructose-rich beverages. To the best of our knowledge, this is the first report in the literature concerning the properties of low-cost, sucrose-rich pellet-diet presenting high glycemic index and high glycemic load efficient on the development of obesity complications in Wistar rats that were subjected to diet-induced obesity. Therefore, the HGLI pellet-diet may be considered an effective tool to be used by the scientific community in experimental researchTese Alteração em hormônios de saciedade induzida por dieta e segurança de uso de inibidor de tripsina purificado de tamarindo com potencial anti-inflamatório em modelo experimental de obesidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-08-25) Lima, Vanessa Cristina Oliveira de; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Uchoa, Adriana Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; ; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; ; http://lattes.cnpq.br/5602683234578650; Maia, Juliana Kelly da Silva; ; http://lattes.cnpq.br/9575492220366110; Moreira, Ana Vladia Bandeira; ; http://lattes.cnpq.br/6652079503230619; Davim, André Luiz Silva; ; http://lattes.cnpq.br/3809975612215286; Machado, Richele Janaina Araújo; ; http://lattes.cnpq.br/1352905640097175A obesidade é uma doença de origem multifatorial, de difícil manejo e que aumenta o risco de outras doenças. Na busca de adjuvantes à terapia clássica de mudança de estilo de vida, os inibidores de tripsina extraídos de tamarindo têm se destacado. Os modelos experimentais de obesidade objetivam mimetizar um padrão alimentar altamente desequilibrado. Para entender como esse padrão altera o equilíbrio hormonal que regula o metabolismo energético, avaliou-se o efeito de uma dieta com alto índice e carga glicêmica (HGLI) no estado nutricional, colecistoquinina (CCK) e leptina plasmáticas e expressão de seus genes no intestino delgado, tronco encefálico e gordura visceral. Ratos Wistar machos (n = 10) foram divididos em dois grupos, um recebendo dieta HGLI e outro dieta padrão, ambos ad libitum, por 17 semanas. Os animais que receberam dieta HGLI aumentaram o Índice de Massa Corporal (IMC) e as concentrações circulantes de leptina e sua expressão gênica. Não houve aumento da CCK plasmática, mas o grupo que recebeu a dieta HGLI apresentou maior expressão de mRNA de CCK1R no intestino delgado. Os resultados sugerem que a leptina estimulou a expressão do gene CCK1R, independentemente do aumento plasmático do CCK, gerando uma ação sinérgica induzida pelo receptor, que pode provocar saciedade pós-prandial. Para entender como inibidores de tripsina podem auxiliar no tratamento da obesidade, realizou-se uma revisão narrativa. Foram encontrados 12 estudos que envolviam a atuação de inibidores de tripsina na saciedade em modelos experimentais, cujo principal mecanismo de ação convergiu para a modulação, principalmente, de CCK. Além disso, observou-se que os inibidores de tripsina apresentam capacidade de atuar sobre parâmetros bioquímicos relacionados à obesidade, emergindo como moléculas promissoras. O Inibidor de Tripsina de Tamarindo tem sido extensamente estudado em modelo de obesidade, mostrando diversas frentes de atuação, tanto em seu estado isolado (ITT), quanto purificado (ITTp). ITT já havia sido analisado do ponto de vista toxicológico. Dessa forma, neste estudo avaliou-se o ITTp quanto a possíveis efeitos tóxicos, com enfoque nos órgãos envolvidos no seu metabolismo (fígado e pâncreas) e os tecidos mais afetados pelo modelo de obesidade (intestino e tecido adiposo visceral). Para tal, o ITTp foi obtido e ratos Wistar (n = 15) foram divididos em grupo controle, alimentado com dieta padrão; grupo com obesidade, alimentado com dieta HGLI; grupo experimental, alimentado com HGLI e tratado com ITTp. O tratamento durou 10 dias. Foram realizadas análises histopatológicas e estereológicas dos tecidos. Observou-se que a administração de ITTp não afetou parâmetros estereológicos dos tecidos analisados, atuando ainda com potencial antiinflamatório. Tal achado leva a crer que ITTp, além de suas atividades biológicas, apresenta segurança quanto ao uso.Dissertação Alvos terapêuticos da obesidade e potencial in silico do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo como precursor de peptídeos inibidores de lipase(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-05-25) Medeiros, Wendjilla Fortunato de; Morais, Ana Heloneida de Araújo; https://orcid.org/0000-0002-6460-911X; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; http://lattes.cnpq.br/5685354458590232; Serquiz, Alexandre Coelho; Vieira, Davi Serradella; https://orcid.org/0000-0001-8353-6262; http://lattes.cnpq.br/4185159774625471A obesidade é uma doença multifatorial com inúmeros alvos terapêuticos, a qual consiste em um fator de risco para o desenvolvimento de diversas doenças crônicas não transmissíveis. Sendo assim, este estudo objetivou identificar os alvos terapêuticos da obesidade, avaliados in silico, por meio de uma revisão sistemática (RS) e analisar o potencial de peptídeos derivados do modelo teórico do inibidor de tripsina purificado de sementes de tamarindo (ITTp 56/287) interagirem in silico com a Lipase Pancreática Humana (LPH). Primeiramente a RS foi norteada pela seguinte pergunta de pesquisa “Quais os alvos terapêuticos empregados no tratamento da obesidade em estudos in sílico?”, baseada no acrônimo PECo (P, problema; E, exposição; Co, contexto). O protocolo de RS foi desenvolvido e registrado no PROSPERO (CRD42022353808) conforme o Preferred Reporting Items Checklist for Systematic Review and Meta-Analysis Protocols (PRISMA-P) e para a RS foi seguido o PRISMA. A seleção dos estudos foi realizada em concordância com os critérios de elegibilidade, nas seguintes bases de dados: PubMed, ScienceDirect, Scopus, Web of Science, BVS e EMBASE. A estratégia de busca retornou 938 artigos, 9 foram incluídos na pesquisa, resultando na identificação de seis alvos terapêuticos estudados in silico e reavaliados in vivo, sendo cinco estruturas experimentais e teórica. A metodologia utilizada nos estudos foi a do docking molecular e o alvo mais estudado foi a Lipase Pancreática Humana (LPH) (n = 4). A ausência de detalhes metodológicos levou mais de 50% dos trabalhos a serem classificados com “risco de viés incerto” em sete dos onze pontos avaliados. Para os estudos de simulação computacional foi realizada a hidrólise in sílico do ITTp 56/287 (ExPASy PeptideCutter), sendo selecionados cinco peptídeos para modelagem (trRosetta), avaliação do potencial de bioatividade (PeptideRanker), penetração celular (CellPPD) e meia-vida (HLP). Estudos de docking molecular foram conduzidos entre o ITTp 56/287, os peptídeos selecionados e o fármaco Orlistate (controle) para identificação da interação com a LPH (PDB ID:1LPB). O peptídeo (PEP2) que seguiu para o estudo de Dinâmica Molecular (DM) com a LPH, conduzido no software GROMACS, foi classificado como potencialmente bioativo, apresentou alta estabilidade, maior meia-vida em ambiente intestinal simulado (1.863 segundos) e interagiu no estudo de docking (docking score -136.13) com aminoácidos de interesse presentes no bolso catalítico e tampa hidrofóbica do alvo. Na DM entre o PEP2 e a LPH, obteve-se uma energia potencial de interação (EPI) de -628,44 kJ mol-1, onde se destacam quatro resíduos de aminoácidos do PEP2 que foram responsáveis por 74,3% da EPI (Asp3, Ser1, Asp4 e Asp5). Conforme verificado, o ITTp pode ser fonte de novos peptídeos bioativos, em especial o PEP2, que se mostrou um candidato promissor a ser estudado no campo da terapia baseada em peptídeos como inibidor de LPH, fornecendo base para futuros estudos in vitro e in vivo. Com isso, persistindo a obesidade como um problema de saúde pública e frente ao insucesso no controle, é evidente a importância da associação de metodologias in silico nos estudos de potenciais candidatos a alvos drogáveis, bem como na busca por novos agentes terapêuticos.TCC Análise Morfológica e Detecção de TNF- α em Tecido Adiposo Visceral de Ratos Wistar com Obesidade Induzida por Dieta(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2017-12-04) Salviano, Bianca Damásio Pereira Dantas; Morais, Ana Heloneida de AraújoFatores como a adoção de um novo padrão dietético, maior oferta de alimentos e principalmente o aumento do consumo das dietas "ocidentais" combinado ao sedentarismo e mudança do estilo de vida, vêm contribuindo para o rápido aumento da prevalência global da obesidade. Diante disso, a padronização de uma dieta para indução da obesidade e seus efeitos aliados se faz necessária para buscar compreender suas vias de atuação. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos de uma dieta com alto teor de carboidrato simples sobre fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α) e alterações morfológicas no tecido adiposo visceral em modelo animal. Utilizou-se ratos machos da linhagem Wistar, (n=10), divididos em dois grupos, chamados de controle e experimental. Ao primeiro, foi ofertada a dieta padrão Labina®, e ao segundo, a dieta experimental (HGLI), ambas ad libitum, por 17 semanas. Foi coletado após as 17 semanas o tecido adiposo visceral perirenal, retroperitoneal e epididimal para que fosse realizada sua avaliação morfológica, assim como, para detectar TNF-α. Os ratos alimentados com a dieta experimental apresentaram quanto à análise morfológica, hipertrofia, maior coalescência, extravasamento de plasma; e intensa marcação de TNF-α nos adipócitos após a análise imunohistoquímica. Dessa forma, a dieta HGLI foi capaz de provocar alterações no tecido adiposo visceral, mostrando-se eficiente para estudos da fisiopatologia que envolvem complicações associadas à obesidade, sendo um modelo de dieta próximo da gênese da obesidade em humanos.Artigo Analysis of an alternative food, soy paçoca, preparation: chemical composition, anti-nutricional constituents and nutricional evaluation(Journal of Food Technology, 2003) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Cruz, Ana; Pereira, Railene; Leite, Edda; Lima, Dilma; Sales, Maurício Pereira deThe chemical composition of an alternative Brazilian food preparation showed that this product had a carbohydrate content of 45.90% and a protein content of 38.92%. Anti-nutritional factors were assayed in soya "pacoca" protein fractions. Human salivary alpha -amylase was inhibited with salivary amylase inhibitor ( alpha -IA) level of 437.5 micro g of inhibitor to 1.0 mg of protein fractions. Trypsin was inhibited with trypsin inhibitor activities level (TIA) of 57 micro g of inhibitor to 1.0 g of protein fractions. Nutritional evaluation of the soya "pacoca" showed a digestibility of 66.9% compared to 90.0% for casein. The PER of soya "pacoca" was 1.65 and was 4.01 for casein. The NPR of the food preparation was 2.85 and the test diet was 3.02. Indices calculated for the soya "pacoca" food preparation indicated that it was less efficient in supporting growth and maintenance of the weanling ratsArtigo Anti-Inflammatory protein isolated from tamarind promotes better histological aspects in the intestine regardless of the improvement of intestinal permeability in a preclinical study of diet-induced obesity(Nutrients, 2022) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Lima, Mayara S. R.; Gonçalves, Catarina; D. Neto, Mafalda; Macedo, Maria Helena; Queiroz, Jaluza L. C. de; Silva, Valéria C. da; Costa, Izael de S.; Camillo, Christina da S.; Santos, Pedro Paulo de A.; Lima, Aldo A. M.; Pastrana, Lorenzo; Maciel, Bruna L. L.; https://orcid.org/0000-0002-6460-911XObesity is associated with metabolic and physiological effects in the gut. In this study, we evaluated the anti-inflammatory effect of trypsin inhibitor isolated from tamarind seeds (TTI) in vitro (interaction with lipopolysaccharide (LPS) and inhibitory activity against human neutrophil elastase (HNE)), and using intestinal co-cultures of Caco-2:HT29-MTX cell lines inflamed with TNF α (50 ng/mL) and a Wistar rat model of diet-induced obesity (n = 15). TTI was administered to animals by gavage (10 days), and the treated group (25 mg/kg/day) was compared to animals without treatment or treated with a nutritionally adequate diet. In the in vitro study, it showed inhibitory activity against HNE (93%). In co-cultures, there was no protection or recovery of the integrity of inflamed cell monolayers treated with TTI (1.0 mg/mL). In animals, TTI led to lower plasma concentrations of TNF-α and IL-6, total leukocytes, fasting glucose, and LDL-c (p < 0.05). The intestines demonstrated a lower degree of chronic enteritis, greater preservation of the submucosa, and greater intestinal wall thickness than the other groups (p = 0.042). Therefore, the better appearance of the intestine not reflected in the intestinal permeability added to the in vitro activity against HNE point to possibilities for new studies and applications related to this activity.Artigo Anti-obesity therapeutic targets studied in silico and in vivo: a systematic review(International Journal of Molecular Sciences, 2024-04) Maia, Juliana Kelly da Silva; Medeiros, Wendjilla Fortunato de; Gomes, Ana Francisca Teixeira; Aguiar, Ana Júlia Felipe Camelo; Queiroz, Jaluza Luana Carvalho de; Bezerra, Ingrid Wilza Leal; Piuvezam, Grasiela; Morais, Ana Heloneida de AraújoIn the age of information technology and the additional computational search tools and software available, this systematic review aimed to identify potential therapeutic targets for obesity, evaluated in silico and subsequently validated in vivo. The systematic review was initially guided by the research question “What therapeutic targets have been used in in silico analysis for the treatment of obesity?” and structured based on the acronym PECo (P, problem; E, exposure; Co, context). The systematic review protocol was formulated and registered in PROSPERO (CRD42022353808) in accordance with the Preferred Reporting Items Checklist for Systematic Review and Meta-Analysis Protocols (PRISMA-P), and the PRISMA was followed for the systematic review. The studies were selected according to the eligibility criteria, aligned with PECo, in the following databases: PubMed, ScienceDirect, Scopus, Web of Science, BVS, and EMBASE. The search strategy yielded 1142 articles, from which, based on the evaluation criteria, 12 were included in the systematic review. Only seven these articles allowed the identification of both in silico and in vivo reassessed therapeutic targets. Among these targets, five were exclusively experimental, one was exclusively theoretical, and one of the targets presented an experimental portion and a portion obtained by modeling. The predominant methodology used was molecular docking and the most studied target was Human Pancreatic Lipase (HPL) (n = 4). The lack of methodological details resulted in more than 50% of the papers being categorized with an “unclear risk of bias” across eight out of the eleven evaluated criteria. From the current systematic review, it seems evident that integrating in silico methodologies into studies of potential drug targets for the exploration of new therapeutic agents provides an important tool, given the ongoing challenges in controlling obesityArtigo Anti-TNF-α agent tamarind kunitz trypsin inhibitor improves lipid profile of Wistar rats presenting dyslipidemia and diet-induced obesity regardless of PPAR-γ induction(Nutrients, 2019) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Lima, Vanessa Cristina Oliveira de; Costa, Izael Souza; Luz, Anna Beatriz Santana; Ladd, Fernando Vagner Lobo; Serquiz, Alexandre Coelho; Bortolin, Raul Hernandes; Silbiger, Vivian Nogueira; Maciel, Bruna Leal Lima; Santos, Elizeu Antunes dos; https://orcid.org/0000-0002-6460-911XThe increasing prevalence of obesity and, consequently, chronic inflammation and its complications has increased the search for new treatment methods. The effect of the purified tamarind seed trypsin inhibitor (TTIp) on metabolic alterations in Wistar rats with obesity and dyslipidemia was evaluated. Three groups of animals with obesity and dyslipidemia were formed, consuming a high glycemic index and glycemic load (HGLI) diet, for 10 days: Obese/HGLI diet; Obese/standard diet; Obese/HGLI diet + TTIp (730 µg/kg); and one eutrophic group of animals was fed a standard diet. Rats were evaluated daily for food intake and weight gain. On the 11th day, animals were anesthetized and sacrificed for blood and visceral adipose tissue collection. TTIp treated animals presented significantly lower food intake than the untreated group (p = 0.0065), TG (76.20 ± 18.73 mg/dL) and VLDL-C (15.24 ± 3.75 mg/dL). Plasma concentrations and TNF-α mRNA expression in visceral adipose tissue also decreased in obese animals treated with TTIp (p < 0.05 and p = 0.025, respectively) with a negative immunostaining. We conclude that TTIp presented anti-TNF-α activity and an improved lipid profile of Wistar rats with dyslipidemia and obesity induced by a high glycemic index and load diet regardless of PPAR-γ induction.Artigo Artificial dyes: health risks and the need for revision of international regulations(Food Reviews International, 2021-07) Maciel, Bruna Leal Lima; Mota, Isadora Gomes Cavalcante; Neves, Renata Alexandra Moreira das; Nascimento, Sara Sayonara da Cruz; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Passos, Thaís SouzaA narrative review was performed based on international regulations and health risks associated to artificial dyes’ consumption in countries as the United State, European Union, Australia, New Zealand, Japan, Brazil, China, and India. Publications indicate that synthetic dyes can cause adverse effects. Some countries carry out constant legislation reviews to exclude or reduce the food dyes’ acceptable daily intake (ADI). The United States and India are more rigid, permitting, respectively, nine and eight colorants, and EU countries frequently altered or recommend a temporary ADI. Others, such as Brazil, need to review the substance’s permission to guarantee industrialized foods’ safe consumptionTese Aspectos funcionais de peptídeos vegetais com efeito anti-inflamatório na obesidade e avaliação estrutural do inibidor de tripsina kunitz de sementes de tamarindo(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-10-25) Medeiros, Amanda Fernandes de; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Maciel, Bruna Leal Lima; 96256192320; http://lattes.cnpq.br/5790541670952158; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; http://lattes.cnpq.br/9221417221401426; Oliveira, Hermógenes David de; http://lattes.cnpq.br/4151792037839111; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; http://lattes.cnpq.br/2929963416385218; Machado, Richele Janaina Araújo; http://lattes.cnpq.br/1352905640097175; Lima, Severina Carla Vieira Cunha; http://lattes.cnpq.br/8818927353248941A inflamação subclínica no sobrepeso e na obesidade altera diversas vias metabólicas, com reforço positivo para o acúmulo de mais tecido adiposo e alteração no metabolismo energético. Diversos estudos têm avaliado o efeito anti-inflamatório e imunomodulador de proteínas hidrolisadas e peptídeos vegetais, sendo necessário, contudo, explorar os mecanismos de ação desses efeitos. Dessa maneira, no primeiro capítulo desta tese, foi apresentada na revisão narrativa a compreensão dos mecanismos de ação de proteínas hidrolisadas e peptídeos vegetais sobre a inflamação acometida pelo excesso de tecido adiposo. Para isso, realizou-se uma busca nas bases de dados, selecionando estudos que envolviam vias e respostas metabólicas alvos de proteínas hidrolisadas ou peptídeos de origem vegetal. Viu-se que os mecanismos perpassam a inibição da via NF-B, redução do estresse oxidativo, estímulo à via da PI3K-AKT e de enzimas relacionadas com a detoxificação (superóxido dismutase e catalase), assim, culminando na redução de citocinas e adipocinas inflamatórias, bem como a polarização de macrófagos para o fenótipo M2. No segundo capítulo foram apresentados os estudos in vitro e de simulação computacional (in silico) com o inibidor de tripsina purificado de sementes de tamarindo (Tamarindus indica L.) (ITTp). Essa proteína tem sido estudada in vitro e em estudos préclínicos para o tratamento da obesidade, de suas complicações e de comorbidades associadas. O ITTp foi sequenciado de novo por MALDI-TOF/TOF, foi obtida a sua modelagem por homologia e avaliada a interação com a enzima tripsina (PDB ID 2PTN) por meio de simulação de dinâmica molecular (DM) em condições controladas de temperatura, pressão e presença de água. Foram identificados 75 resíduos de aminoácidos adicionais da sequência do ITTp. A modelagem por homologia foi realizada pelo CONCOORD e validada pelo MolProbity e as quatro melhores conformações da modelagem foram submetidas à DM. A conformação n° 287 do modelo nº 56 foi selecionada, considerando a análise RMSD e a energia de interação (-301,0128 kcal.mol1 ). Os resíduos Ile (54), Pro (57), Arg (59), Arg (63) e Glu (78) do ITTp apresentaram menor energia de interação e por isso maior interação com a enzima tripsina (PDB ID 2PTN). Dentre esses, os resíduos de Arg (59 e 63) estavam, principalmente, envolvidos em seu mecanismo de ligação de modo eletrostático. Esses resultados favorecem a continuidade de estudos com o ITTp para aplicações em estudos pré-clínicos e clínicos na área de saúde, visando contribuir no controle de graves problemas de saúde pública, como a obesidade. Por fim, considerando os potenciais alvos moleculares terapêuticos apontados nas vias metabólicas inflamatórias para peptídeos vegetais no tratamento da obesidade, revelados por meio da revisão narrativa, além do sequenciamento, modelagem e dinâmica molecular do ITTp com a tripsina, por meio dos estudos in silico, esta tese aprofunda os conhecimentos sobre o ITTp e gera suporte para estudos futuros.Artigo Assessment of acute toxicity of crude extract rich in carotenoids from Cantaloupe melon (Cucumis melo L.) and the gelatin-based nanoparticles using the zebrafish (Danio rerio) model(Food and Chemical Toxicology, 2023-11) Maia, Juliana Kelly da Silva; Pais, Tatiana dos Santos; Luchiari, Ana Carolina; Souza, Augusto Monteiro de; Medeiros, Isaiane; Silva, Maria Gabriela Ferreira Rocha; Santos, Yohanna Layssa dos; Passos, Thaís Souza; Morais, Ana Heloneida de AraújoCantaloupe melon is known for its carotenoid-rich orange pulp. However, carotenoids are sensitive to oxygen, light, and heat, potentially reducing their benefits. Nanoencapsulation can preserve these benefits but raises concerns about toxicity. We aimed to assess the safety and bioactive potential of crude extract-rich carotenoids (CE) and nanoparticles based on gelatin loaded with CE (EPG) by investigating parameters such as cardio or neurotoxicity, especially acute toxicity. EPG was obtained by O/W emulsification and characterized by different methods. Zebrafish embryos were exposed to CE and EPG at 12.5 mg/L and 50 mg/L for 96h and were investigated for survival, hatching, malformations, and seven days post fertilization (dpf) larvae’s visual motor response. Adult fish underwent behavioral tests after acute exposure of 96h. CE and EPG showed no acute toxicity in zebrafish embryos, and both improved the visual motor response in 7dpf larvae (p = 0.01), suggesting the potential antioxidant and provitamin A effect of carotenoids in cognitive function and response in the evaluated model. Adult fish behavior remained with no signs of anxiety, stress, swimming pattern changes, or sociability that would indicate toxicity. This study highlights the safety and potential benefits of carotenoids in zebrafish. Further research is needed to explore underlying mechanisms and long-term effectsArtigo Atividade antitríptica de proteínas em polpas e sementes de frutas tropicais(Revista Brasileira de Fruticultura, 2014-06) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Bezerra, Ágnes Denise de Lima; Barbosa, Claudia Renata Montenegro; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Serquiz, Alexandre CoelhoA alimentação saudável e diversificada é essencial para a manutenção da saúde física e mental, e apesar de o perfil alimentar atual valorizar a praticidade do comer, nota-se que a população está consumindo, de forma crescente, frutas, tanto na forma in natura como na forma de sucos. No entanto, o consumo de certas frutas in natura ocorre acompanhado da ingestão de suas sementes, cascas ou mesmo outras partes, podendo existir fatores antinutricionais, moléculas e/ou compostos que podem interferir na biodisponibilidade e/ou digestibilidade de nutrientes, tais como os inibidores de tripsina. Tais inibidores podem prejudicar o aproveitamento de proteínas presentes nos alimentos, porém estudos recentes vêm sendo divulgados, demonstrando também os efeitos benéficos dos mesmos. Este estudo teve como objetivo avaliar inibidores de tripsina nos extratos aquosos das frutas: goiaba (Psidium guajava L), das variedades Kumagai (branca) e Paluma (vermelha); maracujá- amarelo (Passiflora edulis f.) e melancia (Citrullus vulgaris Schrad). Para tal, foi realizada a detecção da presença da atividade antitríptica e a dosagem de proteínas solúveis. Em todos os extratos analisados, foi detectada atividade inibitória de tripsina, bem como de proteínas solúveis. Assim, a inibição pode ser explicada pela presença de inibidores proteicos, pois, nos extratos de sementes, em SDS-PAGE, foi possível visualizar um largo espectro de bandas proteicas. Vale ressaltar que, no estudo, as bandas proteicas que coincidem com as massas moleculares dos inibidores de tripsina não apareceram de forma majoritária, demonstrando que os extratos de sementes, provavelmente, possuem inibidor proteico, no entanto em pouca quantidade, justificando a baixa atividade antitríptica (1,36 a 15,15 UI / mg de peso seco), também apresentada pelos extratos de polpa. Portanto, tendo em vista o consumo recomendado das frutas, incluindo goiaba, maracujá e melancia, possivelmente, esta atividade inibitória esteja mais relacionada a benefícios do que a prejuízos à saúde, enfatizando, entretanto, o cuidado com o consumo de quantidades elevadas de sementes presentes e consumidas nestas frutasArtigo Atividade antitríptica em semente e produto alimentício de Chia (Salvia Hispanica L.)(DEMETRA: Alimentação, Nutrição & Saúde, 2017-03) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Souza, Ana Paula Araújo de; Nascimento, Lorena Maria Araújo Marinheiro; Lima, Vanessa Cristina Oliveira de; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Santos, Elizeu Antunes dosObjetivo: Este estudo objetiva detectar a atividade antitríptica em semente e farinha comerciais de chia e isolar um inibidor de tripsina presente na semente. Metodologia: Foram realizados extração de proteínas, fracionamento com sulfato de amônio, cromatografia de afinidade, ensaio de inibição sobre tripsina, quantificação de proteínas e eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante. Resultados e discussão: A partir desses experimentos, detectou-se a atividade antitríptica no pico proteico retido na coluna de afinidade (RT), da farinha e semente, apresentando 51% e 64%, respectivamente. Porém, não foram verificadas grandes quantidades de proteínas solúveis no RT, tanto da semente quanto da farinha, quando comparadas ao extrato bruto e frações proteicas. O inibidor de tripsina de semente foi isolado, indicando massa molecular estimada em, aproximadamente, 14,4 kDa. Conclusões: Diante dos resultados relativos à detecção da atividade antitrípica em semente e farinha comercial de chia, e isolamento do inibidor na semente, faz-se necessário o aprofundamento nas pesquisas acerca dessa molécula quanto as suas propriedades bioativas e segurança do consumoArtigo Atividade hemaglutinante em sementes exóticas germinadas e comestíveis(Revista Brasileira de Inovação Tecnológica em Saúde, 2017-04) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Lima, Vanessa Cristina Oliveira; Silva, Priscila Fabíola dos Santos; Alves, Nínive Rayane de Medeiros; Pereira, Danielle Alves de Oliveira; Figueredo, Júlia Braga dos Santos; Costa, Izael de Sousa; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Santos, Elizeu Antunes dosAs sementes não convencionais vêm ganhando destaque no cenário alimentar pela alegação de que são benéficas à saúde; concomitante a esse fato, o consumo das sementes altera seu metabolismo e sua composição, fato relacionado, segundo a literatura, a uma maior síntese e menor degradação de aglutininas. O objetivo deste estudo constituiu em avaliar a atividade hemaglutinante nos extratos totais aquosos de sementes exóticas germinadas e comestíveis. Assim, foram testadas a atividade hemaglutinante, a dependência de íons e a inibição por carboidratos dos extratos dessas sementes. Como resultado, para as sementes estudadas, identificou-se a presença de aglutininas em todas as sementes germinadas, sendo mais expressivas nas sementes de Gergelim (88,11 UH/mg) e Girassol (61,07 UH/mg) e nas sementes não germinadas, apenas não apresentaram atividade hemaglutinante, as de Quinoa, Feijão Mungo e Gergelim. A especificidade para os tipos sanguíneos (AB0), tratado com papaína ou tripsina variaram entre as sementes, bem como a dependência por e íons magnésio e cálcio, atentando para a necessidade crescente de estudos mais aprofundados sobre fatores antinutricionais em alimentos alternativos e sementes germinadasTese Avaliação da atividade antimicrobiana de extrato aquoso e frações derivadas de sementes de Cumaru [Amburana cearensis (Allema) A. C. Smith] associadas a antimicrobianos(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-02-28) Oliveira, Maria Tatiana Alves; Uchoa, Adriana Ferreira; Coutinho, Henrique Douglas Melo; ; ; ; Morais, Ana Heloneida de Araújo; ; Campos, Julliane Tamara Araújo de Melo; ; Arantes, Thales Domingos; ; Gomes, Valdirene Moreira;A família Fabaceae é conhecida por sua ampla importância econômica, suas espécies vegetais são bastante utilizadas para diversas finalidades. Dentre as leguminosas destaca-se a Amburana cearensis popularmente conhecida como imburana de cheiro ou cumaru, muito utilizada na medicina popular, o que desperta a busca por comprovações de seus componentes e propriedades farmacológicas. Neste contexto este trabalho teve como objetivo avaliar as atividades antimicrobianas e moduladoras, assim como caracterizar por cromatografia líquida e espectrometria de massa, o extrato bruto e frações obtidos de sementes de A. cearensis. O extrato aquoso obtido em tampão fosfato de sódio 50 mM pH 8,0 foi fracionado sequencialmente em sulfato de amônio e submetido à caracterização pelo sistema Acquity UPLC (Waters), acoplado a um sistema de espectrometria de massas do tipo Quadrupolo/Tempo de Voo (QtoF, Waters). A atividade antimicrobiana foi averiguada por ensaio de microdiluição e as possíveis interações entre o extrato vegetal e os antibióticos penicilina, norfloxacino, gentamicina e antifúngico fluconazol, foram determinadas utilizando uma concentração sub-inibitória. As amostras na concentração de 128 µg/mL apresentaram atividade inibitória com possível efeito sinérgico quando associados aos antibióticos e ao antifúngico demonstrando significância com p<0,001 frente às bactérias Escherichia coli, Sthaphylococcus aureus e a levedura Candida albicans. Na caracterização foi possível identificar no extrato bruto e frações, vários compostos fenólicos, ácidos orgânicos e alguns polifenóis em modo de ionização positivo. Os resultados obtidos sugerem que o extrato aquoso e frações de A. cearensis apresentam compostos com capacidade de interagir e agir sinergicamente com antimicrobianos indicando seu potencial como alternativa para o desenvolvimento de novas formulações com ação antimicrobiana.Tese Avaliação da atividade osteogênica e antidipogênica de polissacarídeos sulfatados de macroalgas marinhas verdes(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-01-19) Chaves Filho, Gildacio Pereira; Moreira, Susana Margarida Gomes; Fernandes, Maria Helena Raposo; Gama, Francisco Miguel Portela da; Morais, Ana Heloneida de Araújo; https://orcid.org/0000-0002-6460-911X; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; Barboza, Carlos Augusto GalvãoOs polissacarídeos sulfatados (PS) de macroalgas marinhas são macromoléculas altamente complexas e heterogêneas que têm mostrado diversas atividades, incluindo na modelação da diferenciação osteogénica e adipogénica. Nesse sentido, estas moléculas têm sido estudadas no âmbito da medicina regenerativa para o desenvolvimento de terapias alternativas para contornar doenças relacionadas com o metabolismo ósseo e a obesidade. Dentre os PS dos diferentes tipos de algas marinhas, os derivados das algas verdes são os menos estudos e, por isso, neste trabalho foi avaliada a atividade osteogênica e antiadipogênica de amostras ricas em PS obtidos das algas verdes Caulerpa prolifera e Caulerpa sertularioides. Como parte imprescindível da avaliação da biocompatibilidade de novas moléculas, a genotoxicidade das amostras com atividade biológica também foi estudada. Várias revisões descrevem as múltiplas bioatividades dos PS das algas, no entanto, quanto à sua atividade osteogênica, não há consenso sobre como utilizálos e qual a sua real eficácia nesse processo. Portanto, neste estudo foi realizada uma revisão sistemática para responder à questão “Os PS derivados de algas marinhas promovem a diferenciação osteogênica?”. Os resultados desta revisão apontam que os PS de algas marinhas, efetivamente, promovem um aumento nos marcadores osteogênicos (fosfatase alcalina e mineralização da matriz extracelular), indicando que podem ser considerados para aplicação na regeneração óssea. Os resultados experimentais obtidos com o tratamento das células-tronco estromais humanas com os extratos ricos em PS de C. prolifera e C. sertularioides, em concentrações não citotóxicas (<10 µg/mL), mostraram o aumento dos marcadores osteogênicos, na ausência de efeito genotóxico. Também foi mostrado que uma fração contendo PS isolados de C. prolifera inibe a diferenciação adipogênica de pré-adipocitos 3T3L1, em concentrações não citotóxicas (<200 µg/mL), reduzindo o acúmulo de lipídios totais e triglicerídeos no modelo C. elegans. O refinamento das amostras ricas em PS de C. sertularioides, por cromatografia de troca iônica, resultou em uma subfração com maior efeito antiadipogênico, usando uma concentração significativamente menor (50 µg/mL) do que aquelas relatadas na literatura. Em conjunto, os resultados realçam o potencial dos PS para aplicação no desenvolvimento de terapias alternativas para a problemas relacionados com a regeneração óssea e a obesidade.Dissertação Avaliação da genotoxicidade do inibidor de tripsina isolado de semente de tamarindo (Tamarindus indica L.) e do potencial antibacteriano in vitro e in silico de seus peptídeos derivados(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-08-30) Oliveira, Gerciane Silva de; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Moreira, Susana Margarida Gomes; https://orcid.org/0000-0002-8333-3016; http://lattes.cnpq.br/7741233949116498; https://orcid.org/0000-0002-6460-911X; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; https://orcid.org/0000-0001-8482-7707; http://lattes.cnpq.br/4921949827805516; Assis, Cristiane Fernandes de; Machado, Richele Janaina AraújoAs infecções bacterianas têm se tornado uma preocupação global. Em virtude disso, a busca por agentes terapêuticos naturais e seguros biologicamente com ação antibacteriana, tais como os inibidores de proteases, é crescente. No presente estudo avaliou-se a genotoxicidade do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo (ITT) e investigou-se in vitro e in sílico o efeito antibacteriano dos seus peptídeos derivados. Para tal, inicialmente, o ITT foi obtido por cromatografia de afinidade tripsina-Sepharose 4B e identificado. A segurança biológica foi avaliada por meio da citotoxicidade do ITT pelo método colorimétrido de brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5- difeniltetrazólio (MTT) e genotoxicidade por meio do ensaio de micronúcleo com bloqueio de citocinese (CBMN) em células CHO-K1, utilizando 0,3 e 0,6 mg/mL. O padrão de digestão do ITT foi estabelecido por meio da digestão simulada e hidrólise proteolítica in vitro, simulando as fases oral, gástrica e intestinal conforme protocolo da INFOGEST, no entanto, para a hidrólise não foram utilizados os fluidos da digestão. Para determinação da susceptibilidade enzimática o ITT digerido/hidrolisado foi monitorado por análises de massa molecular e atividade inibitória sobre a tripsina. Foi testada a atividade antibacteriana in vitro para o ITT hidrolisado. Para a clivagem in sílico foi utilizado o modelo teórico do ITT, número 56, e conformação número 287 (ITTp 56/287) sendo submetido a clivagem teórica com a combinação de tripsina e quimotripsina (determinado pela digestão simulada), utilizando a ferramenta de análise PeptideCutter do servidor ExPASy. Posteriormente, para selecionar o peptídeo com potencial antibacteriano, esses foram alinhados com o ITTp 56/287 para identificação das posições dos resíduos de aminoácidos utilizando o servidor CLUSTAL W e após selecionar o peptídeo com maior potencial antibacteriano seguiu-se para a dinâmica molecular (DM) usando o pacote GROMACS. O ITT (0,3 e 0,6 mg/mL) não alterou a viabilidade celular e nem tampouco genotoxicidade nas células (p<0,05), quando digerido/hidrolisado in vitro se manteve íntegro na fase oral e gástrica, enquanto as enzimas intestinais (tripsina e quimotripsina) foram eficazes em clivar o ITT. O ITT hidrolisado (7mg/mL) avaliado quanto a atividade antibacterina in vitro contra E. faecalis, S. aureus e S. epidermidis, nas concentrações testadas não apresentou atividade bacteriostática ou bactericida. Na análise in silico o Peptídeotripquimo59 (TVSQTPIDIPIGLPVR) apresentou resíduos de aminoácidos anfipáticos, hidrofobicidade 0,636 e estrutura α- hélice. Na DM o Peptídeotripquimo59 apresentou energia potencial de interação (EPI) de -518,08 kcal.mol-1 com a membrana de bactérias Gram-positiva e os resíduos treonina e arginina apresentaram as melhores EPI, demonstrado grande potencial antimicrobiano. Portanto, os resultados trazem novas perspectivas de estudos e aplicações para o ITT e seus peptídeos derivados sobre a atividade antibacteriana o qual apresenta grande importância na comunidade científica, uma vez que, para a comunidade científica para ser útil no desenvolvimento de novos agentes terapêuticos com potencial de uso para diminuir a alta taxa de mortalidade decorrente das infecções microbianas.TCC Avaliação da interação do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo (Tamarindus Indica L.) com lipopolissacarídeo bacteriano in silico e do efeito antimicrobiano sobre bactérias gram-negativas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-12-07) Pereira, Annemberg Salvino; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Matias, Lídia Leonize Rodrigues; http://lattes.cnpq.br/1263391959880480; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Matias, Lídia Leonize Rodrigues; Lima, Vanessa Cristina Oliveira deO inibidor de tripsina de semente de tamarindo (ITT) é reconhecido por apresentar efeitos sacietogênicos, anti-inflamatórios e de redução na hiperglicêmica, além de potencial ação antimicrobiana in silico. Este estudo teve como objetivo testar in silico a interação do ITT teórico [modelo número 56, na conformação número 287 (ITTp 56/287)] com lipopolissacarídeo bacteriano (LPS) e seu efeito in vitro sobre bactérias gram-negativas. Inicialmente o ITTp 56/287 foi avaliado por docking molecular quanto à interação com LPS de E. coli (PDB ID 4NHR) e Salmonella enterica subespécie enterica sorotipo Typhimurium LT2 (PDB ID 4N4R). Posteriormente, seguiu-se com a obtenção e caracterização do ITT a partir da extração em tampão Tris-HCl, pH 7,5, saturações nas faixas de 0-30% (F1) e 30-60% (F2) com sulfato de amônio e isolamento do ITT por cromatografia de afinidade Tripsina-Sepharose 4B. O ITT foi caracterizado por meio da estimativa da massa molecular, da quantificação proteica, da determinação de atividade antitríptica e teste microbiológico contra E. coli e Salmonella spp. por meio do teste de microdiluição em caldo. Em relação aos resultados, a fração 2 (30 a 60%) apresentou a maior atividade antitríptica, com 72,40%. O ITT isolado obteve 97,59% (1.797,22 UI/mg) de atividade antitríptica, 0,018 mg/mL de proteinas e bandas proteicas com massa molecular de aproximadamente 20kDa. In silico, foi verificado a interação do ITTp 56/287 com LPSs teóricos de E. coli (PDB ID 4NHR) e Salmonella enterica subespécie enterica sorotipo Typhimurium LT2 (PDB ID 4N4R) com docking score de -214,42 e -348,66, respectivamente. Entretanto, o efeito antimicrobiano do ITT não foi relevante em concentrações inferiores a 1 mg/mL contra E. coli e Salmonella spp. Tais resultados mostram a necessidade de mais pesquisas in vitro, considerando outras espécies bacterianas e ainda direcionadas à prospecção de peptídeos antimicrobianos derivados do ITT.Dissertação Avaliação da segurança e potencial bioativo de nanopartículas de carotenoides oriundo de melão Cantaloupe (Cucumis melo L.) administradas em modelo experimental de inflamação crônica(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-06-02) Medeiros, Isaiane; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Passos, Thais Souza; ; ; ; Ladd, Fernando Vagner Lobo; ; Aquino, Jailane de Souza;Os carotenoides exercem potente ação anti-inflamatória no organismo humano. Entretanto, são instáveis à presença de luz, ácidos, oxigênio e calor, o que pode levar a perda dos efeitos antioxidantes relacionados ao consumo dessas moléculas. A nanoencapsulação surge como estratégia para preservar ou potencializar a ação anti-inflamatória, além de aumentar a solubilidade e biodisponibilidade dos carotenoides. Portanto, é necessário avaliar a segurança das nanopartículas visando futuras aplicações clínicas. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar a segurança e bioatividade de nanopartículas à base de extrato bruto de melão Cantaloupe rico em carotenoides e gelatina suína em ratos Wistar. A encapsulação foi realizada por emulsificação óleo/água, seguida de liofilização, utilizando gelatina suína como agente encapsulante e Tween 20 como tensoativo. A nanoformulação (EGS) foi caracterizada por diferentes análises físicas e químicas, e avaliada quanto à eficiência de incorporação (EI). A toxicidade foi investigada por meio de sinais de toxicidade geral, peso corporal e consumo alimentar em ratos Wistar alimentados com dieta de alto índice glicêmico e alta carga glicêmica (HGLI), tratados com EGS administrada por gavagem (50 mg de EGS/kg, n = 5) e extrato bruto de carotenoide (EB) (12,5 mg/kg, n = 5) durante 10 dias, utilizando como controles um grupo sem tratamento (n = 5) e outro tratado com dieta padrão (n = 5). Foi avaliada a toxicidade sanguínea (hemograma, glicose, triglicerídeos, colesterol total, função hepática e renal), morfologia e histopatologia de fígado, intestino delgado, rins, estômago e baço. A caracterização de EGS apontou a presença de partículas esféricas com superfície lisa, diâmetro médio de 74 (12,7) nm, índice de polidispersão de 0,53 (0,12), e EI de 98% (1,78). Para os sinais de toxicidade geral, não houve diferença significativa (p > 0,05) entre o peso inicial e final dos ratos de cada grupo avaliado. Observou-se aumento significativo (p < 0,05) de 23 % no consumo alimentar somente do grupo sem tratamento. Por meio dos parâmetros bioquímicos analisados, constatou-se baixa toxicidade de EGS. Os resultados obtidos para as determinações do peso relativo dos fígados, intestino delgado, baço, rins e estômago mostraram que não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os grupos estudados. As análises morfológicas e histopatológicas do fígado apontaram hepatite aguda nos animais de todos os grupos avaliados, sendo que os tratados com EB e EGS apresentaram melhores aspectos teciduais. Para intestino delgado, observou-se enterite crônica em todos os animais, com um melhor aspecto nas vilosidades e glândulas intestinais dos animais tratados com a EGS. O estômago, baço e os rins não apresentam alteração histopatológica. As correlações de Spearman (r) e valor de p dos parâmetros histopatológicos analisados semiquantitativamente corroboraram com os aspectos das lâminas histopatológicas. Os resultados sugerem a aplicação segura de EGS e um efeito bioativo, possivelmente, relacionado ao potencial anti-inflamatório, mostrando a segurança quanto à utilização em estudos clínicos futuros, visando investigar a eficácia no controle dos processos inflamatórios.