PPgBBM - Mestrado em Bioquímica e Biologia Molecular
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Dissertação Carcinoma NUT: relato de саsо e análise do microambiente tumoral através dos marcadores VEGFA, STAT3 E CD163(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-04-10) Lopes, Rayssa Thainná Silva; Campos, Julliane Tamara Araújo de Melo; Araújo Júnior, Raimundo Fernandes de; https://orcid.org/0000-0003-2349-2354; http://lattes.cnpq.br/1903940945895093; https://orcid.org/0000-0002-8501-5521; http://lattes.cnpq.br/3504274193684794; http://lattes.cnpq.br/5622318246677544; Farias, Naisandra Bezerra da Silva; http://lattes.cnpq.br/6590909272236189; Pereira, Karuza Maria Alves; https://orcid.org/0000-0002-2880-6466; http://lattes.cnpq.br/3193698890688967O carcinoma NUT (CN) é uma neoplasia maligna epitelial rara de rápida progressão, que afeta ambos os sexos em qualquer faixa etária e é caracterizada geneticamente pela translocação envolvendo o gene NUTM1. O principal desafio da doença é a resistência às terapias convencionais, fato que enfatiza a importância de analisar casos clínicos passados para investigar os mecanismos da biologia tumoral e, com isso, aprimorar a condução clínica de casos atuais. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi caracterizar um novo caso de CN ocorrido na cidade de Natal, Rio Grande do Norte, Brasil e analisar o microambiente tumoral utilizando três novos marcadores (VEGFA, STAT3 e CD163) através de imuno-histoquímica (IHQ). Para isso, o prontuário e os exames de imagem do caso foram utilizados na caracterização clínica; lâminas histopatológicas foram obtidas para a captura de imagens histopatológicas e amostras parafinadas do tecido tumoral foram adquiridas para a realização dos testes de IHQ. O caso clínico apresentado ocorreu em um homem de 28 anos, com tumor primário localizado na cavidade nasal e metástase na vértebra torácica T11. Ele foi submetido às terapias convencionais de ressecção cirúrgica, quimioterapia e radioterapia, contudo o tumor apresentou resistência aos tratamentos, evoluiu rapidamente e o paciente faleceu 21 meses após o diagnóstico. As análises histopatológicas revelaram população de células tumorais monomórficas redondas, infiltrado inflamatório predominantemente mononuclear, focos hemorrágicos e presença de macrófagos. Tais achados motivaram a escolha dos três novos marcadores de IHQ, os quais apresentaram imunorreatividade na amostra tumoral do caso. Nesse cenário, a superexpressão de VEGFA sugere uma intensa atividade angiogênica, a presença de STAT3 indica um contexto de sinalização que promove imunossupressão e resistência à apoptose, além de CD163+ indicar a presença de macrófagos de fenótipo M2 associados ao tumor. Com isso, a implementação desses marcadores em painéis de IHQ pode auxiliar no acompanhamento do CN, oferecendo informações sobre tendência a metástases, atividade inflamatória e resistência tumoral, além de fomentar o desenvolvimento de abordagens imunoterápicas.Dissertação Extratos termorresistentes de sementes da caatinga: atividade larvicida e efeitos morfofisiológicos em Aedes aegypti e Aedes albopictus(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-02-17) Bezerra, Pedro Vitor Vale; Uchôa, Adriana Ferreira; Silva, Giulian César da; https://orcid.org/0000-0002-4734-4228; http://lattes.cnpq.br/2134578884742038; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0002-8674-6959; http://lattes.cnpq.br/0567529774568955; Pessoa, Felipe Arley Costa; http://lattes.cnpq.br/0065844952697911; Barbosa, Patricia Batista Barra Medeiros; Andrade Neto, Valter Ferreira de; http://lattes.cnpq.br/4863082845974813As arboviroses compreendem um grupo significativo de doenças virais, predominantemente transmitidas por mosquitos hematófagos, especialmente Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) e A. albopictus (Skuse, 1894). As estratégias convencionais de manejo dessas doenças se baseiam principalmente em inseticidas químicos sintéticos como medida de controle primária. Contudo, tal abordagem levanta preocupações em relação à toxicidade ambiental e à potencial resistência entre as populações de mosquitos. Em vista desses desafios, os inseticidas botânicos, incluindo os extratos vegetais, emergem como alternativas promissoras devido à sua biocompatibilidade e diversidade de modos de ação, minimizando impactos ambientais e resistência nos insetos. O presente estudo buscou estudar as propriedades inseticidas dos extratos das sementes de duas leguminosas da Caatinga, Amburana cearensis ((Allem.) A. C. Smith) e Erythrina velutina (Willd.), contra larvas (L4) de A. aegypti e A. albopictus. Os extratos foram obtidos pela solubilização do pó das sementes em água destilada (1:20, p/v), a 80 °C. As concentrações letais para 50% (CL50) e 90% (CL90) das larvas foram determinadas em intervalos de 24 e 48 horas. Alterações morfológicas foram examinadas utilizando um microscópio estereoscópico com câmera acoplada, e o desenvolvimento larval foi monitorado durante 15 dias. Análises zimográficas foram realizadas para avaliar a inibição de proteases digestivas nas larvas tratadas com os extratos. Os resultados indicaram que ambos os extratos apresentaram atividade larvicida, com o extrato de A. cearensis demonstrando uma maior eficiência. Especificamente, o extrato apresentou valores de CL50 de 0,45 mg/mL e 0,23 mg/mL para 24 e 48 horas em A. aegypti, respectivamente, e valores de CL50 de 0,34 mg/mL e 0,11 mg/mL em A. albopictus. Adicionalmente, o extrato de A. cearensis reduziu a atividade enzimática das proteases intestinais de ambas as espécies em mais de 70%, enquanto o extrato de E. velutina não apresentou efeito significativo. Atrasos no desenvolvimento larval em A. albopictus sugerem uma influência pronunciada da inibição de proteases resultante da ação do extrato de A. cearensis. As alterações morfológicas sugerem a presença de outros efeitos deletérios nos extratos: inibição de acetilcolinesterase (A. cearensis e E. velutina), disrupção da síntese de quitina e danos teciduais internos ou infecção que levam à melanização (E. velutina). Este estudo destaca o potencial promissor dos extratos de A. cearensis e E. velutina para o controle larval de A. aegypti e A. albopictus. O extrato de A. cearensis emerge como um candidato particularmente viável para o desenvolvimento de larvicidas botânicos. As descobertas ressaltam a importância da biodiversidade vegetal da Caatinga no desenvolvimento de bioprodutos, potencializando sua relevância cultural, biotecnológica e econômica, além de contribuir para uma estratégia integrada de manejo de arboviroses.Dissertação Previsão do efeito terapêutico e avaliação de riscos de carotenóides e retinóides em um modelo de urolitíase por meio de análise in silico e ensaios in vitro(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-05-26) Aquino, Leonardo de Medeiros; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; http://lattes.cnpq.br/5030249371462635; Santos, Pablo de Castro; https://orcid.org/0000-0003-0081-9609; http://lattes.cnpq.br/6456286305129050; Medeiros, Valquiria Pereira de; http://lattes.cnpq.br/8687225336984575O estresse oxidativo pode causar diversos danos ao organismo e em moléculas, um exemplo das consequências desse estresse é a urolitíase, formação de cálculo renal, contribuindo para a formação de cristais, sendo eles principalmente os cristais de oxalato de cálcio, monoidratados (COM) e diidratados (COD). O beta-caroteno (BCAR), astaxantina (AST) e retinol (RET), são descritos como moléculas antioxidantes que podem ser utilizadas no combate a danos provocados ao estresse oxidativo. Porém, não há dados referentes de como essas três moléculas agem para evitar ou combater especificamente a urolitíase. Dentro deste contexto, neste trabalho, inicialmente, avaliou-se in vitro, o potencial do BCAR, da AST e do RET, conhecidos antioxidantes, como agentes inibidores da formação de cálculo renal. BCAR, AST ou RET (10 e 15 µg/mL) não foram tóxicos para células renais de linhagem canina (MDCK), mas também não foram capazes de proteger estas células de danos causados pela presença de H2O2. Já com relação a formação direta de cristais de oxalato de cálcio, verificou-se que compostos aqui avaliados afetaram igualmente o equilíbrio entre a quantidade dos tipos de cristais de oxalato de cálcio formados, induzindo a formação de uma maior quantidade de cristais COD, que são mais danosos. Estes dados, apesar de iniciais, demonstram um efeito indesejado ainda não descrito para essa classe de moléculas. Diante desse novo contexto, utilizou-se técnicas in silico para avaliar carotenos (BCAR e licopeno), retinóides (RET e isotretinoína) e xantofilas (AST, fucoxantina, zeaxantina, beta-criptoxantina, cantaxantina e luteína) e identificar outros possíveis efeitos adversos. Dentro dos seus respectivos grupos, pode-se ver similaridades no perfil ADMET (Absorção, Distribuição, Metabolismo, Excreção e Toxicidade) dos compostos avaliados. Com o uso da plataforma PredHerg identificou-se potencial cardiotóxico fraco para licopeno, beta-criptoxantina, fucoxantina e moderado para luteína. Com uso da plataforma PredSkin identificou-se que o licopeno e as xantofilas testadas, exceto a cantaxantina, têm potencial para causar reações alérgicas na pele. Os resultados deste estudo sugerem que, embora BCAR, AST e RET sejam antioxidantes conhecidos, eles podem ter efeitos negativos indesejados na formação de cálculos renais, promovendo a formação de cristais de oxalato de cálcio mais prejudiciais. Além disso, a análise in silico revelou potenciais riscos de cardiotoxicidade e reações alérgicas na pele para alguns dos compostos avaliados. Esses resultados iniciais destacam a necessidade de mais investigações sobre a segurança e eficácia dessas moléculas antioxidantes, especialmente no contexto da saúde renal e do estresse oxidativo.Dissertação Avaliação dos potenciais osteogênico e genotóxico de microesferas à base de hidroxiapatita nanoestrutura contendo zinco(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-02-14) Dantas, Marina Rocha do Nascimento; Moreira, Susana Margarida Gomes; https://orcid.org/0000-0002-8333-3016; http://lattes.cnpq.br/7741233949116498; http://lattes.cnpq.br/7872587364414493; Barboza, Carlos Augusto Galvão; Chaves Filho, Gildacio PereiraUma ampla gama de biomateriais está sendo estudada atualmente como novas alternativas no campo da regeneração óssea. Dentre eles, destaca-se a hidroxiapatita (HA), um componente mineral presente na fase inorgânica dos ossos. A HA, além de ser biocompatível, apresenta características físicoquímicas adequadas e permite substituições iônicas que podem melhorar seu desempenho para diferentes aplicações. Foram desenvolvidas microesferas de HA nanoestruturada (nHA) com diferentes composições, incluindo a incorporação de íons de zinco (Zn²⁺), que se destacam devido à sua capacidade de aumentar a viabilidade celular e promover a mineralização óssea. No entanto, qualquer alteração na HA resulta na produção de um novo biomaterial que, além da confirmação de suas capacidades osteogênicas, precisa ter sua biossegurança testada. Assim, neste estudo, avaliamos a capacidade das microesferas à base de nHA contendo Zn²⁺ em promover a diferenciação osteogênica, utilizando células-tronco estromais isoladas da geleia de Wharton de cordões umbilicais humanos (hWJ-MSCs). Os resultados de citotoxicidade, avaliados pelo ensaio de MTT (brometo de 3-(4,5- dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio), mostraram que as amostras não reduziram de forma significativa a capacidade das células hWJ-MSCs em metabolizar o MTT, indicando que as amostras não são citotóxicas nas condições testadas. Os resultados de mineralização óssea, atividade da fosfatase alcalina (ALP) e expressão gênica, quantificada por qRT-PCR, indicaram que as amostras, nas condições testadas, apresentaram atividade osteogênica, evidenciada pelo aumento da mineralização da matriz extracelular, da atividade de ALP e da expressão de genes relacionados à osteogênese nas células hWJ-MSCs. Considerando possíveis aplicações clínicas, também avaliamos o potencial genotóxico desses materiais. Os resultados de genotoxicidade, obtidos pelo ensaio Cometa e pelo ensaio CBMN (micronúcleo com bloqueio de citocinese), mostraram que as amostras não apresentam potencial genotóxico nas condições testadas. Dessa forma, espera-se que este biomaterial possa ter aplicações na regeneração óssea.Dissertação Lipomatose simétrica múltipla: diagnóstico genético e relação genótipo/fenótipo de variantes patogênicas no gene MFN2(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-03-10) Sena, Matheus Oliveira de; Campos, Julliane Tamara Araújo de Melo; Lima, Josivan Gomes de; https://orcid.org/0000-0002-8501-5521; http://lattes.cnpq.br/3504274193684794; http://lattes.cnpq.br/0408456413671777; Ferreira, Leonardo Capistrano; Montenegro Júnior, Renan MagalhãesA Lipomatose Simétrica Múltipla (LSM), também conhecida como Doença de Madelung ou doença de Launois-Bensaude, consiste numa rara doença genética, de caráter autossômico recessivo ou heterozigoto composto, que afeta o tecido adiposo, sendo também caracterizada como uma rara síndrome mitocondrial. A LSM, causada geneticamente por uma variante no gene MFN2 (c.2119 C>T; p.Arg707Trp), já foi fenotipicamente caracterizada pelo desenvolvimento de lipomas não encapsulados, principalmente na região superior do tronco, destacando-se as regiões supraclavicular, interescapular e de pescoço. Ademais, os lipomas estão comumente associados à neuropatia axonal, complicações metabólicas, como hipertrigliceridemia, diminuição do HDL-c, hipoadiponectinemia e hipoleptinemia além de desordens mitocondriais. Histórico de consumo excessivo de álcool de pacientes já foi associado com o desenvolvimento acelerado da LSM. Vale ressaltar que foram encontradas outras variantes em pacientes com LSM, tais como as variantes c.1027_1029delAGG (p.Arg343del), c.600_816del (deleção dos éxons 7 e 8) e c.1496-2A>G todas encontradas em heterozigose composta juntamente com a variante patogênica c.2119 C>T (p.Arg707Trp). Além disso, diversas outras variantes patogênicas já foram descritas no gene MFN2, porém apenas a c.2119 C>T (p.Arg707Trp) em homozigose ou heterozigose composta (juntamente com as variantes c.1027_1029delAGG, c.600_816del e c.1496-2A>G) foram relatadas por determinar o desenvolvimento de LSM, enquanto a imensa maioria das outras variantes descritas no gene são conhecidas por causar a neuropatia axonal denominada Charcot-Marie-Tooth tipo 2 (CMT2). As manifestações clínicas da LSM apresentam uma grande heterogeneidade, que se reflete na cronologia de seus aparecimentos e gravidade das mesmas. Neste trabalho, foi realizado o 16º diagnóstico de LSM associado ao gene MFN2 no mundo, sendo o 1º no Brasil, no qual a variante c.2119C>T foi identificada em homozigose. O paciente apresentava baixos níveis séricos de adiponectina, leptina e HDL-c, além de hiperglicemia. Foi estabelecida a relação genótipo x fenótipo deste paciente com os demais já descritos na literatura. Por meio de ferramentas bioinformáticas, foram realizadas simulações da estrutura tridimensional, predição de topologia de membrana e de interação proteína-proteína homotípicas e heterotípicas para os tipos selvagem e mutantes de mitofusina 2. Além disso, uma rede de interação do gene MFN2 foi construída, na qual os processos biológicos mais enriquecidos envolvendo este gene foram observados.Dissertação Caracterização das proteínas EXO-3/APE1 e XPA-1/XPA no desenvolvimento de fenótipos neurodegenerativos no Caenorhabditis elegans(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-02-24) Bezerra, Liliane Soares de Castro; Oliveira, Riva de Paula; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0002-6092-6142; http://lattes.cnpq.br/6790385939188325; http://lattes.cnpq.br/4789315674848468; Campos, Julliane Tamara Araújo de Melo; Souza, Evandro Araújo deEvidências clínicas indicam que as deficiências nas vias de reparo por excisão de nucleotídeos (NER) e excisão de bases (BER) estão associadas a patologias neurodegenerativas em humanos, sugerindo que que essas vias desempenham um papel fundamental nas Doenças Neurodegenerativas crônicas. A falha na via NER resulta em diversos danos ao DNA, como ativação contínua da poli-ADP-ribose polimerase 1 (PARP1) e diminuição do NAD+ intracelular. Contudo, a relação entre a disfunção mitocondrial e a deficiência da via BER ainda não é completamente compreendida, assim como a possível interação com a via NER. O nematódeo Caenorhabditis elegans é um modelo amplamente utilizado para investigar doenças neurodegenerativas em organismos multicelulares em desenvolvimento. As vias BER e NER são bem preservadas em C. elegans. Nesse organismo, a endonuclease EXO-3, homóloga à APE1 da via BER, e o ortólogo XPA-1 da via NER desempenham papéis chave. Mutantes exo-3 apresentam redução na progênie, aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e maiores deleções de DNA mitocondrial (mtDNA). Já os mutantes xpa-1 são sensíveis à radiação UV e apresentam deficiências no sistema ubiquitina-proteassoma (UPS) e no metabolismo mitocondrial. Assim, avaliou-se como as deficiências de EXO-3 e XPA-1 influenciam a integridade mitocondrial e o desenvolvimento de fenótipos neurodegenerativos em modelos transgênicos de C. elegans. Para isso, foram analisados animais knockdown para exo-3 e/ou xpa-1 de cepas que emitem GFP em mitocôndrias intestinais e musculares, além de também ter sido observado o efeito da deficiência das vias BER e NER na apoptose, também foi avaliado a integridade neuronal colinérgica em animais deficientes para exo-3 ou xpa-1. Os resultados indicaram evidências de neurodegeneração e indícios de disfunção mitocondrial em animais deficientes nas duas vias de reparo, reforçando a sobreposição dessas daus vias. Além disso, eles vão ao encontro do observado em estudos anteriores sobre aumento do conteúdo mitocondrial em animais knockdown para exo-3;xpa-1. Dessa maneira o foco volta-se no desenvolvimento de animais mutantes de deleção em exo-3 e xpa-1 para uma melhor caracterização da função mitocondrial e integridade neuronal. Espera-se que esse trabalho contribua para uma melhor compreensão das doenças neurodegenerativas e do papel da EXO-3, uma endonuclease central no reparo BER, no surgimento de fenótipos neurodegenerativos e sua associação com disfunções mitocondriais.Dissertação Avaliação dos efeitos da trazodona sobre parâmetros reprodutivos e contração do ducto epididimário de ratos(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-01-30) Silva, Maria Santana da; Silva Júnior, Edilson Dantas da; https://orcid.org/0000-0001-5505-8056; http://lattes.cnpq.br/5459705151588106; https://orcid.org/0009-0007-2128-7433; http://lattes.cnpq.br/4258208584260510; Gavioli, Elaine Cristina; http://lattes.cnpq.br/1759328747578795; Fonseca, Miriam das Dores MendesA trazodona é um antidepressivo aprovado para o tratamento do transtorno depressivo maior com baixa capacidade de produzir disfunção sexual. No entanto, seus efeitos sobre a saúde reprodutiva masculina ainda não são totalmente compreendidos. Desta forma, este estudo avaliou os efeitos da trazodona sobre parâmetros reprodutivos e a contração do ducto epididimário da cauda distal do epidídimo de ratos. Ratos Wistar adultos foram tratados oralmente por 21 dias com salina (controle) ou trazodona nas doses de 10mg/kg e 20 mg/kg. Após o tratamento, os animais foram eutanasiados e o sangue coletado para determinação dos níveis de testosterona. Os órgãos reprodutivos foram isolados e pesados. Os testículos foram usados para a avaliação histomorfológica, mensuração dos níveis de MDA e GSH, e determinação de parâmetros como a produção diária de espermatozóides. Os epidídimos foram usados na determinação de parâmetros espermáticos como quantidade de espermatozoides na cabeça/corpo e cauda do epidídimo, tempo de trânsito dos espermatozóides nas diferentes partes do epidídimo, motilidade, vitalidade e morfologia dos espermatozoides. A contração do ducto epididimário isolado da região distal da cauda do epidídimo foi avaliada. Estudos in silico foram realizados para a predição de alvos moleculares relacionados aos efeitos da trazodona e do seu metabólito ativo sobre o trato reprodutor masculino. Os resultados indicaram que a trazodona induziu efeitos anti-reprodutivos em ratos, evidenciados por danos ao tecido testicular, presença de peroxidação lipídica intratesticular, redução na produção espermática, bem como na quantidade dos espermatozóides coletados das diferentes partes do epidídimo. Foi encontrado ainda que o tratamento com trazodona reduziu a motilidade progressiva dos espermatozóides, o número de espermatozóides vivos e o número de espermatozóides morfologicamente normais, indicando uma diminuição na qualidade destes gametas. A contração do ducto epididimário isolado da cauda distal do epidídimo de ratos foi também afetada pelo tratamento in vivo e in vitro com trazodona, indicando possíveis alterações durante a fase de emissão da ejaculação. Além disso, tanto a trazodona quanto o seu metabolito ativo apresentaram preditores in silico que sugerem interações inespecíficas com alvos farmacológicos, o que pode contribuir para um perfil reprodutivo toxicológico desfavorável. Em conclusão, a trazodona apresentou importantes efeitos anti-reprodutivos que podem prejudicar a fertilidade masculina.Dissertação Prospecção química, antioxidante e toxicológica das Esponjas Marinhas Suberites aurantiacus, Mycale angulosa e Halichondrida da Bacia Potiguar - RN(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-11-10) Jorge, Nathália Cristina Lopes de; Santos, Elizeu Antunes dos; Santos, Paula Ivani Medeiros dos; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; https://orcid.org/0000-0002-8495-8253; http://lattes.cnpq.br/0256467676093786; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; Gomes, Dayanne LopesAs esponjas marinhas são organismos bastante promissores na busca por moléculas bioativas com uma gama de atividades biológicas já reportadas na literatura científica, com destaque para os agentes antioxidantes. Sabendo que o estresse oxidativo está associado a várias condições de saúde, tais como: câncer, Parkinson, Alzheimer, entre outros, a busca por compostos que atuem no controle oxidativo se torna elemento chave na busca por novos tratamentos. A Bacia Potiguar do RN possui um vasto litoral com uma rica diversidade de espécies de esponjas marinhas, mas que em contrapartida é pouco explorada quanto ao seu potencial biotecnológico. Neste trabalho, realizamos a prospecção química, antioxidante e toxicológica de três espécies de esponjas coletadas no litoral da Bacia Potiguar: Suberites aurantiacus, Mycale (Zygomycale) angulosa e Halichondrida. Foram realizadas extrações sequenciais com n-hexano (HE) para preparo dos extratos e posteriormente em clorofórmio/metanol (CM), cujos extratos obtidos somente com HE foram denominados: HESUB, HEMYC e HEHALI, e os extratos obtidos com CM: CMSUB, CMMYC e CMHALI para S. aurantiacus, M. angulosa e Halichondrida, respectivamente. Os extratos em CM foram caracterizados quimicamente por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (GC/MS) e avaliados quanto à sua atividade antioxidante pelos métodos: Capacidade Antioxidante Total (CAT), poder Redutor, sequestro de íons (superóxido, DPPH, Radical Hidroxila (OH • ) e atividade Quelante de Íons (Ferroso (Fe2+) e Cuproso (Cu2+)). Os extratos CM das três esponjas também foram submetidos a ensaios toxicológicos in vitro com eritrócitos humanos e in vivo com larvas de Tenebrio molitor. A caracterização química por GC/MS revelou padrões químicos específicos para os gêneros das esponjas estudadas. Os extratos apresentaram álcoois, alcaloides, compostos fenólicos e lipídios (destes, principalmente a classes dos esteróis, estanóis, ácidos e álcoois graxos). Nos testes antioxidantes in vitro os extratos apresentaram a capacidade de sequestrar os radicais DPPH (CMHALI 60,91% ± 3,05; CMSUB 59,32% ± 3,71 e CMMYC 53,78% ± 6,96 com 1000 µg/mL) e os radicais hidroxila (CMSUB 96% ± 0,04 na concentração de 2000 µg/mL; CMMYC 37% ± 0,17 e CMHALI 54% ± 0,086 com 1000 µg/mL de extrato) e de quelar íons cobre (CMHALI 113,5% ± 1,93; CMSUB 112,1% ± 5,81 e o CMMYC com 110,6% ± 3,19 de atividade com 25 µg/mL de extrato), com destaque para a atividade quelante de cobre para os três extratos. Os ensaios toxicológicos in vitro e in vivo revelaram que em ambos os testes, em diferentes concentrações, as amostras não apresentaram efeitos tóxicos. Além disso, foram realizados ensaios antibacterianos pelo método de MIC (Concentração inibitória mínima) contra as bactérias patogênicas Staphylococcus aureus e Escherichia coli, porém não foi observada tal atividade. Os resultados aqui apresentados sugerem que as esponjas marinhas desse litoral possuem propriedades farmacológicas que podem ser investigadas visando o isolamento dos metabólitos que são responsáveis pelas atividades antioxidantes apresentadas. Além disso, existe a possibilidade de investigar o potencial desses metabólitos frente a outras atividades biológicas.Dissertação Predições ADMET e por bioquímica quântica de bioativos com potencial antimicrobiano ou neuroativo(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-11-26) Morais, Gabriel Christian de Farias; Oliveira, Jonas Ivan Nobre; Rodrigues Neto, João Firmino; http://lattes.cnpq.br/6168035663769198; https://orcid.org/0000-0003-1646-921X; http://lattes.cnpq.br/2461374517882321; https://orcid.org/0000-0003-4168-3074; http://lattes.cnpq.br/2788406051690729; Silva Júnior, Edilson Dantas da; Vianna, Jéssica de FátimaA crescente demanda por novos fármacos com atividades neuroativas, como também aqueles antimicrobianos, motivou este estudo a realizar predições do perfil de ADMET (Absorção, Distribuição, Metabolismo, Excreção e Toxicidade) e análises por técnicas de bioquímica quântica de compostos bioativos com atividade eugeroica (modafinil), noradrenérgica (atomoxetina), antiviral (tecovirimat) e antichagásica. Utilizando ferramentas computacionais avançadas como ADMETlab 2.0, admetSAR, FAF-Drugs4, PreADMET, pkCSM e PREDHERG, foram avaliados os perfis farmacocinéticos e toxicológicos do Modafinil, destacando sua toxicidade hepática e mutagênica; Atomoxetina, destacando sua toxicidade hepática, cardiovascular e mutagênica; e Tecovirimat, destacando sua toxicidade hepática, respiratória e mutagênica. Posteriormente, o foco foi direcionado para a doença de Chagas, selecionando seis compostos com potencial antichagásico, dentre os quais o composto BZTS destacou-se por atender a todas as regras de química medicinal e apresentar um perfil ADMET favorável com menor risco de toxicidade. Estudos de modelagem molecular e cálculos baseados na Teoria do Funcional da Densidade (DFT) revelaram interações robustas e específicas entre o BZTS e a enzima cruzipaína, alvo terapêutico do Trypanosoma cruzi, destacando sua estabilidade e afinidade no complexo ligante-receptor decorrente de interações com os aminoácidos GLU208 (-10,2 kcal/mol), MET68 (-4,75 kcal/mol), LEU67 (-4.08 kcal/mol), ASN69 (-3,68 kcal/mol), LEU160 (-3,38 kcal/mol), ALA138 (-1,98 kcal/mol), GLU117 (-1,97 kcal/mol) e ASP161 (- 1,68 kcal/mol). Ademais, os orbitais de fronteira HOMO (-5,85 eV) e LUMO (-3,37 eV), além dos descritores químico-quânticos - potencial de ionização (5,85 eV), afinidade eletrônica (3,37 eV), dureza química (1,24 eV), suavidade (0,81 eV), potencial químico (4,61 eV), eletronegatividade (-4,61 eV) e eletrofilicidade (13,19 eV) - confirmaram a capacidade do BZTS de interagir eficazmente com alvos biológicos, reforçando seu potencial como agente terapêutico. Este estudo evidencia a eficácia das metodologias in silico na identificação e caracterização de compostos bioativos promissores, com o BZTS emergindo como um candidato promissor para o tratamento da doença de Chagas. A integração de predições computacionais no desenvolvimento de fármacos demonstra-se crucial para acelerar a descoberta e otimização de medicamentos mais seguros e eficazes, contribuindo significativamente para futuros avanços na farmacologia e na saúde pública.Dissertação Fertilidade masculina: mercado na América Latina e desenvolvimento de sistemas para detecção de patógenos no sêmen humano(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-04-15) Oliveira, Maryana Thalyta Ferreira Câmara de; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; https://orcid.org/0000-0002-1341-4814; http://lattes.cnpq.br/6851351991421755; http://lattes.cnpq.br/8554649433942208; Silva Júnior, Edilson Dantas da; Morais, Danielle Barbosa; Aderaldo, Janaina Ferreira; Mota, Kyvia BezerraO tratamento da infertilidade tornou-se um grande negócio em todo o mundo. Uma especialidade médica que começou como uma atividade de pesquisa acadêmica e inovadora evoluiu para um serviço industrial e comercial que se expandiu muito além do tratamento. Os serviços de fertilidade podem faturar até US $31,59 bilhões em 2029 e o uso das tecnologias em reprodução assistida (TRA) tornou-se um negócio comercial próspero dentro dos serviços de fertilidade. Notou-se que o mercado de fertilidade tem presenciado crescimento expressivo tanto no Brasil quanto na América Latina. Especificamente no Brasil, observa-se um crescimento ao longo dos últimos anos, abrigando aproximadamente 40% das clínicas de reprodução assistida da América Latina e com receita girando em torno de R$1,3 bilhão. Estima-se que entre 2021 e 2025, cerca de 77.588 pacientes com até 35 anos serão tratados via TRA no país. Paralelamente, percebe-se que tanto políticas públicas quanto iniciativas do setor privado voltadas para fertilidade aumentam, sublinhando a relevância da fertilidade na vida das pessoas. O mercado de fertilidade masculina também tem apresentado um crescimento significativo à medida que se expande o mercado da fertilidade e reprodução assistida. De acordo com a avaliação dos relatórios de mercado, estima-se que o comércio global relacionado à fertilidade masculina tenha um valor expressivo em bilhões de dólares e apontam para a promessa de que alcance mais de US$ 6 bilhões até o ano de 2027. Foi a partir de estudos no sêmen que o número de evidências de que diferentes espécies de microrganismos podem impactar a qualidade seminal tem aumentado nos últimos anos. Alguns dos microrganismos já detectados no sêmen humano, incluem vírus e bactérias que possivelmente apresentam algum tipo de relação com a fertilidade, causando danos a órgãos e células por meio de mediadores inflamatórios. Nesse contexto, esta dissertação tem como objetivo caracterizar os principais tópicos relacionados ao mercado da fertilidade e reprodução assistida na América Latina e Brasil e enfatizar o crescimento do mercado da fertilidade masculina e os desafios enfrentados para o diagnóstico da infertilidade em homens com duas revisões de literatura. Além disso, foram desenvolvidos e validados in silico três painéis PCR-Multiplex para detecção dos principais patógenos que tenham importância clínica já descrita. Os sistemas foram obtidos através do alinhamento de sequências e desenho de primers para identificação de 13 patógenos em amostras de sêmen de pacientes com histórico de infertilidade. Essas descobertas ampliam a perspectiva atual acerca da infertilidade idiopática e indicam direções futuras para investigações, como a análise do papel dos microrganismos no sistema reprodutivo masculino. Todas as informações coletadas nesta dissertação contribuem para novas áreas de pesquisa nos âmbitos de mercado, melhoria de técnicas e diagnóstico de condições relacionadas à infertilidade masculina e saúde reprodutiva global.Dissertação Avaliação do perfil de metaloproteinases em amostras de tecidos de animais infectados experimentalmente com Trypanosoma cruzi(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-06-26) Silva, Dyonatan Fonseca; Silva, Marcelo de Sousa da; Moreno, Cláudia Jassica Gonçalves; https://orcid.org/0000-0002-1000-0149; http://lattes.cnpq.br/1295430560645312; http://lattes.cnpq.br/8302178148944713; Ribeiro, Aline Rimoldi; Moreno, Cláudia Jassica Gonçalves; Torres, Taffarel MeloA doença de Chagas (DCh) tem como agente etiológico o parasito Trypanosoma cruzi (T. cruzi) e caracteriza-se possuir fase aguda e crônica. Durante a fase aguda, o parasito se aloja em tecidos para os quais possui tropismo e desregula citocinas e metaloproteinases de matriz (MMPs), sendo esses os principais fatores de risco para o desenvolvimento de cardiopatias, que são as complicações mais frequentes na fase aguda e crônica da doença. Métodos diagnósticos para predizer a possibilidade de danos aos órgãos do paciente pelo parasito são necessários, mas atualmente só se dispõe de exames de imagem para avaliação dos danos após o desenvolvimento da doença. Portanto, a busca de novos biomarcadores proteicos associados à DCh constitui uma das várias estratégias para melhores prognósticos. O presente estudo teve como objetivo a otimização de métodos baseados em gel, como SDS-PAGE e zimografia, para avaliar se a infecção por T. cruzi seria capaz de alterar o perfil de metaloproteinases de órgãos durante a fase aguda da DCh. Para isso, obteve-se o extrato proteico total das formas epimastigotas da cepa Y de T. cruzi provindas de cultivo axênico e realizou-se a infecção experimental com formas tripomastigotas sanguíneas em camundongos fêmeas que foram separados em três grupos. Coração, baço, fígado e sangue dos animais de todos os grupos foram coletados para a produção de extrato total e plasma sanguíneo. A otimização permitiu a determinação do perfil proteico de T. cruzi, o que revelou bandas com pesos moleculares aproximados de 95, 85, 63, 57, 48 a 52, 43 a 45, 40 a 41 e 29 kDa, que foram discutidas quanto a sua possível identificação e função na infecção. Os resultados também revelaram os perfis proteicos do tecido cardíaco, esplênico, hepático e do plasma nos três grupos analisados. O zimograma de T. cruzi revelou 3 bandas de atividade com pesos moleculares aproximados de 66 kDa, 55 kDa e 35 kDa. No grupo dos animais infectados, diversas metaloproteinases capazes de degradar gelatina foram observadas no zimograma dos tecidos e plasma, em especial no tecido esplênico. Observou-se ainda diferença significativa na atividade enzimática presente no tecido esplênico e cardíaco, sendo a alteração ocorrida no tecido cardíaco relacionada com o aumento na expressão da protease de 93 kDa, provável pró-MMP-9, e de 69 kDa, provável pró-MMP-2 e, no baço, de uma protease desconhecida de aproximadamente 146 kDa. Portanto, com a detecção da existência de alterações na atividade de metaloproteinases nos órgãos analisados durante a fase aguda da DCh, surgem novas questões a serem respondidas acerca do papel dessas MMPs na patogênese da doença, do impacto que inibidores sintéticos de MMPs específicas teriam no desenvolvimento das megalias e cardiopatias e se tais padrões se repetem na fase crônica da DCh, para que então seja possível pensar em tratamentos voltados na inibição de MMPs e na identificação de alterações proteicas características de danos cardíacos da DCh.Dissertação Polissacarídeos sulfatados da alga Caulerpa cupressoides var. flabellata: estudo das propriedades antioxidantes e da biocompatibilidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-09-25) Farias, Pablo Felipe Ferreira; Moreira, Susana Margarida Gomes; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0002-8333-3016; http://lattes.cnpq.br/7741233949116498; http://lattes.cnpq.br/5311747035010045; Scortecci, Katia Castanho; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Oliveira, Douglas DouradoDoenças neurodegenerativas (DN), como Alzheimer e Parkinson, são problemas de saúde mundial que afetam milhões de pessoas, e acredita-se que o estresse oxidativo seja um dos fatores-chave na sua causa e/ou progressão. Assim, a necessidade de buscar agentes antioxidantes capazes de mitigar os efeitos do estresse oxidativo nas DN é de grande importância. Os polissacarídeos sulfatados (PS) obtidos de macroalgas marinhas apresentam-se como uma alternativa devido às suas diversas bioatividades, incluindo atividade antioxidante. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial antioxidante de amostras ricas em PS obtidas da alga marinha verde Caulerpa cupressoides var. flabellata contra o peróxido de hidrogênio (H2O2) em células de neuroblastoma murino (Neuro-2A). Foram obtidas quatro frações de PS da C. cupressoides denominadas CCB-F0.3, CCB-F0.5, CCB-F1.0 e CCB-F2.0, a partir do extrato bruto total de polissacarídeos (EBT). A citotoxicidade das amostras e o efeito protetor contra H2O2 foram avaliados pelo método de redução do Brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT) em células Neuro-2A. Não foram observados efeitos citotóxicos, exceto para as amostras ETB e CCB-F0.5 nas concentrações mais elevadas. A amostra CCB-F2.0 apresentou efeito de proteção contra H2O2, nas condições testadas. Seu efeito antioxidante foi demonstrado pela redução das espécies reativas de oxigênio (EROs), avaliadas pela sonda fluorescente Diacetato de 2,7- diclorofluoresceína (DCFH-DA). O perfil de biossegurança da amostra CCB-F2.0 foi, então, avaliado utilizando diferentes modelos. Essa amostra não apresentou genotoxicidade nem mutagenicidade, pelo ensaio de eletroforese em gel de célula única (ensaio cometa) e pelo ensaio de reversão da Salmonella em microssuspensão (teste de Kado), respectivamente. Adicionalmente, a embriotoxicidade e a resposta optomora também foram avaliadas usando o modelo de zebrafish. Assim, a amostra CCB-F2.0 não demonstrou efeitos embriotóxicos nem neurotóxicos, uma vez que não se observaram alterações na mortalidade, malformações e na resposta optmotora das larvas. Dessa forma, espera-se que os resultados deste estudo possam contribuir para o desenvolvimento de um tratamento alternativo para DN.Dissertação Análise comparativa dos efeitos da microgravidade, calor e hipóxia no padrão de expressão gênica das plantas: uma abordagem bioinformática(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-04-24) Lima, Rafaela Alves de; Scortecci, Katia Castanho; Medeiros, Nathalia Maíra Cabral de; https://orcid.org/0000-0002-4690-2785; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; http://lattes.cnpq.br/1473262804535396; Varani, Alessandro de Mello; Ferreira, Leonardo CapistranoAs plantas são submetidas diariamente a mudanças ambientais e devem responder da melhor maneira para tolerar essas modificações. Alterações de gravidade, hipóxia e calor são exemplos de mudanças ambientais que podem gerar o estresse do tipo abiótico, que tem como principais efeitos desencadear uma sinalização oxidativa. Visto que a microgravidade não é uma condição que naturalmente ocorre na Terra, são necessários alguns métodos de exposição que as coloquem em ambientes com gravidade tendendo a zero. O uso de estações espaciais internacionais e voos espaciais são formas de expor a planta a esse tipo de ambiente. Todavia, ainda não há consenso de todos os efeitos que a microgravidade pode desencadear. Assim, comparar estudos de microgravidade com outros fatores ambientais pode aprimorar a compreensão das respostas das plantas à microgravidade. Neste contexto, realizou-se a integração de dados transcriptômicos oriundos de estudos disponibilizados em plataformas de acesso aberto, os quais investigam os impactos do estresse de microgravidade, hipóxia e térmico em plantas. Visto que essas condições ambientais talvez compartilhem uma sinalização oxidativa. O objetivo dessa integração foi de enriquecer o entendimento das respostas vegetais à microgravidade, calor e hipóxia de forma comparada, bem como explorar os efeitos diferenciais e correlacionados da microgravidade em estação espacial internacional e voo espacial. Sendo assim, ferramentas de bioinformática foram empregadas para identificar genes centrais, ontologias e vias metabólicas significativamente ativadas. Para a integração de dados foi realizada uma seleção de acordo com alguns critérios de inclusão e exclusão. Por exemplo, os estudos deveriam conter as condições de experimento bem explicitadas e comparação de plantas com estresse e sem estresse sendo analisados. Por consequência foram selecionados 16 estudos de microgravidade, sendo 11 de estação espacial internacional e 6 de voo espacial, com 10 estudos de estresse térmico e 9 estudos de hipóxia. Esta integração revelou significativa regulação de genes relacionados à biossíntese de clorofila. Esses resultados sugerem que a fotooxidação pode ser um efeito importante nas condições de microgravidade, hipóxia e calor. Esse efeito parece ser independente do tipo de exposição a microgravidade. Foi observado também uma sobreposição na ativação de vias metabólicas antioxidantes: metabolismo de glutationa e biossíntese de fenilpropanoides, demonstrando que as plantas apresentam vias de homeostase redox utilizando diferentes estratégias. O metabolismo primário, especificamente por meio da produção de açúcares como amido e frutose, é significativamente afetado em condições de hipóxia, calor e microgravidade. Esses açúcares são essenciais para a produção de energia, metabolismo do carbono e sinalização da gravidade. Portanto, a sinalização oxidativa desencadeada pela microgravidade, calor e hipóxia afetou de forma significativa a transcrição de gene ligados a produção de clorofila e o metabolismo primário, contudo, este impacto pode ser mitigado por uma atividade antioxidante intensa. A comparação dessas respostas com as provocadas por outros estresses ambientais fornece perspectivas importantes sobre a capacidade adaptativa das plantas em ambientes com força gravitacional diferente. Tal entendimento é crucial para desenvolver estratégias que aumentem a resiliência de cultivos em contextos de agricultura terrestre e espacial.Dissertação Characterization of Chondroitin-4-Sulfate extracted from Tilapia viscera (Oreochromis niloticus) and evaluation of its effect on the crystallization of Calcium Oxalate(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-05-15) Silva, Marianna Barros; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Souza, Giulianna Paiva Viana de Andrade; http://lattes.cnpq.br/9747224552107070; https://orcid.org/0000-0001-5109-1991; http://lattes.cnpq.br/9200036511632745; http://lattes.cnpq.br/3882800505938474; Queiroz Neto, Moacir Fernandes de; Oliveira, Moacir Franco deGlicosaminoglicanos (GAG) são polissacarídeos sulfatados que podem modular a formação de cálculos urinários. Nesse contexto, a busca por possíveis moduladores do crescimento de cristais tem revelado o efeito promissor de um tipo de glicosaminoglicano, denominado condroitim sulfato (CS). Estudos revelam que os organismos aquáticos são fontes alternativas de condroitim sulfato. Dentre as espécies marinhas, o peixe Oreochromis niloticus, conhecido como tilápia do Nilo foi escolhida para esse trabalho por representar 52% da produção nacional de piscicultura e gerar grande quantidade de rejeitos. O presente estudo teve como objetivo isolar condroitim sulfato de vísceras do O. niloticus e avaliar o efeito modulador desse composto no crescimento de cristais de oxalato de cálcio (OxCa). Para isso, os resíduos da tilapiocultura foram expostos a um processo de proteólise enzimática, seguido de complexação e descomplexação com resina catiônica Lewatit. Esse método permitiu obter uma mistura de GAGs, que em seguida foi exposta a técnicas de purificação baseadas em fracionamentos com acetona e cromatografia de troca iônica. Para caracterizar o material de estudo, foram realizadas análises de espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier e ressonância magnética nuclear demonstraram que o CS purificado era de um condroitim-4-sufato (CSA), e este passou a ser denominado de condroitim sulfato de tilápia (CST). Dentre os resultados obtidos o CST (0,01 mg/mL) diminuiu o tamanho dos cristais de OxCa e aumentou em 15 vezes o número de cristais formados. Ensaios de microscopia de fluorescência mostraram que o CST tem esse efeito por interagir com as faces do cristal monohidrato de OxCa (COM), mas não nos cristais di-hidratados. Já dados de microscopia eletrônica de varredura indicaram que CST altera a morfologia dos cristais COM, fazendo-os assumir uma forma mais longilínea do que aqueles observados no grupo controle. Em paralelo, os testes realizados em células MadinDarby célula renal canina (MDCK) mostraram que CST não apresenta citotoxicidade nas condições avaliadas (0,01 – 0,2 mg/mL). Os dados mostram que o CST é um CSA e que esse modula a formação de cristais OxCa, o colocando em uma posição de um possível agente anti-urolitíase, porém ainda são necessários mais estudos principalmente in vivo.Dissertação Avaliação da resposta bioquímica e potencial biotecnológico Lemna aequinoctialis em ambiente de microgravidade simulada(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-06-21) Santos, John Weslley Lira; Scortecci, Katia Castanho; https://orcid.org/0000-0002-4690-2785; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; http://lattes.cnpq.br/2152398619525301; Theodoro, Raquel Cordeiro; Calsa Júnior, TercilioA compreensão dos efeitos da microgravidade em plantas é ainda limitada, com respostas observadas variando entre diferentes espécies vegetais e condições utilizadas. Este estudo investigou os efeitos da microgravidade simulada em Lemna aequinoctialis, uma planta da subfamília Lemnoideae, importante para biorremediação e alimentação de animais. Utilizando um clinostato 2D para simular a microgravidade, as plantas foram expostas a diferentes rotações (15, 30, 45 rpm) por 2 e 4 horas, além de um controle (0 rpm). O desenvolvimento das plantas foi monitorado em 0, 5 e 10 dias após o tratamento. Análises bioquímicas foram realizadas para medir a quantidade de proteínas, capacidade antioxidante total (CAT), poder redutor, compostos fenólicos e atividade da enzima catalase. Os resultados mostraram que a microgravidade simulada aumentou significativamente os marcadores antioxidantes e a quantidade de proteínas. A CAT e o poder redutor aumentaram até três vezes, especialmente após 4 horas de tratamento. A rotação de 45 rpm por 2 horas resultou em aumentos de compostos fenólicos nos dias 5 e 10, enquanto a rotação de 30 rpm por 4 horas destacou-se no dia 0. A atividade da catalase foi maior com 30 rpm em ambas as durações no dia 10. A quantidade proteica aumentou até sete vezes com 45 rpm por 2 horas. Esses achados sugerem que a microgravidade simulada pode melhorar o perfil nutricional de L. aequinoctialis, potencializando suas aplicações biotecnológicas em produção sustentável de alimentos e biorremediação. Este estudo avança na compreensão dos mecanismos de resposta de L. aequinoctialis à microgravidade.Dissertação Explorando o potencial farmacológico de dissacarídeos de carragenanas como agentes antitumorais: uma abordagem in sílico(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-04-30) Silva, Ohana Letícia Tavares da; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; Alves, Monique Gabriela das Chagas Faustino; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0003-3009-3618; http://lattes.cnpq.br/2669507500272414; Costa, Leandro Silva; Ferreira, Éder GalinariCarregenanas, galactanas sulfatadas, tem atividade antitumoral que pode ser aumentada com sua despolimerização. Isso faz com que seus oligossacarídeos, inclusive dissacarídeos, por serem menos complexos estruturalmente, possam ter potencial farmacológico no tratamento de diferentes neoplasias. No entanto, ainda não se sabe se esses dissacarídeos/oligossacarídeos são farmacologicamente viáveis e por quais mecanismos eles atuam para inibir o crescimento tumoral. Nesse sentido, objetivou-se com esse trabalho utilizar ferramentas de bioinformática para investigar as propriedades farmacológicas e possíveis alvos moleculares de dissacarídeos mais representativos das carragenanas iota, kappa e lambda. Para isso, inicialmente o perfil farmacocinético e as propriedades físico-químicas semelhantes à de fármacos dos dissacarídeos foram previstas. Em seguida previu-se os alvos moleculares desses dissacarídeos, dos quais foram selecionados aqueles que já são alvos de fármacos oncológicos. Para avaliar a capacidade e a afinidade de ligação entre os alvos selecionados e os dissacarídeos, realizou-se docking molecular, e para análise comparativa das energias de ligação, os fármacos oncológicos que atuam sobre esses alvos também foram submetidos a docking. De forma geral, os dissacarídeos apresentaram metabolização, excreção e toxicidade favoráveis, mas enfrentam desafios de permeabilidade em membranas biológicas, o que afeta sua absorção e distribuição. Além disso, eles atendem à maioria dos critérios físico-químicos propostos nos testes de semelhança com fármacos, exceto pela polaridade e lipofilicidade, que ficaram acima e abaixo dos limites desejáveis, respectivamente. Na seleção dos alvos moleculares, cinco alvos comuns foram previstos, as anidrases carbônicas (CAs) I, II, IX, XII e XIV, que já são alvo de inibição de diversos fármacos oncológicos. No docking, as energias de ligação foram semelhantes ou melhores que a dos fármacos já utilizados para esses alvos. Sobre as interações feitas entre os dissacarídeos e as CAs, destacam-se as com cofator zinco, já que é a principal forma de inibir essas enzimas. Essas descobertas apontam um caminho promissor para dissacarídeos de carragenanas como agentes terapêuticos contra o câncer.Dissertação Tenebrio molitor como modelo experimental para comparação de perfis de virulência e resposta imune a fungos patogênicos do gênero Sporothrix(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-04-05) Naliato, Georggia Fátima Silva; Theodoro, Raquel Cordeiro; Arantes, Thales Domingos; https://orcid.org/0000-0001-5016-1046; http://lattes.cnpq.br/0977453259767928; http://lattes.cnpq.br/3686551907646334; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; Bastos, Rafael Wesley; Fernandes, Éverton Kort KampAs doenças causadas por fungos patogênicos possuem um impacto substancial tanto em pacientes imunocomprometidos como imunocompetentes, devido a longos tratamentos que, em alguns casos exigem internação. Neste sentido o diagnóstico espécie e/ou genótipo específico pode melhorar o prognóstico da doença, uma vez que possibilita um tratamento mais assertivo a depender do agente etiológico. Ainda assim, estudos comparativos sobre as relações de parasitismo envolvendo espécies fúngicas próximas, muitas vezes crípticas, de um mesmo gênero, ainda são poucos. A categorização da virulência espécie-específica reflete diretamente no direcionamento terapêutico e prognóstico adotado na clínica podendo assim otimizar a resolução do caso. Diante disso, o modelo padrão ouro de infecção para o aferimento da virulência desses patógenos é o modelo murino, entretanto, atualmente, devido a maior preocupação com questões bioéticas e financeiras, animais invertebrados vêm sendo propostos como alternativas atrativas de modelo de infecção, uma vez que apresentam imunidade inata evolutivamente muito próxima ao mamífero, facilidades infra estruturais e robusta reprodutibilidade de dados. Neste trabalho a virulência de diferentes espécies de importância médica, dos clados clinico e ambiental, do gênero de fungos dimórficos Sporothrix, bem como aspectos da resposta imune inata, foram aferidos no modelo invertebrado Tenebrio molitor, tanto na fase micelial como leveduriforme do fungo. Dessa forma, foi possível comparar perfis de virulência e a relação parasita-hospedeiro entre isolados de espécies do gênero. Observamos diferenças significativas entre as fases micelial e leveduriforme das espécies patogênicas de ambos os clados de Sporothrix. As espécies S. chilensis e S. pallida (clado ambiental) se mostraram mais virulentas na morfologia micelial, enquanto as espécies S. schenckii e S. brasiliensis (clado clínico) se mostraram mais virulentas na morfologia de levedura. Foi quantificada a expressão de peptídeos antimicrobianos (AMP’s) do modelo invertebrado, que mostraram diferença significativa de expressão dos grupos infectados com S. pallida e S. schenckii, evidenciando que há alteração no padrão da resposta imune inata em relação a espécie de Sporothrix que é inoculada no modelo.Dissertação Prospecção de atividade antifúngica e potencial modulador para fármacos de referência em extratos e frações de Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers.(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-05-09) Silva, Melissa Farias Alves da; Uchôa, Adriana Ferreira; Silva, Giulian César da; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0002-9931-2367; http://lattes.cnpq.br/7085509522800469; Taveira, Gabriel Bonan; Scortecci, Katia Castanho; Arantes, Thales DomingosOs fungos patogênicos são um dos principais contribuintes para o crescimento da taxa de mortalidade global associada a doenças infecciosas e o uso indiscriminado de agentes antibióticos e antifúngicos compromete a eficácia do fármaco pelo desenvolvimento de resistência aos patógenos. Além disso, os fármacos de uso clínico podem ocasionar efeitos adversos em organismos não-alvo. Neste cenário, os extratos botânicos e suas frações têm se revelado como fontes promissoras para o desenvolvimento de novos antifúngicos e adjuvantes terapêuticos. No qual, a Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers., uma leguminosa bem adaptada ao semiárido nordestino, tem se destacado por seu biopotencial. Neste contexto, a presente pesquisa objetivou investigar o potencial antifúngico de extratos e frações proteicas obtidas de sementes de T. toxicaria contra Candida albicans, Candida parapsilosis, Cryptococcus gattii e Cryptococcus neoformans, e a sua atividade moduladora para antimicrobianos de referência. Os extratos e frações obtidas pelos métodos de Scopes e Osborne foram parcialmente caracterizados bioquimicamente e avaliados quanto sua atividade antifúngica pela determinação das CIMs (Concentração Inibitória Mínima). Posteriormente a fração mais ativa e suas combinações foram também investigadas quanto sua atividade moduladora com fármacos de uso clínico, através do método de associação (checkerboard) por ICIF (Índice de Concentração Inibitória Fracionada) e por modelos matemáticos. Dos 2 extratos e 13 frações produzidos, todos apresentaram atividade antifúngica contra pelo menos uma das leveduras testadas, em diferentes graus. Em destaque, a fração T 50-75 foi a mais ativa sobre C. gattii, C. neoformans e C. parapsilosis e apresentou a Menor Concentração capaz de Inibir 100% do crescimento (CIM100), com 32 µg/mL contra C. gattii (R-265), seguido do extrato da Semente em Tampão Tris-HCl (ST) com 128 µg/mL e das frações T 50-75 e T 75-100 com 256 µg/mL, todos contra C. gattii (FC1). Portanto, o extrato ST e as frações T 50-75 e T 75-100 foram os mais promissores ao apresentarem os menores valores de CIM e por isso foram selecionadas para investigação do seu potencial modulador em combinação com Anfotericina B, Fluconazol e 5-Flucitosina sobre C. gattii. Todas as combinações testadas foram capazes de reduzir a CIM e após harmonização dos dados, as combinações entre as frações T 50-75 e T 75-100 com Anfotericina B e Fluconazol foram classificadas como sinérgicas e as combinações com a fração T 50-75 apresentaram maior sensibilidade (93%) e grau de intensidade sinérgica. A combinação da fração T 50-75 com os fármacos causou maiores interferências na curva de crescimento, na melanização e significativa redução do tamanho da cápsula. Entretanto, a exposição de C. gattii ao tratamento com a fração T 50-75 isolada também causou alterações morfológicas na parede celular e cápsula, indicando que a fração contribuiu fortemente para o resultado observado na combinação com o fármaco. Portanto, a fração T 50-75 se apresenta como uma candidata promissora ao desenvolvimento de adjuvantes e/ou novos fármacos para a quimioterapia antifúngica. A análise dos resultados sugere que a ação fungistática da fração T 50-75 pode contribuir para minimizar o surgimento de resistência no patógeno, agindo em vias redundantes e reduzindo as concentrações efetivas dos fármacos de referência clínica, melhorando, assim, o tratamento e minimizando a toxicidade gerada.Dissertação Prospecção da atividade antioxidante in vitro e in vivo dos extratos da semente de chañar (Geoffroea decorticans) (Gill. ex Hook. et Arn.) Burkart (Fabaceae)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-12-22) Silva, Ariana Pereira da; Scortecci, Katia Castanho; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0002-4690-2785; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; http://lattes.cnpq.br/8723484019767923; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Meneses, Carlos Henrique Salvino GadelhaA utilização de plantas para propósitos medicinais é uma prática ancestral, caracterizada pelo emprego de diversas partes desses organismos como recursos terapêuticos complementares. A Geoffroea decorticans, conhecida popularmente como Chañar, é uma planta nativa do Chile, pertencente à família das Fabaceae, Todas as partes dessa planta possuem uso na medicina popular, indo desde atividade expectorante, incluindo distúrbios broncopulmonares e alívio das dores, além de atividade antioxidante e antinociceptiva. No entanto, há poucos estudos relatando tais atividades com extratos da semente de Chañar. Posto isso, nosso trabalho teve como objetivo avaliar e caracterizar o potencial antioxidante, citotóxico e de proteção frente ao estresse oxidativo induzido por sulfato de cobre (CuSO4) dos extratos etanólico (EE) e aquoso (EA) da semente de Chañar utilizando metodologias in vitro e in vivo. Os dois extratos produzidos tiveram sua caracterização fitoquímica realizada por meio de HPLC – GC-MS/MS além de ensaios expectofotométricos como: compostos fenólicos totais e flavonóides totais. Posteriormente, foram realizados ensaios bioquímicos com o intuito de avaliar o potencial antioxidante in vitro por meio de cinco ensaios espectrofotométricos (Capacidade antioxidante total-CAT, poder redutor; 2,2-difenil-1-picril-hidrazil-DPPH; quelação de cobre e ferro) que visaram verificar os possíveis modos de ação pelos quais estes compostos bioativos estariam contribuindo com a manutenção da homeostase redox celular. Foi utilizada também a linhagem celular de fibroblastos 3T3 ATCCCCL-92 para avaliar a citotóxicidade, do EE e EA, bem como o papel protetivo dos extratos quando esta linhagem celular foi submetida ao agente estressor sulfato de cobre (CuSO4), além do potencial em induzir ou não a migração celular. Após a realização dos testes in vivo, os extratos foram avaliados em modelo animal invertebrado Tenebrio molitor. Com esse modelo, foram realizados ensaios de sobrevivência onde foi avaliada a toxicidade dos extratos assim como a capacidade protetora contra estresse oxidativo por sulfato de cobre, avaliando também parâmetros de melanização. Deste modo, os resultados obtidos por cromatografia detectaram a presença de metabólitos secundários como: Fitol; Alfatocoferol; Vitexina e Rutina. Os ensaios espectrofotométricos in vitro demonstram a capacidade antioxidante dos extratos atuarem por diferentes mecanismos de ação (inibindo, sequestrando e quelando). Enquanto os ensaios em modelo celular 3T3 demonstraram a ausência de citotóxicidade do EE e EA, e também conferiram proteção frente ao estresse oxidativo induzido por CuSO4 e a capacidade de migração celular. No modelo animal utilizado, os extratos mostraram mais uma vez a excelente capacidade protetora frente ao estresse oxidativo, capaz de combater radicais livres gerados, mitigando a melanização exacerbada. Tomados em conjunto os resultados dos ensaios (in vitro e in vivo) os extratos EE e EA das sementes de Chañar podem ser considerados como fonte de compostos bioativos com excelentes propriedades antioxidantes, fortalecendo também a utilização dos derivados gerados pela planta, visto que a depender do consumo da fruta, as sementes são tidas como um resíduo da cultura e os resultados apresentados mostra seu potencial antioxidante.Dissertação Caracterização e expressão gênica de cepas ambientais do gênero acinetobacter sp. na biodegradação de petróleo(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-12-01) Silva, Belicia Santana da; Lima, Lucymara Fassarella Agnez; https://orcid.org/0000-0003-0642-3162; http://lattes.cnpq.br/1083882171718362; https://orcid.org/0000-0001-6707-2269; http://lattes.cnpq.br/6283135269529122; Rodrigues, Thiago Bruce; Melo, Vânia Maria MacielA poluição derivada do petróleo pode ter impactos significativos e duradouros no meio ambiente. A biorremediação surge como uma alternativa viável para abordar essa problemática. Vários estudos destacam o potencial biotecnológico de cepas ambientais de Acinetobacter baumannii para a biorremediação. No entanto, é essencial aprofundar a compreensão dos mecanismos genéticos dessa espécie para otimizar seu potencial biotecnológico. Portanto, este trabalho tem como objetivo caracterizar cepas de Acinetobacter baumannii oleumficedula, identificando os genes relacionados à biodegradação de hidrocarbonetos, bem como sua presença nas vias de degradação, e analisar a expressão dos genes-alvo. Para tanto, foram realizadas análises de produção de biossurfactantes, estimativa de degradação de hidrocarbonetos, análises de expressão dos genes e avaliação do genoma das cepas. A partir dessas análises, foi possível constatar a eficiência de todas as cepas na produção de biossurfactante, com estimativas de degradação de hidrocarbonetos variando de 7,94% a 69,82%. Foram identificados aproximadamente 81 genes diferentes associados à biorremediação em 16 vias metabólicas distintas. A expressão positiva de todos os 12 genes observados sugere um potencial promissor. Ao examinar o contexto genômico, foi verificada a similaridade genética das cepas. No entanto, mesmo apresentando similaridades genéticas, as cepas exibem diferenças fenotípicas significativas, possivelmente atribuídas à presença de um regulador mestre ou regulon. Em resumo, pode-se inferir que todas as cepas são promissoras para aplicação na degradação de hidrocarbonetos.